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Human PDGF-BB ELISA Kit 人血小板衍生生長因子ELISA檢測試劑盒

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詳細介紹

 

血小板衍生生長因子(PDGF)是由二硫鍵連接二聚體蛋白組成,其家族共有四種同二聚體蛋白質組成,分別為PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-CC和PDGF-DD,以及一種異二聚體,PDGF-AB,主要作用于結締組織。PDGF-BB可與PDGFR-β結合,隨后激活幾個細胞內信號級聯,包括MAPK和PI3K/Akt通路,進而激活下游靶mTOR和p70S6K。PDGF-BB在胚胎發育、細胞增殖、細胞遷移、存活和趨化性的調節中發揮著重要作用。作為一種同源二聚體,也是間充質來源細胞的有效有絲分裂原,是中樞神經系統、皮膚、肺、心臟和胎盤中周細胞和血管平滑肌細胞正常增殖和募集所必需的。PDGF-BB也對正常的血管發育、腎小球的正常發育和傷口愈合至關重要。

翌圣Human PDGF-BB ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿和細胞培養上清中的人血小板衍生生長因子(Human PDGF-BB)。特異性抗人血小板衍生生長因子抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經過孵育,樣本中存在的人血小板衍生生長因子與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入檢測抗體孵育結合,經洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人血小板衍生生長因子的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

 

產品信息

貨號

97042ES48 / 97042ES96 

規格

48 T / 96 T

檢測范圍

15.63-1000 pg/mL

檢測方法

雙抗夾心法

檢測時長

4.5小時

靈敏度

4.8 pg/mL

稀釋線性

79.0 - 121%

回收率

77.0 - 114%

板內差

3.8%

板間差

5.0%

 

實驗數據

  1. 標曲數據

濃度(pg/mL)

顯色值

平均值

校準值

1000

3.047

2.996

3.022

3.023

500

1.782

1.779

1.780

1.773

250

0.818

0.873

0.845

0.859

125

0.387

0.398

0.392

0.384

62.5

0.188

0.186

0.187

0.179

31.3

0.105

0.101

0.103

0.099

15.63

0.057

0.058

0.057

0.068

0

0.019

0.019

0.019

/

數據擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數據分析

 

標準曲線

  1. 靈敏度檢測

PDGF-BB的最低檢測限為4.8 pg/mL,通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。

  1. 精密度檢測

酶標板內精密度

3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定10次,評估酶標板內的精密度。

酶標板間精密度

3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測24次,評估酶標板間的精密度。

項目

板內精密度

板間精密度

樣本

1

2

3

1

2

3

10

10

10

24

24

24

平均值

594.4

166.8

44.3

603.3

166.6

44.7

標準差

16.3

5.2

2.5

20.1

6.6

3.5

變異系數%

2.7

3.1

5.6

3.3

4.0

7.8

  1. 回收率檢測

 通過不同水平的PDGF-BB添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

樣本類型

平均回收率(%)

范圍(%)

血清

89.8

76.7-106.8

血漿

104.1

94.6-113.9

細胞培養上清

89.7

78.2-102.4

  1. 稀釋線性檢測

血清稀釋比例

平均期望值(%)

范圍(%)

1:02

99.5

83.8-111.6

1:04

95.8

83.5-108.9

1:08

98.6

84.7-110

1:16

106.6

92.6-121

 

血漿稀釋比例

平均期望值(%)

范圍(%)

1:02

115.6

115.2-116

1:04

114.6

113.3-115.9

1:08

105.1

102.7-107.6

1:16

104.3

98.2-110.4

 

細胞培養上清稀釋比例

平均期望值(%)

范圍(%)

1:02

105.5

85-116.5

1:04

99.5

82.2-119.5

1:08

99.0

79.1-118

1:16

103.5

86.9-120.0

  1. 樣本值

應用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

樣本類型

樣本數目

平均值(ng/mL)

樣本值(ng/mL)

血清

10

1554

680-2103

EDTA血漿

6

2027

682-3586

細胞培養上清

4

n.d.

n.d.

n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得15.63 pg/mL

  1. 測定特異性

本試劑盒識別天然和重組PDGF-BB,沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。

Recombinant Human:

Recombinant Mouse:

β-ECGF

IGF-1

GM-CSF

β-NGF

IGF-2

IFN-γ

EGF

PD-ECGF

PDGF-CC

FGF acidic

PDGF-AA

TNF-α

FGF basic

PDGF-CC

 

FGF-4

PDGF Rα

 

FGF-5

SPARC

 

FGF-6

VEGF

 

HB-EGF

 

 

 

Ver. CN20231102

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