產品簡介  

本試劑盒利用獨特的磁珠與緩沖液系統，可以特異性地吸附RNA，有效去除蛋白、鹽離子和其它雜質。常用于純化去除rRNA后的總RNA樣本，體外轉錄的RNA產物，RNA標記產物以及合成的RNA等。純化后的RNA適用于RNA文庫構建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等實驗。

產品信息

儲存條件

2~ 8℃保存，有效期2年。

使用說明

所需額外試劑：

100% 乙醇，Nuclease-free水，磁力架，Nuclease-free離心管。

實驗前準備：

1. 將RNA clean beads 從4 ℃取出，平衡至室溫（約30 min）。
2. 在一個Nuclease free PCR管中，用Nuclease-free水將0.5-5 μg總RNA稀釋至50 μL。

RNA純化：

1. 顛倒或渦旋振蕩使磁珠充分混勻，吸取2×磁珠（100 μL）加入總RNA樣品中（50 μL），用移液器吹打6次充分混勻。
2. 室溫孵育5 min，使RNA結合到磁珠上。
3. 將樣品置于磁力架上5 min，待溶液澄清后，小心移除上清。
4. 保持樣品置于磁力架上，加入200 μL新鮮配制的80%乙醇,漂洗磁珠，室溫孵育30 s，小心移除上清。

【注】漂洗時使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鮮配制，以防止引入RNase酶導致RNA降解。

5. 重復步驟4，共漂洗2次。
6. 保持樣品始終處于磁力架上，開蓋空氣干燥磁珠5 min。

【注】磁珠開蓋晾干時要避免過分干燥，如果磁珠出現龜裂，則提示磁珠過分干燥，此時RNA的洗脫效率會降低。

7. 將樣品從磁力架上取出，加入12 μL Nuclease-free 水，用移液器吹打6次以充分混勻，室溫靜置5 min。
8. 將樣品置于磁力架5 min，待溶液澄清后，小心轉移上清10 μL至一個新的Nuclease-free PCR管中。

【注】建議轉移上清時留2-3 μL液體，以免吸到磁珠影響后續實驗。得到的RNA極不穩定，建議盡快進入下一步。若要保存，請置于-80℃保存。

注意事項

1. 本產品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

3. 磁珠使用前一定要平衡到室溫后混勻，否則可能影響樣品的回收效率。

4. 操作過程要嚴格保證無RNase酶和核酸污染。

5. 80%乙醇需現用現配，否則將影響回收效率。

6. 本試劑盒和其他試劑配套使用時，請按照具體實驗說明來進行操作。

結果展示

使用總RNA純化試劑盒純化前后，RNA樣品qRT-PCR Ct值變化

【注】使用Hieff NGS® RNA Cleaner可以有效去除影響RT-PCR的抑制劑，讓檢測結果更加真實。

Ver.CN20240408