
- 2025-01-10 17:04:57雙反相液相色譜-質譜新方法
- 雙反相液相色譜-質譜新方法是一種結合了雙反相液相色譜與質譜技術的分析手段。該方法利用兩種不同極性的流動相系統,在單次進樣中實現樣品在不同極性條件下的分離,提高了分離效率和分辨率。隨后,通過質譜技術對分離后的化合物進行定性和定量分析,具有高靈敏度、高選擇性和高通量的特點。該新技術在復雜樣品分析、藥物代謝研究及環境污染物檢測等領域展現出廣泛應用潛力。
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雙反相液相色譜-質譜新方法資訊
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雙反相液相色譜-質譜新方法問答
- 2025-04-18 17:45:16液相色譜質譜聯用儀如何使用?
- 液相色譜質譜聯用儀(LC-MS)是現代分析化學中廣泛應用的一種儀器,它結合了液相色譜(HPLC)和質譜(MS)技術的優勢,能夠高效地分離、鑒定和定量分析復雜樣品中的化合物。隨著科學技術的不斷發展,LC-MS已成為環境監測、藥物分析、食品安全、臨床診斷等領域不可或缺的工具。本文將深入探討液相色譜質譜聯用儀的使用原理、應用領域及其優勢,幫助讀者了解這一儀器的廣泛用途和重要性。 液相色譜質譜聯用儀的工作原理基于液相色譜與質譜的結合。液相色譜用于分離復雜樣品中的各組分,質譜則通過測量離子的質量與電荷比(m/z)進行分析,進而確定分子的結構和質量。這種聯用方式使得LC-MS能夠提供比單一技術更為全面和精確的分析結果。在操作過程中,液相色譜首先將樣品中的各組分按照其化學性質進行分離,分離后的組分被導入質譜進行進一步的檢測和定量分析。 LC-MS儀器的主要優勢之一是其的靈敏度和高分辨率。相比傳統的色譜分析方法,液相色譜質譜聯用儀在檢測低濃度樣品時具有明顯的優勢,能夠精確識別復雜矩陣中的微量物質。由于質譜具有極高的選擇性,LC-MS能夠有效避免樣品中干擾物質的影響,確保分析結果的準確性和可靠性。 在應用方面,液相色譜質譜聯用儀廣泛用于多個領域。在藥物研發中,LC-MS能夠精確測定藥物的含量和代謝產物,為藥物的安全性和有效性評估提供數據支持。在環境監測中,LC-MS可以檢測水質、空氣和土壤中的有害物質,如農藥殘留、重金屬和有機污染物。在食品安全領域,LC-MS被用來檢測食品中的有害物質和添加劑,如激素、抗生素和食品染料等。LC-MS還在臨床診斷中應用,幫助醫生分析患者體內的代謝物,進而診斷疾病。 液相色譜質譜聯用儀的使用不僅限于上述領域,還可以應用于法醫分析、化學品鑒定等眾多研究方向。其高通量、高精度的特點,使其成為化學分析中不可或缺的重要工具。隨著技術的不斷進步,液相色譜質譜聯用儀在各行業中的應用將越來越廣泛,未來將繼續為科學研究和工業應用提供強大的支持。 液相色譜質譜聯用儀作為一種先進的分析工具,憑借其獨特的分離與分析能力,在各個領域中發揮著不可替代的作用。隨著技術的不斷發展,液相色譜質譜聯用儀的應用前景將更加廣闊,為科研人員和工程師提供更加高效、的分析手段,推動各行各業的創新與發展。
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- 2025-04-14 18:30:13反相液相色譜蛋白質原理是什么?
- 反相液相色譜(Reverse Phase Liquid Chromatography, RPLC)是一種基于疏水相互作用的高效分離技術,廣泛應用于蛋白質及多肽的分離、純化與分析。其核心原理在于固定相與流動相的極性差異,以及樣品分子與固定相之間的疏水分配效應。以下將從分離機制、蛋白質特異性行為、固定相與流動相選擇、應用場景等角度展開說明。 反相色譜的固定相通常由疏水性材料(如C18、C8或C4鍵合硅膠)構成,而流動相為極性溶劑(如水、甲醇或乙腈)。分離過程中,蛋白質的疏水區域與固定相發生非共價結合,極性較強的分子優先被流動相洗脫,疏水性更強的分子則因保留時間延長而實現分離。梯度洗脫是優化分離效果的關鍵手段,通過逐步增加有機溶劑比例削弱疏水作用,從而按疏水性差異依次洗脫目標分子。 蛋白質在反相色譜中的行為具有特殊性。由于流動相中常添加三氟乙酸(TFA)等離子對試劑,蛋白質可能發生部分去折疊,暴露出內部疏水殘基,增強與固定相的相互作用。此外,低濃度TFA可誘導蛋白質形成伸展構象,導致其在死時間前洗脫;而高濃度TFA通過形成離子對使蛋白質構象緊湊(如“熔融球體”),延長保留時間。這種構象敏感性使反相色譜不僅能分離蛋白質,還可用于研究其構象穩定性與表面疏水性。 固定相的選擇需綜合考慮蛋白質大小與疏水性。C18和C8適用于小分子肽段,而C4因較短的烷基鏈更適合大分子蛋白質,避免過度保留。流動相中,乙腈因低黏度和高洗脫能力成為首選有機溶劑,TFA則通過抑制硅醇基電離減少峰拖尾。梯度優化需平衡分辨率與時間成本,例如降低最大有機溶劑濃度可改善峰分離,但可能延長分析周期。 在應用層面,反相色譜憑借高分辨率與質譜兼容性,成為蛋白質組學研究的重要工具。其典型場景包括:多肽藥物的純度分析、酶解產物的肽圖繪制、翻譯后修飾(如磷酸化、糖基化)的檢測,以及蛋白質構象變化的動態監測。例如,與質譜聯用時,反相色譜可分離復雜肽段混合物,通過質譜鑒定實現蛋白質序列的高通量解析。此外,其在治療性抗體表征中的應用也日益增多,尤其在檢測聚集體與降解產物方面表現卓越。 操作參數的設置直接影響分離效能。流速需根據色譜柱內徑與填料粒徑調整,通常內徑4.6mm的C18柱推薦流速為1mL/min。壓力上限需控制在柱耐受范圍內(通常≤6000psi),以避免固定相塌陷。檢測方法方面,紫外檢測(280nm)依賴蛋白質中芳香族氨基酸的吸收,而質譜聯用可提供分子量及結構信息,靈敏度更高。 總之,反相液相色譜通過疏水相互作用與動態梯度洗脫,實現了蛋白質的高效分離與分析。其獨特的構象敏感性、靈活的固定相選擇及與質譜的兼容性,使其在生物醫藥與基礎研究中不可或缺。未來,隨著新型固定相(如表面多孔顆粒)與微流控技術的發展,反相色譜在蛋白質分析中的分辨率與通量將進一步提升。
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- 2025-04-18 17:45:16液相色譜質譜聯用儀的步驟有哪些?
- 液相色譜質譜聯用儀的步驟 液相色譜質譜聯用儀(LC-MS)是現代分析實驗室中常見且重要的工具,廣泛應用于化學分析、藥物研發、環境監測等多個領域。它結合了液相色譜(LC)和質譜(MS)兩種分析技術,通過液相色譜分離樣品中的各個組分,再利用質譜進行檢測與定性分析,為復雜樣品的精確分析提供了有力的支持。本文將詳細介紹液相色譜質譜聯用儀的操作步驟,幫助研究人員更好地理解并掌握其應用技巧。 1. 樣品準備 液相色譜質譜聯用的步是樣品準備,通常包括樣品的提取、溶解以及濾過等處理。根據樣品的性質,選擇合適的溶劑進行溶解,并確保溶液的濃度適合進行分析。對于復雜樣品,可能需要先進行濃縮或分離,以去除干擾物質。使用適當的過濾裝置(如0.22 μm濾膜)對樣品進行濾過,避免顆粒物進入色譜系統,影響分析結果。 2. 液相色譜系統的設置 液相色譜系統是LC-MS中的核心部分,主要用于樣品的分離。在開始分析前,需要根據目標化合物的性質選擇合適的色譜柱、流動相及流速。通常,選擇反相色譜柱用于大多數分析,其流動相一般由水和有機溶劑(如甲醇或乙腈)組成。流速的設置應根據柱子的尺寸和樣品的性質來調節,以確保佳的分離效果。色譜柱的溫度和壓力也需要根據實驗條件進行調整。 3. 質譜系統的校準 在進行液相色譜質譜聯用分析之前,需要對質譜系統進行校準。通過使用標準物質或質譜校準液,檢查質譜儀的靈敏度、分辨率及質量準確性。校準不僅能夠確保數據的準確性,也有助于提高系統的重復性和穩定性。質譜的模式選擇(如正離子模式或負離子模式)需根據目標分析物的特性進行優化。 4. 數據采集與分析 在LC-MS聯用儀的操作過程中,液相色譜系統將樣品中的各個組分按其物理化學性質分離,而質譜系統則對這些分離的組分進行質譜分析,生成質量-電荷比(m/z)譜圖。在這個過程中,實驗人員應密切關注色譜圖和質譜圖的信號強度、峰形以及響應時間。通過分析質譜圖的峰位和強度,可以實現目標化合物的定性與定量分析。LC-MS系統通常還具備串聯質譜(MS/MS)功能,可以進一步提高分析的特異性和靈敏度。 5. 數據處理與報告 數據采集后,分析人員應利用專門的軟件對質譜圖進行處理,提取關鍵信息,如各個目標物質的保留時間、質量峰和相應的定量數據。在這一過程中,可以應用峰面積、峰高等方法進行定量計算。研究人員需要撰寫實驗報告,詳細記錄實驗過程、分析結果和數據處理方法,確保結果的可靠性和可重復性。 6. 儀器維護與質量控制 為了保持液相色譜質譜聯用儀的長期穩定性,定期的儀器維護和質量控制是必要的。色譜柱和質譜探測器的更換、流動相的過濾、儀器內部管路的清洗等操作,都需要定期進行。建立標準化的操作流程和質量控制標準,有助于提高實驗數據的可信度和可重復性。 結論 液相色譜質譜聯用儀是一種高效、的分析工具,在各類復雜樣品的分析中展現出其獨特優勢。了解并掌握LC-MS的操作步驟,對于提升分析的效率和準確性至關重要。隨著技術的不斷進步,液相色譜質譜聯用儀將在更多領域中發揮更大的作用。
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- 2023-01-04 12:28:49【新方法】光熱聯合兩步連續制備多功能雙環內酰胺
- 研究背景連續多步合成的成功案例多有報道,但是光化學連續合成的報道還是比較少。將光化學反應過程嵌入到多步連續合成,困難在于要么需要額外的純化步驟,要么是實際反應過程中光源的選擇和實驗方法不匹配。紫外(UV)輻射驅動的烯丙基烯胺的三重感光[2+2]交叉偶聯反應,是制備2-氮雜雙環[2.1.1]己烷衍生物的有效方法。在馬來酸酐存在下,2-氮雜雙環[2.1.1]己烷衍生物,繼續在高溫條件下經過一系列的熱電循環偶聯過程,得到多功能的雙環內酰胺。該過程在釜式反應中存在一些問題:第 一步光催化反應受到光透過率的影響難以放大;第二步加熱反應,溫度超過了溶劑的沸點,需要加壓,有一定的安全隱患;另外,產品用甲醇重結晶,在過濾的時候容易堵塞;同其他高溫反應一樣,短時間準確跟蹤反應也不容易。圖1. 光熱聯合制備多功能雙環內酰胺英國布里斯托大學的Dr. Alastair Lennox等,對該反應的兩步連續化進行了研究,實現了將光熱聯合兩步連續制備多功能雙環內酰胺。圖2. 兩步連續反應圖3. 實驗裝置圖實驗研究圖4. 工藝流程示意圖研究者對光敏劑及用量,反應溶劑,流速和光源功率等做了一系列的研究。通過實驗條件篩選,最 終確定第 一步光化學反應以FEP 管線 (3.12 mm 2.7 mm) 作為反應器,反應器持液體積160 mL;乙腈為溶劑,2,7-Dimethoxy-thioxanthen-9-one 作為光敏劑,流速3 mL/min ,在700w 455 nm光源照射下反應,中間體2收率可以達到98%;在接收到約40 mL反應液后,開始第二步反應。第 一步反應液和馬來酸酐的乙腈溶液混合后,經過一個持液體積30 mL,反應溫度200 ℃的反應器,反應時間5 min,背壓34 bar;經過1小時的穩定運行,接收到360 mL反應液,反應液濃縮到約100 mL后,冷卻析晶。固體過濾并用乙 醚洗滌得到20.4 g產品,總收率63%。總結該研究展示了光熱反應進行組合形成兩步連續的工藝;該工藝可以減少兩步反應中間的分離純化過程;連續流工藝可以在背壓下提高反應溫度;連續流反應器在線反應體積小,減少反應風險;該研究提供了快速獲得新型分子結構的一條途徑。參考文獻:Org. Process Res. Dev. 2021, 25, 8, 1943–1949
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- 2022-03-12 15:38:02技術服務,技術培訓LCMSMS三重四級桿液相色譜質譜聯用儀
- 譜標科技工程師現場培訓LCMSMS三重四級桿液相色譜質譜聯用儀、GCMSMS三重四極桿氣相色譜質譜聯用儀相關安裝,調試,維保等技術服務。1,安捷倫三重四級桿液相色譜質譜聯用儀LCMSMS 6764+1290 串聯原理:以液相色譜作為分離系統,質譜為檢測系統。樣品在質譜部分和流動相分離,被離子化后,經質譜的質量分析器將離子碎片按質量數分開,經檢測器得到質譜圖。 三重四級桿液相色譜質譜聯用儀,液質質對流動相的級別要求比較高,有機試劑都是國外進口的高純色譜級試劑,水也使用的是屈臣氏的去離子水,而且需每天更換以防止長菌等造成質譜污染。質譜放置一段時間后需進行調諧, .以保證各項性能參數均處于zui佳狀態,獲得高品質、準確的質譜圖,.確保檢測結果的可靠性。調諧液需在保質期內使用,保質期為一年。根據需要清洗離子源,更換泵油,更換電子倍增器等,所以,液質在提供可靠監測數據的同時,耗費成本比較高,維護難度也高。 2,三重四極桿氣相色譜質譜聯用儀GCMS-TQ8030可以作為單四極桿GCMS使用。已有的單四極桿GCMS方法中的儀器參數可以直接調用作為MRM時的儀器參數。GCMS和并用GCMSMS軟件使用相同的操作平臺,用戶可以輕松掌握。 我們的儀器交付流程:嚴選貨源:九成新機,拒絕嚴重損毀或故障的設備,優選歐美、日本保養得當,性能穩定的設備清洗整理:拆機清理擦拭,保持儀器內外清潔性能確認:按照規定參數性能達標,確認設備可靠應用匹配:高準確率和匹配率實現對目標應用的匹配驗收交付:免費上門安裝培訓,直到客戶滿意并驗收回訪跟進:主動持續回訪跟進,了解儀器的使用情況,完善服務譜標科技擁有專業技術服務團隊,提供專業的技術服務,是進口高端二手儀器值得信賴的供應商。
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