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  光明乳業一抹 2008-02-15 00:00:00

  高度分化的動物細胞 細胞核有全能性 你的題目應該是克隆哺乳動物的原理吧

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  男人狠有道丶 2008-02-15 00:00:00

  單克隆抗體的制備2006-09-30 16:58實驗題目：單克隆抗體的制備 教 師：XXX實驗類型：綜合 學 時：16 (參考)內 容：一、實驗目的：單克隆抗體制備是細胞免疫學的一個重要里程碑，它涵蓋了細胞培養、細胞融合、免疫動物和抗體效價檢測等各個方面內容。了解單克隆抗體制備的原理、主要步驟和方法。二、實驗原理： 瘤細胞在體外培養能大量無限增殖，但不能分泌特異性抗體；而抗原免疫的B淋巴細胞能產生特異性抗體，但在體外不能無限增殖。將免疫脾細胞與瘤細胞融合后形成的雜交瘤細胞，繼承了兩個親代細胞的特性，既具有瘤細胞能無限制增殖的特性，又具有免疫B細胞合成和分泌特異性抗體的能力。經在HAT培養基[含有次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中進行選擇性培養，未融合的脾細胞因不能在體外長期存活而死亡；未融合的瘤細胞合成DNA的主要途徑被培養基中的氨基蝶呤阻斷，又因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶（HGPRT），不能利用培養基中的次黃嘌呤完成DNA的合成過程而死亡。只有融合的雜交瘤細胞由于從脾細胞獲得了次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶，因此能在HAT培養基中存活和增殖。經過克隆選擇，可篩選出能產生特異性單克隆抗體的雜交瘤細胞，在體內或體外培養，即可無限制地大量制備單克隆抗體。 三、試劑與器材：細胞培養板、解剖器械、平皿、酶標儀、加樣器、細胞計數板、CO2培養箱、倒置顯微鏡等。四、操作方法：1、抗原制備； 2、免疫動物；3、免疫脾細胞和瘤細胞的制備；4、細胞融合； 5、雜交瘤細胞的選擇培養；6、雜交瘤細胞的篩選； 7、雜交瘤細胞的克隆化；8、單克隆抗體的檢定；9、分泌單克隆抗體雜交瘤細胞系的建立；10、單克隆抗體的大量制備。五、關鍵步驟與注意事項：1、整個制備過程需嚴格無菌2、細胞傳代培養時注意適時更換培養液六、思考題：1、單克隆抗體用什么進行鑒定？注意事項有那些？2、雜交瘤細胞培養過程中有哪些注意事項？ 3、單克隆抗體和多克隆抗體有何異同？ 以上資料轉自生物操作專門站，更多生物實驗信息請查看:生物操作專門站-生物實驗欄目 生物操作專門站:專門的收集和整理生物實驗，生物前沿，生物電子書，生物軟件，生物考研，生物論文，生物試劑配置，實驗方法，實驗步驟，實驗解決方案，實驗安全等生物實驗相關資料，是科研人員的好幫手

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