草甘膦是一種非選擇性、無殘留滅生性除草劑，對多年生根雜草非常有效，廣泛用于橡膠、桑、茶、果園及甘蔗地。草甘膦的使用量逐年增加，給農作物、人類健康以及生態環境帶來了一定的安全隱患。目前常用草甘膦及其代謝物的檢測方法通常存在操作時間長、需要衍生等問題。

方法優勢

　　迪馬科技在參考各種標準及文獻的基礎上，建立了水果中草甘膦及其代謝物氨甲基膦酸的測定SPE-UPLC-MS/MS法：采用水提取，ProElut GLY固相萃取專用柱凈化樣品，收集流出液，Dikma Polyamino HILIC色譜柱分離檢測，該方法特點：

       1) 前處理步驟少，提取液直接通過凈化柱接收流出液即可；

       2) 有機溶劑消耗量小，前處理過程中也無需使用酸堿試劑；

       3) 儀器分析簡單，樣品無需衍生直接分析，可提高結果穩定性及減少實驗成本；

       4) 方法定量限0.05 mg/kg。

       以下為詳細解決方案，敬請參考！

水果中草甘膦及其代謝物的測定SPE-UPLC-MS/MS法

01 適用范圍

       本方法適用于蘋果和橘子中氨甲基膦酸和草甘膦的檢測，定量限0.05 mg/kg。

02 標準品配制

       單標標準儲備液：準確稱取各標準品，用水配制成1000 μg/mL的單標標準儲備液。

       混標標準中間液：分別吸取各單標標準儲備液，用水配制成1.0 μg/mL和10 μg/mL的混標標準中間液。

03 提取

       取2 g樣品于50 mL離心管中，加入8 mL水、10 mL二氯甲烷，振蕩10 min，超聲10 min，8000 rpm離心5 min，取全部上清液于10 mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻，取5 mL，待凈化。

04 凈化

       ProElut GLY 6 mL (Cat.#: 65938）

       1.活化：依次加入5 mL甲醇、5 mL水，棄去流出液；

       2.上樣：將待凈化液加入柱中，棄去前3 mL流出液，收集后2 mL流出液，混勻，濾液過0.22 μm尼龍濾膜，上機分析。

       注：同方法制備基質匹配標準溶液。

05 UPLC-MS/MS條件

5.1 UPLC條件

       色譜柱：Dikma Polyamino HILIC, 150 × 2.0 mm, 5 μm (Cat.#：99302)

       流速：0.2 mL/min      

       進樣量：10 μL

       柱  溫：35 ℃

       流動相：A:乙腈 B:5 mM乙酸銨溶液，氨水調節至pH=11

       梯度設置：

5.2 質譜條件

       電離模式：ESI

       掃描方式：負離子掃描 

       檢測方式：多反應監測    

       電噴霧電壓：-4500 V

       霧化氣壓力：60 psi       

       輔助氣壓力：60 psi

       氣簾氣壓力：35 psi       

       離子源溫度：550 ℃

       定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表：

06 添加回收結果

       水果中草甘膦和氨甲基膦酸的SPE-UPLC-MS/MS檢測添加回收結果：

草甘膦10 ng/mL標準品XIC圖

草甘膦50ng/mL標準品XIC圖

草甘膦100ng/mL標準品XIC圖

草甘膦250 ng/mL標準品XIC圖

草甘膦500 ng/mL標準品XIC圖

草甘膦的標準曲線圖

R^2= 0.9990

標準曲線濃度分別為: 10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、250 ng/mL、500 ng/mL

氨甲基膦酸10 ng/mL標準品XIC圖

氨甲基膦酸50 ng/mL標準品XIC圖

氨甲基膦酸100 ng/mL標準品XIC圖

氨甲基瞵酸250ng/mL標準品XIC圖

氨甲基膦酸500ng/mL標準品XIC圖

氨甲基膦酸的標準曲線圖

R^2= 0.9990

標準曲線濃度分別為: 10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、250 ng/mL、500 ng/mL

07 相關產品

       水果中草甘膦及其代謝物的測定SPE-UPLC-MS/MS法相關產品信息：

普仁離子色譜儀對草甘膦中的離子成分和含量檢測具有哪些優勢?

       草甘膦的分析和測定用到的是GX液相色譜法，而鈉離子、鉀離子、異丙胺離子等陽離子分析和測定用到的是離子色譜法。具體來講，離子色譜檢測技術可同時檢測草甘膦制劑中的鉀鹽、銨鹽、鈉鹽、異丙胺鹽，和銨鹽和異丙胺鹽等的復雜混合物。該方法簡單快速重現性好，準確度和精密度均能達到對制劑定量分析的要求，能夠作為除草劑中草甘膦鹽的檢測辦法，適用于大量樣品的定性及定量分析和測定。

       草甘膦水劑GB/T 20684-2017已經正式實施一年多的時間，取代舊國標GB/T 20684-2006。該標準適用于由草甘膦原藥成鹽后和水及適宜的助劑組成的草甘膦鈉鹽、鉀鹽、銨鹽、二甲胺鹽和異丙胺鹽水劑。

       面臨長期以來市面上草甘膦不同鹽型混雜的現象，青島普仁儀器專業研發的離子色譜儀能夠實現對各種不同草甘膦產品的分析和測定。

草甘膦新國標的修正包括：草甘膦水劑和可溶粉(粒)劑。2017版草甘膦新國標較2006舊版國標版Z大的變更主要在草甘膦鹽型方面進行了修正，很明確地增加了對特定草甘膦鹽型成分的分析和測定，如下圖所示：

常見草甘膦制劑樣品譜圖如下所示：

1.草甘膦鉀鹽樣品譜圖：

2.草甘膦異丙胺鹽樣品譜圖：

普仁離子色譜儀用于某化工廠氯化鉀樣品的分析測定

案例：普仁離子色譜儀用于分析廣東某化工廠氯化鉀樣品的純度

───────────────────────

序號 保留時間 名稱 濃度  峰面積

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1    3.149  CL 0.06805 50410

───────────────────────

總計 0.06805 50410

目前，氯化鉀的純度差異較大，檢測氯化鉀純度的非常有必要。

市面上較為常見的是60%純度的工業氯化鉀，而食物級氯化鉀要求純度達到99%以上，這二者之間究竟有甚么差異?一般情況下，純度低的氯化鉀，含有的雜質過量，無法用于食品行業，由于有些雜志對人體有害。例如：工業鍍鋅里的氯化鉀，一般都用60%純度的氯化鉀，假如用99%氯化鉀能否滿足要求呢?當然可以，只不過使用量有差異。但是，有些精致鍍鋅工藝，必需要用高純度氯化鉀，對其純度的分析與檢測非常有必要。在農業方面，60%濃度的也能夠用于鉀肥，但用于鉀肥之前需要提純這一步驟，這是因為低純度氯化鉀會含有對植物有害的成分，影響植物的生長發育。而高純度氯化鉀就不會有這類的情況發生。

因此，氯化鉀的純度不同，應用領域也相同。青島普仁儀器專業研發離子色譜儀20余年，可用于化工行業各種陰陽離子濃度或純度的檢測。（來源：青島普仁儀器有限公司）

草甘膦，又稱農達，是一種廣譜滅生性除草劑，廣泛應用于茶園、果園、玉米田間等農業生產中。隨著草甘膦的廣泛使用，其在茶葉、水果、玉米等植物源食品中殘留量的檢測越來越受到國內外的關注。
草甘膦（GLY）及其代謝物氨甲基膦酸（AMPA）均為小分子化合物，具有極性強、易溶于水、難溶于各種有機溶劑等特性，這給常規檢測帶來了極大的困難和挑戰。
中檢維康使用CLOVER草甘膦專用柱（貨號：GLY3000）對茶葉中的草甘膦及其代謝物進行處理，使用UPLC-MS/MS測定，當草甘膦及其代謝物加標濃度為80 μg/kg，其回收率在70-100 %，RSD在5 %以內，符合測定標準。

準確稱取經粉碎的茶葉樣品1.0 g(精確至0.001g)于50mL離心管中，加100 μL 濃度為10 mg/L的1,2-C13N15草甘膦同位素內標溶液，加入10 mL水，渦旋混合20 min，超聲振蕩10 min，以4000 r/min離心8 min。

移取5 mL上清液至15 mL離心管中，加5 mL二氯甲烷，渦旋5 min，以4000 r/min離心4 min，取上清液2.5 mL過CLOVER?草甘膦專用柱（CLOVER?草甘膦專用柱使用前應依次用3 mL甲醇，3 mL水活化），棄去前端幾滴濾液，收集后續濾液。

取上述濾液1mL衍生，依次加入1.0 mL 50g/L硼酸鈉溶液，0.5 mL 10 g/L FMOC-Cl，渦旋混合2 min，40 ℃水浴衍生1 h，渦旋1 min，再以8000 r/min離心3 min，上清液過0.22 μm濾膜，上機檢測。

       草甘膦(Glyphosate，Gly)是廣泛使用的一類廣譜非選擇性除草劑，其在環境和生物體中富集并通過食品進入人體，會對人體健康造成危害。隨著其在茶葉上的廣泛使用，草甘膦及其主要代謝產物氨甲基膦酸殘留問題也越來越受關注。

　　目前常用的檢測方法為離子交換凈化、七氟丁醇(HFB)和三氟乙酸酐(TFAA)衍生后GC-MS檢測，或9-芴基甲基三氯甲 烷衍生后LC-MS/MS檢測，這些方法通常存在操作時間長、需要衍生等問題，因此建立一種簡便、快捷、有效的草甘膦及其代謝物殘留的檢測方法具有重要的意義。

       迪馬科技在參考各種標準及文獻的基礎上，建立了SPE-UPLC-MS/MS法測定茶葉中草甘膦及其代謝物氨甲基膦酸的檢測方法：采用水提取，ProElut GLY固相萃取專用柱凈化樣品，收集流出液，Dikma  色譜柱分離檢測，該方法特點：

1)     前處理步驟少，提取液直接通過凈化柱接收流出液即可；

2)     有機溶劑消耗量小，前處理過程中也無需使用酸堿試劑；

3)     儀器分析簡單，樣品無需衍生直接分析，可提高結果穩定性及減少實驗成本；

4)     方法定量限0.1 mg/kg。

以下為詳細解決方案，敬請參考！

茶葉中草甘膦及其代謝物的測定

——SPE-UPLC-MS/MS法

1、適用范圍

        本方法適用于綠茶、花茶、鐵觀音、紅茶和普洱茶中氨甲基膦酸和草甘膦的檢測，定量限0.1mg/kg。

2、標準品配制

       單標標準儲備液：準確稱取各標準品，用水配制成1000 μg/mL的單標標準儲備液。

       混標標準中間液：分別吸取各單標標準儲備液，用水配制成1.0 μg/mL、10 μg/mL和50 μg/mL的混標標 準中間液。

3、提取

       取1 g茶葉于50 mL離心管中，準確加入10 mL水、10 mL二氯甲烷，振蕩10 min，超聲10 min，8000 rpm離心5 min，取5 mL上清液，待凈化。

4、凈化

       SPE柱： ProElut GLY 6 mL (Cat.#: 65938)

       (1)活  化：依次加入5 mL甲醇、5 mL水，棄去流出液；

       (2)上  樣：將待凈化液加入柱中，棄去前3 mL流出液，收集后2 mL流出液，混勻，濾液過0.22 μm尼龍濾膜，上機分析。

注：同方法制備基質匹配標準溶液。

5、色譜條件

       UPLC-MS/MS條件：

       5.1 UPLC 條件

       色譜柱：Dikma Polyamino HILIC, 150 × 2.0 mm, 5 μm (Cat.#：99302)

       流  速：0.2 mL/min   進樣量：10 μL   柱  溫：35 ℃

       流動相： A：乙腈   B：5 mM乙酸銨溶液，氨水調節至pH=11

       梯度設置：

5.2 質譜條件

       定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

6、添加回收結果及色譜圖

       茶葉中氨甲基膦酸和草甘膦的LC-MS/MS檢測添加回收結果：

7、相關產品信息

       茶葉中草甘膦及其代謝物的測定SPE-UPLC-MS/MS法相關產品信息：

草甘膦一直是存在爭議的一種高效農藥，而它引起的一系列問題隨著使用量增加而暴露出來。不能否定草甘膦作為農藥的優勢，但是也不可否定近年來引發的各種問題。

對于草甘膦引起的問題應該不僅關注草甘膦本身的毒性大小，更應該將其毒性與環境等外在因素的影響結合起來。針對草甘膦的問題還需要進一步去研究，今后草甘膦研究也將成為研究領域的一個重點，讓更多的人分享科研成果，盡量避免因科技研究對人類造成傷害。

普瑞邦光電衍生系統MDS檢測項目：氨基甲酸酯類農藥及殘留、甘油磷酸酯類物質、黃曲霉毒素含量、氨基酸、牛磺酸、化妝品中游離甲醛、草甘膦除草劑、甲殼類和貝類毒素、伏馬毒素含量等。根據不同需求客戶產品分為以下幾類，簡約式MDS-2000，化學衍生和光衍生一體的MDS-3100，普瑞邦的化學衍生儀器MDS-3000。產品適用性方面，MDS可以搭配市面上主流液相設備，包括Waters、賽默飛、安捷倫和島津等。

我們采用普瑞邦光電衍生系統MDS 3100多功能光電衍生系統配合液相及熒光檢測器，依據 《GB/T 5750.9-2006 生活飲用水標準檢驗方法 農藥指標》進行草甘膦檢測實驗，實驗條件如下： 

? 色譜柱：陰離子交換樹脂柱 250mm×4.6mm

? 衍生試劑：鄰苯二甲醛、四硼酸鈉、2-巰基乙醇、氫氧化鈉、次氯酸鈉（普瑞邦草甘膦衍生試劑包PriboFast?YS-GP-001）

? 陰離子交換流動相流速：0.5mL/min

? 柱后衍生氧化劑流速：0.5mL/min

? 衍生 OPA 溶液流速 ：0.3mL/min

? 衍生溫度：室溫

? 流動相：按照 GB/T 5750.9-2006 進行配制

根據標準配制 0.025μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL 的標準系列溶液進行檢測。

圖2：0.05μg/mL標準品譜圖

標準曲線線性較好，相對標準偏差較低，符合要求。

圖3：標準曲線數據處理圖

產品速遞

普瑞邦提供多功能光電衍生系列產品，詳情信息如下：