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  kigiki 2017-12-15 00:00:00

  實驗12 植物體內硝態氮含量的測定 植物體內硝態氮含量可以反映土壤氮素供應情況，常作為施肥指標。另外，蔬菜類作物特別是葉菜和根菜中常含有大量硝酸鹽，在烹調和腌制過程中可轉化為亞硝酸鹽而危害健康。因此，硝酸鹽含量又成為蔬菜及其加工品的重要品質指標。測定植物體內的硝態氮含量，不僅能夠反映出植物的氮素營養狀況，而且對鑒定蔬菜及其加工品質也有重要的意義。 傳統的硝酸鹽測定方法是采用適當的還原劑先將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，再用對氨基苯磺酸與α-萘胺法測定亞硝酸鹽含量。此法由于影響還原的條件不易掌握，難以得出穩定的結果，而水楊酸法則十分穩定可靠，是測定硝酸鹽含量的理想選擇。 【原理】 在濃酸條件下，NO3―與水楊酸反應，生成硝基水楊酸。其反應式如下： 生成的硝基水楊酸在堿性條件下（pH>12）呈黃色，Z大吸收峰的波長為410nm，在一定范圍內，其顏色的深淺與含量成正比，可直接比色測定。 【儀器與用具】 分光光度計；天平（感量0.1mg）；20ml刻度試管；刻度吸量管0.1ml、0.5ml、5ml、10ml各1支；50ml容量瓶；小漏斗（φ5cm）3個；玻棒；洗耳球；電爐；鋁鍋；玻璃泡；7cm定量濾紙若干。 【試劑】 500mg/L 硝態氮標準溶液：精確稱取烘至恒重的KNO3 0.7221g溶于蒸餾水中，定容至200ml。 5%水楊酸—硫酸溶液：稱取5g水楊酸溶于100ml比重為1.84的濃硫酸中，攪拌溶解后，貯于棕色瓶中，置冰箱保存一周有效。 8%氫氧化鈉溶液：80g氫氧化鈉溶于1L蒸餾水中即可。 【方法】 1．標準曲線的制作 （1）吸取500mg/L 硝態氮標準溶液1ml、2ml、3ml、4ml、6ml、8ml、10ml、12ml分別放入50ml容量瓶中，用無離子水定容至刻度，使之成10、20、30、40、60、80、100、120mg/L的系列標準溶液。 （2）吸取上述系列標準溶液0.1ml，分別放入刻度試管中，以0.1ml蒸餾水代替標準溶液作空白。再分別加入0.4ml 5%水楊酸—硫酸溶液，搖勻，在室溫下放置20min后，再加入8% NaOH溶液9.5ml，搖勻冷卻至室溫。顯色液總體積為10ml。 （3）繪制標準曲線：以空白作參比，在410 nm波長下測定光密度。以硝態氮濃度為橫坐標，光密度為縱坐標，繪制標準曲線并計算出回歸方程。 2．樣品中硝酸鹽的測定 （1）樣品液的制備 取一定量的植物材料剪碎混勻，用天平精確稱取材料2g左右，重復三次，分別放入三支刻度試管中，各加入10ml無離子水，用玻璃泡封口，置入沸水浴中提取30min。到時間后取出，用自來水冷卻，將提取液過濾到25ml容量瓶中，并反復沖洗殘渣，Z后定容至刻度。 （2）樣品液的測定 吸取樣品液0.1ml分別于三支刻度試管中，然后加入5%水楊酸—硫酸溶液0.4ml，混勻后置室溫下20min，再慢慢加入9.5ml 8%NaOH溶液，待冷卻至室溫后，以空白作參比，在410nm波長下測其光密度。在標準曲線上查得或用回歸方程計算出硝態氮濃度，再用以下公式計算其含量。 NO3—－N含量= 式中 C－標準曲線上查得或回歸方程計算得NO3—－N濃度； V—提取樣品液總量； W—樣品鮮重。

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  巧依心 2016-04-26 00:00:00

  樣品中硝酸鹽的測定 （1）樣品液的制備 取一定量的植物材料剪碎混勻，用天平精確稱取材料2g左右，重復三次，分別放入三支刻度試管中，各加入10ml無離子水，用玻璃泡封口，置入沸水浴中提取30min。到時間后取出，用自來水冷卻，將提取液過濾到25ml容量瓶中，并反復沖洗殘渣，Z后定容至刻度。 （2）樣品液的測定 吸取樣品液0.1ml分別于三支刻度試管中，然后加入5%水楊酸—硫酸溶液0.4ml，混勻后置室溫下20min，再慢慢加入9.5ml 8%NaOH溶液，待冷卻至室溫后，以空白作參比，在410nm波長下測其光密度。在標準曲線上查得或用回歸方程計算出硝態氮濃度，再用以下公式計算其含量。 NO3—－N含量= 式中 C－標準曲線上查得或回歸方程計算得NO3—－N濃度； V—提取樣品液總量； W—樣品鮮重。

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