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  使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中α干擾素(IFN-α)含量。人α干擾素(IFN-α)酶聯免疫分析僅供研究使用實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人α干擾素(IFN-α)水平。用純化的人α干擾素(IFN-α)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入α干擾素(IFN-α)，再與HRP標記的α干擾素(IFN-α)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α干擾素(IFN-α)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人α干擾素(IFN-α)濃度。試劑盒組成標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。人α干擾素(IFN-α)酶聯免疫分析僅供研究使用操作步驟標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。32μg/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液16μg/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液8μg/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液4μg/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液2μg/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。人α干擾素(IFN-α)酶聯免疫分析僅供研究使用保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-19 10:00

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• 豚鼠干擾素-γELISA 檢測試劑盒研究使用說明書

  豚鼠干擾素-γELISA檢測試劑盒研究使用說明書本試劑僅供研究使用標本：血清或血漿試驗原理：IFN-γ試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知IFN-γ濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將IFN-γ和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中IFN-γ的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：800pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標記的抗IFN-γ抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。豚鼠干擾素-γ（IFN-γ）ELISA檢測試劑盒研究使用說明書操作注意事項1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7．底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1．標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：800pg/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200pg/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100pg/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50pg/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25pg/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。2．根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（pg/ml）A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內、板間變異系數均小于10%。豚鼠干擾素-γELISA檢測試劑盒研究使用說明書結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的IFN-γ標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IFN-γ含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細]

  2018-11-04 10:00

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  多肽受體蛋白相互作用和機制高等植物多肽激素CLAVATA3(CLV3)對于植物莖端分生組織干細胞數目的維持起著極其重要的作用。過去幾十年來，CLAVATA1/CLAVATA2(CLV1/CLV2)復合體被認為是CLV3多肽在細胞膜上的**受體。然而，新的假設僅僅停留在遺傳學上的預測，仍然缺乏進一步的生物化學和細胞學的證據。為了更好地理解這三個可能的受體蛋白之間的相互關系，林金星研究組利用新型的活體下檢測蛋白質相互作用的技術螢火蟲熒光素酶互補技術(Fireflyluciferasecomplementationimagingassay,LCI)在擬南芥葉肉原生質體(Arabidopsismesophyllprotoplasts)和煙草葉片(Nicotianabenthamianaleaves)兩個體系中分析了CLV1,CLV2和CRN三個受體蛋白之間的相互作用。　然而Z近的遺傳學分析篩選到了一個新的受體蛋白激酶成員CORYNE(CRN)，并且發現它在CLV3信號途徑中起著非常重要的作用。在一系列遺傳學分析的基礎上，新的CLV3信號轉導通路假設被提出：即CLV1同源二聚體與CLV2/CRN異源復合體可能平行獨立地介導CLV3信號。　實驗結果表明：LCI技術和免疫共沉淀技術(Co-immunoprecipitationassay)都證實了CLV2在沒有CLV3多肽刺激的情況下可以直接地與CRN發生相互作用;外源的CLV3多肽處理，并不會明顯地影響CLV2-CRN之間的互作強度;進一步的LCI實驗發現CLV1不能夠與CLV2發生直接的相互作用，但能夠與CRN有微弱的相互作用;除此之外，實驗人員還發現CRN自身可以形成同源二聚體，而CLV1或CLV2自身不能形成同源二聚體。這些生化和細胞學結果對于新提出的CLV3平行雙通路假設提供了直接的證據。Anti-ATP2c1鈣離子ATP酶通道蛋白抗體規格：0.2mlAnti-phospho-ATM(Ser1981)磷酸化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體規格：0.1mlAnti-ATF6活化轉錄因子6抗體規格：0.1mlAnti-ATP4B氫鉀ATP酶通道蛋白抗體規格：0.1mlAnti-ATP5JATP5J抗體規格：0.1mlAnti-ATP7A銅轉運蛋白質α鏈抗體規格：0.2mlAnti-ATRN吸引素抗體規格：0.2mlAnti-phospho-ATR/ACTR(Ser428)磷酸化ATR抗體規格：0.1mlAnti-ATP7B銅轉運蛋白質β鏈抗體規格：0.1mlAnti-ATP1b2/Na+K+ATPase鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體規格：0.2mlAnti-Phospho-Na,K-ATPasealpha-1(Tyr10)磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體規格：0.1mlAnti-Phospho-ATP1A1(Ser16)磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體規格：0.2mlAnti-Phospho-ATP1A1(Ser23)磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體規格：0.1mlAnti-ATXN1失調癥蛋白1抗體規格：0.2mlAnti-phospho-ATPcitratelyase(Ser455)磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體規格：0.1mlAnti-phospho-Ataxin-1(Ser775)磷酸化失調癥蛋白1抗體規格：0.1mlAnti-AVEN凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活YZ劑抗體規格：0.2mlAnti-Kir6.2ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體規格：0.2mlAnti-AVPR2精氨酸加壓素受體2抗體規格：0.2mlAnti-Bdkrb2/B2R緩激肽B2受體抗體規格：0.2mlAnti-Axin1軸蛋白1抗體規格：0.2mlAnei-ATX自分泌運動因子抗體規格：0.2mlAnti-AuroraA有絲分裂激酶A抗體規格：0.2mlAnti-AuroraB有絲分裂激酶B抗體規格：0.2mlAnti-AuroraC有絲分裂激酶B抗體規格：0.2ml[詳細]

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