2019年12月底武漢發(fā)現(xiàn)新型冠狀病毒肺炎以來，感染確診病例和疑似病例數(shù)量仍在不斷上升，疑似病例的快速確診迫在眉睫。目前臨床上確診新型冠狀病毒肺炎病例，Z通用的方式仍然是在臨床觀察的基礎(chǔ)上，采集痰液、咽拭子等呼吸道標(biāo)本進(jìn)行病毒核酸基因檢測(cè)，并作出病原學(xué)診斷。目前核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性問題牽動(dòng)了很多人的心，除去該病毒的一些特有特征外，檢測(cè)過程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)涉及的科學(xué)儀器和操作步驟都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。

       目前新冠狀病毒核酸檢測(cè)主要通過PCR檢測(cè)的方法，其對(duì)試驗(yàn)場(chǎng)地、檢驗(yàn)儀器及操作人員的要求都非常高，輕微的污染就可能對(duì)結(jié)果造成偏差。另外，對(duì)檢測(cè)樣本保存條件和設(shè)備也有很嚴(yán)苛的要求。并且，由于新冠狀病毒的傳染危險(xiǎn)性，防護(hù)準(zhǔn)備和后續(xù)的消毒處理對(duì)整個(gè)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)來說也異常重要。Cole-Parmer作為一家專業(yè)的科研儀器、設(shè)備、耗材供應(yīng)商，可以為新冠狀病毒核酸檢測(cè)提供從防護(hù)，采樣，樣本保存，檢測(cè)，消毒處理等各環(huán)節(jié)支持。相信極ng準(zhǔn)可靠的儀器設(shè)備及防護(hù)消毒產(chǎn)品一定能為這場(chǎng)戰(zhàn)役中的檢測(cè)工作添磚加瓦。Cole-Parmer與你們一起并肩作戰(zhàn)！

Cole-Parmer相關(guān)儀器配置單*手套還有病毒防護(hù)丁 腈系列可選

       以下是新冠病毒核算檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的具體標(biāo)準(zhǔn)介紹，可供各位老師參考，其中涉及的儀器設(shè)備和耗材，疫情期間歡迎在微信平臺(tái)直接聯(lián)系我們，或者直接聯(lián)系您當(dāng)?shù)氐匿N售或經(jīng)銷商。

新冠病毒核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

**步：樣本采集

       通常是在采集地——定點(diǎn)發(fā)熱門診進(jìn)行樣本選取。樣本一般為鼻咽或口咽拭子、氣管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多（其陽性率非常高）

       在采集過程中，Cole-Parmer可為您提供防護(hù)服，護(hù)目鏡，鞋套，以及手套等防護(hù)用品。

第二步、樣本的包裝、保存與運(yùn)輸

       通常采樣管需經(jīng)過3層包裝，即：自封袋+運(yùn)輸罐+專用運(yùn)輸箱。在2-4℃進(jìn)行保存，（通常保存不能超過72小時(shí)），再通過UN2814感染性物質(zhì)專用運(yùn)輸箱，由經(jīng)過生物安全培訓(xùn)的專人，全身著防護(hù)用品運(yùn)送轉(zhuǎn)運(yùn)箱。

第三步、樣本的核酸檢測(cè)

• 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)：基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室

• 實(shí)驗(yàn)條件：二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（P2負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室）

• 防護(hù)準(zhǔn)備：檢測(cè)人員需進(jìn)行三級(jí)防護(hù)的穿戴。按序依次穿戴好一次性帽子、醫(yī)用N95口罩、一次性防護(hù)服、一次性鞋套、一次性防水靴套、護(hù)目鏡和雙層乳膠手套。如有條件可加穿一次性隔離衣。                       

• 檢測(cè)步驟：準(zhǔn)備工作，核酸提取（手動(dòng)），基因擴(kuò)增與檢測(cè)，結(jié)果分析     

1.準(zhǔn)備工作

       實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備：二級(jí)生物安全柜，水浴或烘箱，移液器

       首先檢查運(yùn)輸罐是否嚴(yán)格密閉，然后取出罐內(nèi)的密封袋進(jìn)行56℃下30分鐘的消毒滅活，滅活后可從密封袋內(nèi)取出采樣管對(duì)采集的樣品進(jìn)行分裝、混勻。

       整個(gè)過程應(yīng)在二級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，滅活設(shè)備應(yīng)盡量選擇可放置于生物安全柜內(nèi)的小型設(shè)備以減少樣品進(jìn)出安全柜內(nèi)的次數(shù)。

2.核酸提取（手動(dòng)）

       實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備：二級(jí)生物安全柜，移液器，振蕩器，金屬加熱器，微型離心機(jī)

       首先需要依據(jù)不同品牌試劑盒的要求進(jìn)行裂解液的配置。然后，采用化學(xué)試劑法對(duì)核酸樣本進(jìn)行裂解，樣品裂解前需經(jīng)過充分的振蕩混勻，如有必要可采用金屬加熱器于56℃下充分裂解病毒所釋放出的核酸。通過多次離心完成裂解產(chǎn)物的過濾收集。Z后利用離心純化法對(duì)裂解后的核酸進(jìn)行洗滌與回收。

3.基因擴(kuò)增與檢測(cè)

       實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備：生物安全柜，PCR板離心機(jī)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

       首先，需根據(jù)不同品牌試劑盒的要求將試劑盒內(nèi)的不同組分（引物，dNTP，聚合酶等）按各自所需的體積量進(jìn)行配置，并充分離心混勻。然后將核酸樣本依次加入至每個(gè)PCR反應(yīng)管中，加蓋密閉后進(jìn)行充分的混勻、離心。Z后，將PCR反應(yīng)管置于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀中，按照試劑盒說明書的要求進(jìn)行擴(kuò)增參數(shù)的設(shè)置后即開始檢測(cè)。

4.結(jié)果分析

       Z后，通過計(jì)算出的CT值，依據(jù)檢測(cè)試劑盒廠家說明書的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定，陽性、陰性或者不確定。

第四步、未測(cè)樣品的保存

       如樣本未能及時(shí)檢測(cè)，需將樣本于-70℃或以下進(jìn)行保存。Cole-parmer專為您提供保存樣品的Cole-parmer超低溫冰箱。

第五步、消毒處理

       生物安全柜內(nèi)：對(duì)臺(tái)面、儀器、外層手套進(jìn)行消毒，相關(guān)垃圾投入專用YL垃圾桶中。并開啟紫外燈照射生物安全柜，時(shí)長(zhǎng)應(yīng)不低于30分鐘。

       核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)：對(duì)實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、地面進(jìn)行消毒，并開啟紫外照射燈進(jìn)行空間消毒，時(shí)長(zhǎng)應(yīng)不低于30分鐘。

       實(shí)驗(yàn)人員：按自上而下、由內(nèi)而外的順序依次摘脫三級(jí)防護(hù)穿戴，并置于專用YL垃圾桶內(nèi)。

       YL垃圾：所有與新型冠狀病毒相關(guān)的YL垃圾需經(jīng)過濕熱高壓滅菌（121℃，30分鐘）后再作為普通的YL垃圾處理，且垃圾袋上應(yīng)標(biāo)注新型冠狀病毒YL垃圾的相關(guān)信息。

        注意：實(shí)驗(yàn)試劑、設(shè)備等需取得YL器械注冊(cè)證，科學(xué)研究除外。