【小貝離心講堂】第二期:離心轉(zhuǎn)頭的分類
離心轉(zhuǎn)頭的分類
離心轉(zhuǎn)頭(也叫轉(zhuǎn)子)是離心機(jī)分離樣品的核心部件,它的轉(zhuǎn)速與轉(zhuǎn)頭的材料及強(qiáng)度有關(guān)。要達(dá)到良好的分離效果,轉(zhuǎn)頭的選擇非常重要。離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭有四種常見類 型,分別是定角轉(zhuǎn)頭、水平轉(zhuǎn)頭、垂直轉(zhuǎn)頭、近垂直轉(zhuǎn)頭,此外,還有一些針對特殊應(yīng)用的特殊轉(zhuǎn)頭,主要包括連續(xù)流轉(zhuǎn)頭、區(qū)帶轉(zhuǎn)頭和淘洗轉(zhuǎn)頭等。
1.定角轉(zhuǎn)頭:在離心過程中,離心管與軸之間的角度是固定的,通常在20度到45度之間。離心時,樣品會首先沉淀到離心管側(cè)壁,然后下滑至離心管的外側(cè)底部聚集。定角轉(zhuǎn)頭的沉降效率高,有非常好的適用性,容量范圍也很廣。主要用于各種不同體積的樣品的沉淀離心。定角轉(zhuǎn)頭是應(yīng)用Z廣泛的轉(zhuǎn)頭。
圖1定角轉(zhuǎn)頭
2.水平轉(zhuǎn)頭:在離心過程中,離心管與軸之間的角度從開始0度變成90度,停止時又成為0度。由于其長的通徑,可以得到**的純度;可以使用開口離心管,裝卸樣品量較大。水平轉(zhuǎn)頭主要用于大體積樣品分離及密度梯度離心。自我平衡修正技術(shù)在水平轉(zhuǎn)頭上的應(yīng)用給一些特殊樣品的分離帶來了方便(如臨床上離心采血管),自我修正平衡范圍可達(dá)50-100g。
圖
2水平轉(zhuǎn)頭
3.垂直轉(zhuǎn)頭:分離機(jī)理與固定轉(zhuǎn)頭相似,但與軸之間的角度為0度。其分離效率Z高,樣品密度可達(dá)1.7g/ml,兩個小時就可以完成質(zhì)粒DNA的分離。垂直轉(zhuǎn)頭用于超速離心機(jī)中,可用于等密度的質(zhì)粒DNA的分離、亞細(xì)胞器片段的等密度分離、受體和酶的速率區(qū)帶分離、脂蛋白的等密度分離等。
圖3垂直轉(zhuǎn)頭
4.近垂直轉(zhuǎn)頭:其設(shè)計基于垂直轉(zhuǎn)頭,彌補(bǔ)沉淀回收率的不足,離心管與軸之間的角度小于10度。近垂直轉(zhuǎn)頭可承受與垂直轉(zhuǎn)頭同樣的速度,但可以達(dá)到固定轉(zhuǎn)頭所能達(dá)到的分離樣品的純度。分離較快,而且密度可達(dá)1.7g/ml。可應(yīng)用于等密度的DNA分離及等密度的脂蛋白分離等。
圖4近垂直轉(zhuǎn)頭
四種常見的轉(zhuǎn)頭類型在樣品的分離純度和離心效率上各有取舍優(yōu)劣,大家可根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要選擇Z合適的轉(zhuǎn)頭。一般來說,臺式離心機(jī)和落地高速離心機(jī)都以定角轉(zhuǎn)頭 和水平轉(zhuǎn)頭為主,超速離心機(jī)上如果涉及一些需要超長離心時間的實(shí)驗(yàn)(例如等密度梯度離心,詳見小貝離心學(xué)堂前幾期介紹),則可選擇垂直或近垂直轉(zhuǎn)頭來提高 實(shí)驗(yàn)的效率。
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