血清選不對,細胞兩行淚!細胞培養血清全攻略 | 上海富衡
血清是細胞培養體系中不可或缺的關鍵成分,提供氨基酸、維生素、生長因子等5000+種生物活性物質,維持胞代謝與增殖。
但傳統血清(如胎牛血清FBS)存在批次波動、倫理爭議、污染風險三大痛點。
01
血清類型及其應用場景表
血清類型 | 采血牛齡 | 特點 | 典型應用場景 | 來源 |
胎牛血清(FBS) | 剖腹產胎牛 | 低免疫球蛋白(<10%)、高生長因子,適合干細胞/腫瘤細胞培養 | 干細胞研究、基因治療載體生產 | 烏拉圭/澳洲 |
新生牛血清 | 出生24小時內 | 性價比高($50/L),但纖維蛋白原含量低,易受凝血干擾 | 普通細胞株培養、疫苗生產 | 美國/巴西 |
小牛血清 | 出生10-30天 | 免疫球蛋白含量高(可能干擾實驗),適合病毒包裝與工業生產 | 疫苗生產、生物制藥 | 歐洲/南美 |
羊血清 | 成年羊 | 含獨特生長因子,適合免疫學實驗與特殊細胞系培養 | ELISA檢測、抗體生產 | 澳大利亞 |
02血清評估維度表
評估維度 | 評價標準 |
細胞適配性 | ≥90%存活率得滿分,干細胞培養需特級胎牛血清。 |
批次穩定性 | CV≤8%得滿分,推薦鎖定3-5個平行批次。 |
成本效益 | 每mL成本≤$1.5,國產血清可降低30%成本。 |
倫理合規性 | 無動物源血清(如重組人白蛋白)優先。 |
技術支持 | 提供檢測報告與定制化方案(如Ausbian血清支持支原體檢測)。 |
03使用避坑指南
1、實驗室解凍技巧!
分步解凍法:-20℃→4℃過夜→室溫完成,避免蛋白質變性。
離心去沉淀:3000rpm離心10分鐘去除纖維蛋白
2、什么時候需要熱滅活?
僅推薦用于免疫學實驗(如ES細胞培養),可能降低細胞增殖率15%。
替代方案:使用無補體血清或添加EDTA。
3、做好污染防控!
內毒素控制:<3EU/mL
支原體檢測:每批次必檢,陽性率需<0.1%
04未來趨勢:血清替代方案合成生物學
微生物發酵生產重組生長因子,成本降低60%。
植物基替代
大豆蛋白提取物純度達98%,已用于昆蟲細胞培養。
3D培養適配
水凝膠基質+無血清培養基組合,提升干細胞分化效率至85%。
常見問題Q&A
Q1:血清出現絮狀物怎么辦?
A1:多為纖維蛋白或脂蛋白變性,4000rpm離心5分鐘可去除,無需過濾。
Q2:"黑膠蟲"現象如何解決?
A3:加強無菌操作,更換血清批次,必要時使用無血清培養基。
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