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倉鼠肺細胞

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詳細介紹

資源編號:BNCC340923

英文名: R 1610

類型:

形態(tài): 成纖維細胞

提供形式: T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基 90%高糖DMEM+10%FBS
生長條件 95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度
生長特性 貼壁生長
存儲條件 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮

一、細胞名稱:R 1610

二、貨    號:BNCC340923

 三、生長特性:  ■ 貼壁     □ 懸浮       □ 半懸浮半貼壁 

四、細胞生長條件:

培養(yǎng)基 90%  高糖DMEM
血清 10%  FBS (Diagnovum )
溫度 37 ℃
空氣條件 5% CO2,95% AIR
凍存條件 培養(yǎng)基50%、血清40%、DMSO 10%

五、組成:

組成 規(guī)格
細胞一瓶 T25
細胞培養(yǎng)與操作說明 1份

六、細胞接收后的操作流程與注意事項

1. 細胞收到后建議在培養(yǎng)箱穩(wěn)定4小時左右再依據(jù)細胞密度,換液培養(yǎng)或傳代。

2. 如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞及時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶中繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基,培養(yǎng)2-3天。若3天后細胞都沒有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室,技術(shù)人員會跟進解決。

3. 貼壁細胞生長緩慢:適當(dāng)提高血清濃度(ZG不超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

4. 生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)生長不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重新打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

七、細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作)

1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加1~2 ml 0.25% EDTA的胰酶消化(注意把握消化時間,通常控制在1~2min)。

2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁運動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落、吹散。

3. 取出部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4. 注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液,待細胞密度達到70-80%時重復(fù)傳代操作或者凍存。

特別注意:(如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))

1. 收到細胞后請盡快更換為含10% FBS的新鮮培養(yǎng)基,切勿使用原瓶中運輸用培養(yǎng)基。

2. 如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時拍照并聯(lián)系實驗室。

3. 細胞任何售后問題,均需拍照存檔并及時聯(lián)系客服。

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