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ArCas12a Nuclease (10 μM)

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詳細介紹

產品簡介

ArCas12a核酸內切酶,源自Agathobacter rectalis細菌的CRISPR系統,別名Cpf1,是一個包含1263個氨基酸的單體蛋白。作為CRISPR/Cas系統的II類(V型)成員,ArCas12a僅由單一的效應蛋白行使功能,其特性與Cas9存在顯著差異,例如靶向富含T的基序、不需要反式激活crRNA、DNA雙鏈斷裂產生粘性末端、參與RNA加工、具有DNA核酸酶活性等。

Cas12a缺乏HNH結構域,可單獨利用其RuvC結構域在CRISPR RNA(crRNA)引導下識別位于靶標核酸5’端富含胸腺嘧啶(T)的PAM區而啟動對靶標DNA的切割,已成功用于許多哺乳動物和植物的基因組編輯。此外Cas12a還具有反式切割活性,可不加選擇地切割反應體系中的非靶標單鏈DNA。

與其它LbCas12a/AsCas12a相比,ArCas12a具有更高的溫度適應性(25-55℃),可適用于基因組編輯及核酸檢測等。

 

產品信息

貨號

14702ES65 / 14702ES80

規格

100 pmol / 1000 pmol

來源

大腸桿菌表達的來源于Agathobacter rectalisCpf1基因

分子量

149 KDa

PAM區

TTTN或TTTV

酶保存液

20 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5 @25℃

反應條件

50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2 , pH 7.9 @25℃

濃度

10 µM*

純度

>95%(SDS-PAGE)

失活條件

85℃,5-10 min

*: ArCas12a Nuclease濃度為10 μM,即10 pmol/μL。

 

組分信息

組分編號

組分名稱

14702ES65

14702ES80

14702-A

ArCas12a Nuclease (10 μM)

10 μL

100 μL

14702-B

10×ArCas12a Reaction Buffer

1 mL

1 mL

 

產品應用

1. CRISPR/Cas基因編輯;

2. 基于CRISPR/Cas系統的診斷和檢測;

3. 聯合核酸等溫擴增技術(RPA和LAMP)的其他檢測應用等。

 

儲存條件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

使用說明

1. 推薦配置應用反應與體系:

組分

體積

10×Arcas12a Reaction Buffer

3 μL

300 nM crRNA

3 μL (30 nM final)

1 μ MArcas12a Nuclease

1 μL (30 nM final)

Reaction volume

27 μL

30 nM substrate DNA

3 μL (3 nM final)

Nuclease-free water up to

30 μL

2. 在37℃下孵育1小時,然后在85℃下進行5-10分鐘以滅活Arcas12a Nuclease,隨后進行瓊脂糖凝膠電泳以進行片段分析。

 

注意事項

1. 為防止RNase污染,請保持實驗區干凈整潔,操作時需穿戴干凈的手套、口罩,實驗所用槍頭、離心管等耗材均為 RNase-free。

2. 避免反復凍融。首次溶解之后,建議按照使用量分裝保存。

3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

4. 本產品僅作科研用途

 

Ver.CN20240318

 

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