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Streptavidin(SAV) MagBeads 鏈霉親和素(SAV)免疫磁珠

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詳細介紹

產品簡介

 

鏈霉親和素(streptavidin)是一種來源于阿維丁鏈霉菌由四個相同亞基組成的生物素結合蛋白質,每個亞基均有一個與生物素有高親和力的結合位點。生物學上常將鏈霉親和素包被在磁珠上,借助鏈霉親和素-生物素高親和力結合特性,結合生物素化蛋白、多肽、及非蛋白質(如各種DNA、RNA分子)等分子,進而從混合體系中快速分離生物素化成分,進行如親和純化,細胞分離,DNA探針分析和mRNA分離等多方面應用。

翌圣streptavidin(SAV)MagBeads是將鏈霉親和素(streptavidin)通過化學方法固定在聚合物磁性微球上,應用生物素與鏈霉親和素之間的相互作用來實現固定化生物素或生物化的蛋白、抗體等物質的目的。

翌圣為您提供蛋白純化實驗整體解決方案,相關產品選購請參考:蛋白純化系列產品-選購指南

 

產品信息

 

貨號

47503ES03 / 47503ES08

規格

1 mL /5×1 mL

 

產品性質

 

基質(Matrix  spherical

聚合物磁性微球

配體(Ligand)

鏈霉親和素

結合能力(Binding Capacity

20 µg biotinylated IgG /mg磁珠

徑(Particle size)

1 µm

磁珠濃度Concentration

10 mg/mL

儲存緩沖液(Storage Buffer)

PBS, 0.01% Tween-20, 0.02% NaN3

 

儲存條件

 

2~8℃保存,有效期2年。

 

使用說明

 

一、磁珠準備

  1. Streptavidin (SAV) MagBeads顛倒或漩渦混合均勻。
  2. 100 μL Streptavidin (SAV) MagBeads加入新的離心管中。放置在磁分離器上,待溶液變澄清后,用移液器吸棄保護液。
  3. 將離心管從磁分離器上取下來,加入500 μL清洗緩沖液,混勻,放置在磁分離器上,收集磁珠,用移液器吸棄保護液。重復洗2次。

推薦清洗緩沖液:

核酸樣品:TES緩沖液  抗體/蛋白樣品:PBS緩沖液, pH7.4

二、生物素化分子固定

  1. 需要準備的試劑

生物素化樣品平衡/洗雜液:

核酸樣品:TES緩沖液  抗體/蛋白樣品:PBS緩沖液, pH7.4

 

    2.操作流程

a.  加入100 μL平衡液(2.1)將磁珠懸浮。

b.  加入適量生物素化樣品溶液,充分混勻。

c.  室溫孵育1h以上(具體時間根據結合效果調整),可以振蕩或漩渦混合均勻。

d.  將離心管置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。如有需要可留做進一步檢測。

e.  加入1 mL洗雜液2.1混合均勻,置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。重復洗雜至少3次。

f.  用下游實驗用的溶液,將固定好生物素化分子的磁珠重新懸浮至合適濃度,以備后續使用。下面以固定抗體后純化抗原為例

三、抗原的純化

  1. 試劑準備

生物素化抗體

平衡液/洗雜液:PBS緩沖液, pH7.4

洗脫液:0.1 M Glycine-HCl, pH 2.5-2.8

中和液:1M Tris-HCl, pH 8.5

  1. 純化流程
  1. 100 μL的磁珠(步驟2中已經固定好生物素抗體的磁珠)加入離心管,置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。
  2. 加入1mL平衡液(3.1)混合均勻,置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。重復洗雜至少3次。
  3. 向上一步準備好的磁珠中,加入抗原樣品輕輕的混合均勻,體積不足200 μL用抗原溶液補足。室溫孵育30 min以上或者4℃過夜,確保磁珠充分懸浮以免影響吸附效果。
  4. 加入1mL洗雜液(3.1)混合均勻,置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。重復洗雜至少3次。
  5. 加入300-500 μL洗脫液(3.1)混合均勻,室溫孵育5 min。
  6. 將離心管置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸取含抗原樣品的上清液。如有需要可留做進一步檢測。
  7. 加入洗脫體積十分之一的中和液中和。100 μL洗脫液中加入10 μL中和液中和。
  8. 如有需要可重復步驟e-g兩次,增加洗脫效率。

 

注意事項

 

  1. 免疫磁珠易沉降聚集,因此產品使用前要劇烈振蕩或超聲處理。
  2. 本產品僅作科研用途
  3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20231108

 

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