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5s/kb快速高保真預混液2× Hieff Canace? AdvanceFast PCR Master Mix

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詳細介紹

 

2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix是即用型2× 預混合溶液,包含Hieff Canace® AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase,dNTPs以及優化的緩沖體系,擴增產物為平末端。2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點,反應體系只需加入引物和模板即可。另外,該產品還含有特異保護劑,使得預混液反復凍融后仍可維持穩定活性。

 

儲存條件

-25~-15℃保存,有效期1年。

 

使用說明

  1. 推薦PCR反應體系

組分

體積 μL

終濃度

 Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix*

25

模板**

x

-

正向引物F(10 μM)***

2

0.4 μM

反向引物R(10 μM)

2

0.4 μM

ddH2O

Up to 50

-

1 PCR反應體系

*在 預混液含有2 mM Mg2+200 μMdNTPs

**推薦范圍10-200 ng;cDNA樣本上樣量范圍不超過反應體系的1/10,推薦1-2.5 μL。

***PCR 反應體系中引物終濃度的范圍為0.2-1 μM,推薦0.4 μM

  1. 反應程序

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

98℃

30 sec

1

變性

98

10 sec

30-35

退火*

60

5 sec

延伸**

72

5-10 sec/kb

終延伸

72

2 min

1

2 PCR反應程序

*推薦溫度:60°C,也可根據需要,設立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時間設置為5 sec,可以在5-30 sec內調節。退火時間太長可能導致擴增產物在膠上呈彌散狀。

**延伸時間:推薦5 sec/kb,也可根據需要,適當延長至10 sec/kb。

 

注意事項

1.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2.本產品僅作科研用途!

 

Ver.CN20230707

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