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Hieff?exosometrackerkit(for green fluorescence)外泌體綠色熒光示蹤試劑盒

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詳細介紹

 

Exosome(外泌體)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質雙分子層結構;存在于細胞培養上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;Exosome攜帶有多種蛋白質、脂類、DNARNA等重要信息,不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。

本試劑盒外泌體綠色熒光示蹤染料能將脂質尾巴的色熒光染料(PKH67)結合到細胞膜脂質區域上。該試劑盒可以在染色過程中增加染色效率,同時維持細胞活力。可用于外泌體的標記染色實驗,監測細胞吞噬作用。

 

產品組分

編號

組分

規格

40781-A

PKH67

20 μL1mM

40781-B

Dilution Buffer

200 μL

 

產品性質

化學名稱(Chemical name

PKH67

CAS號(CAS NO.

N/A

分子式(Formula

N/A

分子量(Molecular weight

200

外觀(Appearance

liquid

激發波長(Ex

λex 490 nm

發射波長(Em

λem 502 nm

 

運輸和保存方法

  1. 收到產品后將試劑分開儲存,使用前請充分混勻。
  2. 冰袋運輸,2-8℃避光保存,有效期12個月。

 

注意事項

  1. PKH67母液易水解,建議分裝保存,分裝后用封口膜密封保存;
  2. PKH67工作液應現配現用,不能能提前配制,否則將影響染色效果;
  3. PKH67溶解液在較低溫度下會凝固而粘在管底內,可以 37℃水浴片刻至全部融解后使用。
  4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
  5. 本產品僅作科研用途!

 

操作方法

1.外泌體蛋白定量:取適量外泌體進行BCA蛋白濃度測定以確定外泌體蛋白量;

2.染料工作液制備:用Dilution bufferPKH67儲存液稀釋10倍,配制濃度為100 μM的染料工作液(避光操作,工作液應根據實驗用量適當配置,現配現用);

3.外泌體染色:

1)在外泌體中加入染料工作液,建議加入劑量如下:

外泌體蛋白量

加入染料工作液劑量

10~200 ug

50 μL

200~500 ug

100 μL

500~1000 ug

200 μL

2)加入染料工作液后將離心管蓋緊,通過渦旋振蕩器混勻1 min,再靜置孵育10min

3)向孵育后的外泌體-染料復合物中加入10 mL1x PBS混勻;

4)按照外泌體提取方法再次提取外泌體以去除多余染料;

5)取200 μL 1×PBS重懸沉淀物,沉淀即為染色后的外泌體。

注意:過度染色會導致外泌體膜完整性喪失,最佳PKH67染料/外泌體用量需根據自身實驗而決定。 

HB2201104

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