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SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝膠配制試劑盒
- 品牌：翌圣生物
- 產(chǎn)地：
- 供應(yīng)商報(bào)價(jià)：面議
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
更新時(shí)間：2025-01-10 08:26:24 -
銷售范圍售全國(guó)
入駐年限第2年
營(yíng)業(yè)執(zhí)照已審核
- 同類產(chǎn)品蛋白電泳(52件)
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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品描述
蛋白電泳經(jīng)常使用聚丙烯酰胺凝膠來實(shí)現(xiàn)蛋白分離，此類凝膠一般由濃縮膠和分離膠兩部分組成，前者起到將蛋白樣品進(jìn)行濃縮的作用，后者則是根據(jù)凝膠所使用的丙烯酰胺單體和N,N-亞甲基雙丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交聯(lián)劑的濃度不同從而分離不同大小范圍的蛋白質(zhì)。
本試劑盒提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制膠設(shè)備和蒸餾水即可配膠，大大簡(jiǎn)化了制膠過程，貨號(hào)20328ES50可配制30-50塊常規(guī)大小的凝膠，20328ES72可配制150~250塊常規(guī)大小的凝膠。
翌圣為您提供Western Blot實(shí)驗(yàn)整體解決方案，相關(guān)產(chǎn)品選購(gòu)請(qǐng)參考：WB實(shí)驗(yàn)系列產(chǎn)品-選購(gòu)指南
產(chǎn)品組分
組分編號(hào)
組分名稱
產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格
產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格
保存方式
20328ES50（30~50 gels）
20328ES72（150~250 gels）
20328-A
30%丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺，29:1
100 mL
500 mL
4℃避光
20328-B
4×Tris-HCl-SDS分離膠緩沖液，pH 8.8
70 mL
350 mL
4℃
20328-C
4×Tris-HCl-SDS濃縮膠緩沖液，pH 6.8
30 mL
90 mL
4℃
20328-D
APS 過硫酸銨
0.5 g
2.5 g
4℃
20328-E
TEMED 四甲基二乙胺
0.6 mL
2.8 mL
4℃避光
運(yùn)輸和保存方法
室溫運(yùn)輸。4℃避光保存，有效期12個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1.丙烯酰胺溶液和TEMED有毒，請(qǐng)適當(dāng)防護(hù)。
2. APS溶液不穩(wěn)定，當(dāng)配制成10%溶液后，分裝成-20℃凍存。盡量減少室溫存放時(shí)間，以防失效。若是發(fā)現(xiàn)凝膠聚合時(shí)間明顯延長(zhǎng)，需要更換使用其它-20℃凍存或者新鮮配置的10%APS。
3.TEMED易揮發(fā)，使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。
4.凝膠凝聚的速度與溫度、光照、以及TEMED、APS的用量關(guān)系密切。在其他組分用量不變的前提下，可通過適當(dāng)調(diào)節(jié)TEMED以及APS的用量，控制現(xiàn)有室溫條件下凝膠凝聚的速度。可參考附件的量進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整。
5.溫度較低時(shí)，4×Tris-HCl-SDS分離膠緩沖液和4×Tris-HCl-SDS濃縮膠緩沖液中的SDS可能析出。此時(shí)需水浴溫育，并在完全溶解和混勻后使用。
6.凝膠配制過程，特別是液體混勻步驟，需盡量避免氣泡的產(chǎn)生。
7.在分離膠上層進(jìn)行水壓時(shí)需小心操作，加水速度不宜過快。
8.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
9.本產(chǎn)品僅作科研用途！
使用方法
1 根據(jù)目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度【參考附表1】
2 按照附表2配制相應(yīng)濃度的SDS-PAGE分離膠，制膠程序如下：
2.1 將不同體積的30% Acr-Bis(29:1)、4×分離膠緩沖液和蒸餾水在試管或者小燒杯內(nèi)混合；
2.2 加入10% APS和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免氣泡產(chǎn)生；
2.3 在裝好的制膠模具中灌入適量分離膠溶液，對(duì)于mini膠，分離膠液加至約距前玻璃板頂端1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可。然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-5cm的水層，從而壓平凝膠表面；2.4 靜置30-60 min，待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個(gè)清晰的界面，表面凝膠已聚合；
3 按照附表3配制SDS-PAGE濃縮膠，制膠程序如下：
3.1 去除覆蓋在分離膠上的水層。
3.2 將不同體積的30% Acr-Bis(29:1)、4×濃縮膠緩沖液和蒸餾水在試管或者小燒杯內(nèi)混合；
3.3 加入10% APS和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產(chǎn)生氣泡。
3.4 將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，直至凝膠溶液到達(dá)前玻璃板的頂端。
3.5 將梳子插入凝膠內(nèi)，避免產(chǎn)生氣泡。
3.6 靜置10-20 min，等待濃縮膠聚合。
3.7 待凝膠聚合后，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔。
3.8 可用電泳緩沖液吹走孔內(nèi)殘留的一些膠液【可選】，然后進(jìn)行上樣和后續(xù)的常規(guī)電泳操作。
附表1. 不同濃度SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍
SDS-PAGE分離膠濃度
最佳分離范圍
6%凝膠
50-150 KD
8%凝膠
30-90 KD
10%凝膠
20-80 KD
12%凝膠
12-60 KD
15%凝膠
10-40 KD
附表2. 不同濃度SDS-PAGE分離膠配制體系
分離膠濃度
凝膠體積(mL)
所需各組分體積（單位：mL）
蒸餾水
30% Acr-Bis（29:1）
4×Tris-HCl-SDS分離膠緩沖液，pH 8.8
10% APS
TEMED
6%
5
2.7
1.0
1.25
0.05
0.004
10
5.4
2.0
2.5
0.1
0.008
15
8.1
3.0
3.75
0.15
0.012
20
10.8
4.0
5.0
0.2
0.016
30
16.2
6.0
7.5
0.3
0.024
50
27.0
10.0
12.5
0.5
0.040
8%
5
2.37
1.33
1.25
0.05
0.003
10
4.7
2.7
2.5
0.1
0.006
15
7.1
4.0
3.75
0.15
0.009
20
9.5
5.3
5.0
0.2
0.012
30
14.2
8.0
7.5
0.3
0.018
50
23.7
13.3
12.5
0.5
0.030
10%
5
2.03
1.67
1.25
0.05
0.002
10
4.07
3.33
2.5
0.1
0.004
15
6.1
5.0
3.75
0.15
0.006
20
8.1
6.7
5.0
0.2
0.008
30
12.2
10.0
7.5
0.3
0.012
50
20.3
16.7
12.5
0.5
0.020
12%
5
1.7
2.0
1.25
0.05
0.002
10
3.4
4.0
2.5
0.1
0.004
15
5.1
6.0
3.75
0.15
0.006
20
6.8
8.0
5.0
0.2
0.008
30
10.2
12.0
7.5
0.3
0.012
50
17.0
20.0
12.5
0.5
0.020
15%
5
1.2
2.5
1.25
0.05
0.002
10
2.4
5.0
2.5
0.1
0.004
15
3.6
7.5
3.75
0.15
0.006
20
4.8
10.0
5.0
0.2
0.008
30
7.2
15.0
7.5
0.3
0.012
50
12.0
25.0
12.5
0.5
0.020
附表3. 5% SDS-PAGE濃縮膠配制體系
凝膠體積（mL）
所需各組分體積（單位：mL）
蒸餾水
30% Acr-Bis（29:1）
4×Tris-HCl-SDS濃縮膠緩沖液，pH 6.8
10% APS
TEMED
2
1.14
0.34
0.5
0.02
0.002
4
2.28
0.68
1.0
0.04
0.004
6
3.42
1.02
1.5
0.06
0.006
8
4.56
1.36
2.0
0.08
0.008
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貨號(hào)
規(guī)格
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20320ES76
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20325ES62
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