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FuniCut? speI限制性內切酶(speI酶切序列位點A/CTAGT)

品牌：翌圣生物
產地：
供應商報價：面議

翌圣生物科技(上海)股份有限公司更新時間：2024-12-24 09:03:45

銷售范圍售全國

入駐年限第1年

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詳細介紹

產品簡介

FuniCut® 系列內切酶是通過基因工程重組技術，可在5~15 min內精確完成DNA切割的快速限制性內切酶，適用于快速切割質粒DNA、PCR產物、基因組DNA 等。FuniCut® 系列快速內切酶共用一種酶切緩沖液，從而簡化了酶切反應體系，另外，有良好的酶活冗余度，可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。

產品信息

貨號	15028ES50
規格	50 T
識別位置	5'-A↓CTAGT-3' 3'-TGATC↑A-5'
推薦反應條件	1×FuniCut® 緩沖液；最適37℃孵育
酶活	20 U/μL
失活條件	80°C孵育20 min
同裂酶	AhlI, BcuI

組分信息

組分編號	組分名稱	15028ES50
15028-A	FuniCut® SpeI	50 μL
15028-B	10×FuniCut® Buffer	1 mL
15028-C	10×FuniCut® Color Buffer*	1 mL

*10×FuniCut® Color Buffer包括紅色和黃色示蹤染料，可將產物直接用于凝膠電泳。FuniCut® Color Buffer的紅色染料與2500 bp雙鏈DNA片段在1%瓊脂糖凝膠中遷移速率接近；黃色染料與10 bp雙鏈DNA片段在1%瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。

儲存條件

-25~-15℃保存，有效期2年。

注意事項

3 h孵育未表現星號活性，延時酶切可能出現星號活性。
受EcoKI甲基化影響，序列可能重疊，剪切可能受影響。
受EcoBI甲基化影響，序列可能重疊，剪切可能受影響。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
本產品僅作科研用途。

使用方法

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建議的加樣順序配制體系反應液（冰上操作）

組分	質粒DNA	PCR產物	基因組DNA
ddH₂O	15 μL	16 μL	30 μL
10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer	2 μL	3 μL*	5 μL
底物DNA	2 μL (~1 μg)	10 μL (~0.2 μg)	10 μL (5 μg)
FuniCut® SpeI	1 μL	1 μL	5 μL
Total	20 μL	30 μL	50 μL

*本體系指已純化后的PCR產物。未純化的PCR產物具備一定的離子強度，10×FuniCut® Buffer加入量可適當減少至2 μL。若下一步進行克隆等實驗，酶切前需純化PCR產物。

2) 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻（切勿渦旋），然后瞬時離心以收集掛壁液滴。

3) 37℃孵育15 min（質粒），或15~30 min（PCR產物），或30~60 min（基因組DNA）。

4) 80°C孵育20 min即可使酶失活，停止反應（可選）。

5) 如果使用FuniCut® Color Buffer進行酶切反應，得到的產物可直接上樣電泳。

2. 雙酶切或多酶切

1) 每種內切酶的用量為1 μL，并根據需要適當擴大反應體系。

2) 所有內切酶的體積總和不得超過總反應體系的1/10。

3) 如果選用的幾種內切酶的最適反應溫度不同，應先以最適溫度低的酶開始酶切，再添加最適溫度較高的酶，以較高的溫度進行孵育。

3. 質粒的擴大反應體系

組分	體積（20 μL）	體積（20 μL）	體積（50 μL）*
DNA	1 μg	2 μg	5 μg
FuniCut® SpeI	1 μL	2 μL	5 μL
10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer	2 μL	2 μL	5 μL
Total	20 μL	20 μL	50 μL