通用RNA提取試劑盒

產品編號：M004

包裝規格：50T/100T

產品簡介

本公司的離心柱式通用RNA提取試劑盒是一種基于離心柱法從細胞、組織及細菌中高效、高質量地抽提抽提總RNA的試劑盒，所抽提RNA可以用于如反轉錄、RT-PCR、qPCR、cDNA克隆等下游實驗。

本試劑盒抽提總RNA的得率高、純度高。

下圖為本試劑盒與YD、In品牌同類產品的RNA抽提效果對比。樣品為50萬個293T細胞，洗脫液用量均為50μl，取5μl洗脫樣品在1%瓊脂糖凝膠中電泳約8分鐘后拍照。實際抽提效果會因實驗條件、檢測儀器等的不同而存在差異，本圖僅供參考。

有效期12個月。

注意事項

• 本產品僅限于科學研究使用。
• 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴護目鏡、一次性手套和口罩操作。
• 所有相關器皿耗材都應為RNase-free產品，操作過程要小心，避免環境中RNA酶污染樣品。
• 需自備氯仿或RNA pure， 無水乙醇。

操作步驟

1. 樣本處理：
2. 組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1mLLysis Buffer，充分勻漿。
3. 貼壁細胞：吸盡培養基，每10⁶細胞加1mL Lysis Buffer，吹打混勻。
4. 懸浮細胞：離心收集細胞，每10⁶動物、植物和酵母細胞或每10⁷細菌細胞加1mLLysis Buffer，吹打混勻。
5. 室溫放置5min，使核酸蛋白復合物完全分離。
6. 每1mL樣品中加2mL氯仿或RNA pure，蓋好管蓋，劇烈振蕩15s，室溫放置3min，4℃ 12000 rpm離心15min。
7. 吸附柱預處理：向吸附柱中加入500μLWash Buffer Ⅰ，室溫靜置2min，4℃ 12000rpm離心2min，棄廢液。
8. 小心吸取步驟3中上層無色水相至新管中，并加入200uL乙醇吹打混勻，轉移混合物至吸附柱中，室溫放置2min，4℃ 12000rpm離心15s，棄廢液。
9. 向吸附柱中加入600μL Wash BufferⅡ(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，4℃ 12000 rpm離心15s，棄廢液。重復洗滌一次，棄廢液。
10. 4℃ 12000rpm離心2min，棄掉收集管。
11. 將吸附柱放入新管中，向膜ZY滴加40-100μL RNase-free water，室溫放置2min，4℃ 12000rpm離心2min即得到RNA。

常見問題解答

RNA得率低

1. 樣本未充分裂解，需降低初始樣本量。

RNA降解

1. 樣本保存不當，樣本收集后需立即進行下游實驗，或保存于-80℃；
2. 實驗相關器皿耗材都應為RNase-free。
3. RNA被污染

上層水相被中間相污染，轉移上層水相時，注意不要擾動中間層，并轉移體積低于500uL。

1. A260/A280比值低
2. 樣本未充分裂解，需降低初始樣本量；
3. 樣本被污染，離心分層后不要轉移全部上層水相；
4. 樣本檢測吸光度時使用無酶水稀釋會造成比值降低，可使用10mMTris-HCl(5)稀釋。