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phi29 DNA Polymerase (100 U/μL)

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詳細介紹

 

phi29 DNA polymerase來源于Bacillus subtilis噬菌體,經基因工程改造后具有卓越的鏈置換和持續合成能力,可合成長達70 kbDNA片段。此外其3→5核酸外切酶校讀活性較強,推薦體系中引物3末端修飾以防止降解,常用于質粒的體外合成和全基因組合成。

 

產品組分

組分編號

組分名稱

產品編號/規格

14409ES03

14409ES08

14409ES25

14409

phi29 DNA Polymerase (100 U/μL

1 mL

5 mL

25 mL

 

產品應用

1)全基因組擴增(WGA);

2)滾環擴增 (RCA)

3)多重置換擴增(MDA)。

 

單位定義

1 U30條件下反應10 min,能使0.5 pmoldNTP摻入酸不溶性沉淀所需的酶量

 

運輸與保存方法

干冰運輸。-20保存,有效期2年。

 

質量控制

純度檢測:純度大于95%

核酸外切酶殘留檢測:10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind 37下孵育4 hDNA電泳譜帶無變化。

切口酶殘留檢測:100 U本品和0.5 μg IL23R質粒,37下孵育4 hDNA電泳譜帶無變化。

RNase殘留檢測:10 U本品和0.5 μg 293T-RNA37下孵育4 hDNA電泳譜帶無變化。

 

熱失活

6510 min

 

注意事項

1. Buffer在融解時,如果出現少量沉淀屬正常現象,請顛倒混勻后使用

2. 本產品僅做科研用途;

3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

使用方法(以基因組DNA擴增為例)

  1. 反應體系配制:

組分

用量

10×phi29 Reaction BufferCat#15442ES

2 μL

隨機引物

總投入量20-75 μM

dNTPs

總投入量2 mM

基因組DNA

5-50 ng

ddH2O

to 19

phi29 DNA Polymerase (10 U/μL

10-20 U

2. 反應條件:30孵育3 h6510 min失活phi29 DNA polymerase

HB221129

 

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