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rTEV Protease重組煙草蝕紋病毒蛋白酶

品牌：翌圣生物
產(chǎn)地：
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司更新時(shí)間：2024-12-24 09:03:45

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詳細(xì)介紹

產(chǎn)品描述

重組型TEV蛋白酶（rTEV）是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶，不僅保持天然TEV酶的功能活性，且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更強(qiáng)的穩(wěn)定性和特異性。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶，具有很強(qiáng)的位點(diǎn)特異性，嚴(yán)格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位點(diǎn)在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30℃時(shí)可達(dá)到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和溫度4-30℃的廣泛范圍內(nèi)皆有活性（見表1），使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動(dòng)。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His標(biāo)簽，通過Ni-NTA樹脂去除，以達(dá)到純化目的蛋白的目的。

翌圣為您提供蛋白純化實(shí)驗(yàn)整體解決方案，相關(guān)產(chǎn)品選購請參考：蛋白純化系列產(chǎn)品-選購指南

表1. 不同溫度下rTEV酶切活性

反應(yīng)時(shí)間（h）	不同溫度下剪切活性（%）
反應(yīng)時(shí)間（h）	4℃	16℃	21℃	30℃
1	34	58	56	70
2	58	80	78	90
3	71	99	99	99
3.5	84	99	99	99

產(chǎn)品性質(zhì)

來源（Source）	大腸桿菌
外觀（Appearance）	無色透明液體
比活力（Specific Activity）	5 U/μL
活性定義（Unit Definition）	在1×rTEV Buffer（50 mM Tris，pH 8.0，0.1 mM EDTA，1 mM DTT）中，30℃反應(yīng)1 h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。
純化（Purification）	Ni柱親和純化
純度（Purity）	≥95%（by SDS-PAGE）

產(chǎn)品組分

編號	組分名稱	產(chǎn)品貨號/規(guī)格
編號	組分名稱	20403ES80/ （1000 U）	20403ES92 （10×1000 U）	20403ES10 （10 KU）	20403ES50 （50 KU）
20403-A	rTEV Protease（5 U/μL）	200 μL	10×200 μL	2×1 mL	10 mL
20403-B	rTEV Buffer （10×）	600 μL	10×600 μL	6 mL	30 mL

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。rTEV Buffer于-20℃保存，一年穩(wěn)定。rTEV Protease，-20℃保存，6個(gè)月穩(wěn)定；-80℃長期保存，一年穩(wěn)定。建議收到貨或者第一次使用時(shí)分裝各組分保存，避免反復(fù)凍融。

應(yīng)用實(shí)例

1. 在EP管中配制如下反應(yīng)體系。

組分	用量
融合蛋白	40 μg
rTEV Protease (5 U/μL)	4 μL
rTEV buffer（10×）	10 μL

2. 30℃孵育2h或4℃過夜。

注意事項(xiàng)

1. 影響天然TEV酶活性的常見因素：1）PMSF和AEBSF（1 mM），TLCK（1 mM），Bestatin（1 mg/mL），EDTA（1 mM），Pestatin A（1 mM）以及E-64（3 mg/mL），而rTEV可兼容上述抑制劑；2）Zn離子濃度（>5 mM），同樣對rTEV活性有抑制；3）與半胱氨酸反應(yīng)的試劑，也是rTEV的潛在抑制劑。

2. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3. 本產(chǎn)品僅作科研用途！

HB221013

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