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2025-01-21 09:34:37蛋白質分離技術: 蛋白質分離技術用于從復雜混合物中分離和純化蛋白質。包括電泳、色譜、超濾、沉淀等方法，基于蛋白質的物理、化學性質或生物學特性實現分離。廣泛應用于生物化學、分子生物學、醫學等領域，對蛋白質研究、藥物開發具有重要意義。

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聚焦前沿，專注表征——生物藥CQA系列研討會來啦！

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 賽默飛色譜與質譜中國 351
2022-05-11
全柱檢測毛細管電泳電聚焦技術蛋白質分離技術低流速分析方法藥物研究

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蛋白質分離技術問答

2022-01-15 11:09:48分子蒸餾技術在中藥制劑分離中的應用: 本文簡述了分子蒸餾技術的原理和特點,以及其在中藥制劑分離中的應用.中藥綜合治本的基礎是利用其有效的復合化學成分.中藥有效成分的質量關鍵取決于提取分離與純化技術的高低.分離純化的目的是將無效和有害組分除去,盡量保留有效成份或有效部位.常見的分離純化方法有水提醇沉法,醇提水沉法,酸堿沉淀法,鹽析法,濾過分離法和結晶法等,這些方法在長期的應用中,發現存在不少問題.近年來,分離純化新技術新方法逐漸應用到中藥制劑中.分子蒸餾技術是在高真空下進行的一種特殊的液-液分離與精制的高效蒸餾技術,適合黏度大,沸點高,極易被氧化物系的分離,能夠解決常規蒸餾技術所不能解決的問題.

2022-02-25 15:13:27萌新必看! 生物大分子液相色譜分離技術讀本【電子書】: 近年來隨著以治療性蛋白、肽、核酸及疫苗等生物藥的廣泛應用，對此類生物大分子的分離、解析、評價技術水平也提出了更高的要求。生物大分子的分離手段多種多樣，例如：鹽析、有機溶劑沉淀法、液相色譜法、電泳等方法。其中，高效液相色譜法在分辨率、選擇性、分離速度方面具有明顯優勢。液相色譜法不僅適用于天然產物，還廣泛應用于重組蛋白和合成核酸的研發、抗體藥物生產中的純化及質量管理等。在這本《生物分離讀本》中，我們對分析這些生物大分子樣品時所采用的液相色譜分離模式的原理、特點及實際應用案例進行了詳細介紹。希望對您的分析工作有所幫助。掃描下方二維碼即可在線瀏覽電子書

2025-04-14 18:30:13反相液相色譜蛋白質原理是什么？: 反相液相色譜（Reverse Phase Liquid Chromatography, RPLC）是一種基于疏水相互作用的高效分離技術，廣泛應用于蛋白質及多肽的分離、純化與分析。其核心原理在于固定相與流動相的極性差異，以及樣品分子與固定相之間的疏水分配效應。以下將從分離機制、蛋白質特異性行為、固定相與流動相選擇、應用場景等角度展開說明。反相色譜的固定相通常由疏水性材料（如C18、C8或C4鍵合硅膠）構成，而流動相為極性溶劑（如水、甲醇或乙腈）。分離過程中，蛋白質的疏水區域與固定相發生非共價結合，極性較強的分子優先被流動相洗脫，疏水性更強的分子則因保留時間延長而實現分離。梯度洗脫是優化分離效果的關鍵手段，通過逐步增加有機溶劑比例削弱疏水作用，從而按疏水性差異依次洗脫目標分子。蛋白質在反相色譜中的行為具有特殊性。由于流動相中常添加三氟乙酸（TFA）等離子對試劑，蛋白質可能發生部分去折疊，暴露出內部疏水殘基，增強與固定相的相互作用。此外，低濃度TFA可誘導蛋白質形成伸展構象，導致其在死時間前洗脫；而高濃度TFA通過形成離子對使蛋白質構象緊湊（如“熔融球體”），延長保留時間。這種構象敏感性使反相色譜不僅能分離蛋白質，還可用于研究其構象穩定性與表面疏水性。固定相的選擇需綜合考慮蛋白質大小與疏水性。C18和C8適用于小分子肽段，而C4因較短的烷基鏈更適合大分子蛋白質，避免過度保留。流動相中，乙腈因低黏度和高洗脫能力成為首選有機溶劑，TFA則通過抑制硅醇基電離減少峰拖尾。梯度優化需平衡分辨率與時間成本，例如降低最大有機溶劑濃度可改善峰分離，但可能延長分析周期。在應用層面，反相色譜憑借高分辨率與質譜兼容性，成為蛋白質組學研究的重要工具。其典型場景包括：多肽藥物的純度分析、酶解產物的肽圖繪制、翻譯后修飾（如磷酸化、糖基化）的檢測，以及蛋白質構象變化的動態監測。例如，與質譜聯用時，反相色譜可分離復雜肽段混合物，通過質譜鑒定實現蛋白質序列的高通量解析。此外，其在治療性抗體表征中的應用也日益增多，尤其在檢測聚集體與降解產物方面表現卓越。操作參數的設置直接影響分離效能。流速需根據色譜柱內徑與填料粒徑調整，通常內徑4.6mm的C18柱推薦流速為1mL/min。壓力上限需控制在柱耐受范圍內（通常≤6000psi），以避免固定相塌陷。檢測方法方面，紫外檢測（280nm）依賴蛋白質中芳香族氨基酸的吸收，而質譜聯用可提供分子量及結構信息，靈敏度更高。總之，反相液相色譜通過疏水相互作用與動態梯度洗脫，實現了蛋白質的高效分離與分析。其獨特的構象敏感性、靈活的固定相選擇及與質譜的兼容性，使其在生物醫藥與基礎研究中不可或缺。未來，隨著新型固定相（如表面多孔顆粒）與微流控技術的發展，反相色譜在蛋白質分析中的分辨率與通量將進一步提升。

2025-01-15 12:15:14蛋白質純化系統連接方法有哪些？: 蛋白質純化是生物科學研究和藥物開發中的關鍵步驟，而蛋白質純化系統的連接方法對于保證純化過程的效率與穩定性至關重要。本文將詳細探討蛋白質純化系統的連接方法，包括不同設備的選擇、連接方式以及優化方案，幫助研究人員在實驗過程中提高工作效率，確保實驗結果的可靠性和 reproducibility。通過深入了解每種連接方法的特點與適用場景，您將能夠根據具體的實驗需求，選擇合適的方案，大限度地提高蛋白質純化的質量和產量。 1. 蛋白質純化系統的構成與連接需求蛋白質純化過程通常需要多個系統和設備的配合，包括但不限于色譜柱、流動相系統、樣品注射系統和檢測儀器。為了確保每一環節的高效運行，各個系統的連接方式必須得到精確設計。合理的連接方法不僅能提高系統的穩定性，還能降低操作中的誤差，提高純化效率。通常，蛋白質純化系統的連接方法涉及流體通路的設計，包括管道、泵、閥門和分配器的連接。每個系統之間的連接方式應確保流體流動的順暢性和穩定性，并能夠應對不同壓力和流量要求。需要特別注意的是，連接點的密封性、管道的內徑與材質、以及操作過程中的溫度控制，這些都會直接影響純化過程的質量。 2. 常見的蛋白質純化系統連接方式 (1) 軟管與接頭連接軟管與接頭的連接是常見的一種連接方式，尤其適用于低壓力系統。軟管的柔性設計使得它能夠在有限的空間內靈活布置，并能適應不同規格的連接接頭。對于流動相較為復雜或者需要快速更換系統的實驗，這種連接方式具有很大的便利性。使用軟管時，接頭的密封性和材質的選擇至關重要。通常，建議選用不含金屬雜質的高質量材料，避免在蛋白質純化過程中引入不必要的污染物。根據實際需求，可以選擇硅膠、聚氨酯或氟塑料等不同材質的軟管。 (2) 硬管與快速連接系統對于高壓、需要精確控制流量的實驗，硬管與快速連接系統的組合則顯得更加重要。這種連接方式通常應用于需要較高流量和壓力控制的色譜系統。硬管材質通常為不銹鋼或高耐壓塑料，能夠在高壓條件下保持穩定性。快速連接系統則通過快捷的卡扣設計，可以快速拆卸、組裝，減少設備更換時間。在自動化實驗和大規模蛋白質純化系統中，這種連接方式的高效性尤為突出。 (3) 聯鎖閥門與自動化系統的結合自動化蛋白質純化系統中，聯鎖閥門和智能控制系統的結合使用可以實現更的實驗操作。這些系統通過電子傳感器監控流體的狀態，并根據反饋自動調節流量、壓力等參數。閥門之間的聯鎖設計則避免了人為操作錯誤，確保了實驗過程的穩定性。 3. 連接方法的優化建議在選擇合適的連接方式時，研究人員應根據實驗的具體要求，綜合考慮以下幾個因素：流量與壓力要求：系統是否需要大流量和高壓處理，這將直接影響管道和連接件的選擇。清潔與消毒要求：高純度蛋白質的提純過程要求系統設備必須能夠高效清洗，連接點應易于拆卸清洗，防止交叉污染。操作與維護的便利性：在多次使用的實驗環境中，連接系統的拆卸與維護便利性至關重要，過于復雜的連接會增加操作難度。自動化程度與智能控制：根據實驗規模，選用適合的自動化系統，能夠提高實驗效率，減少人為操作帶來的誤差。 4. 結語蛋白質純化系統的連接方法是影響純化效果和實驗效率的關鍵因素。合理的連接方案不僅能優化流體通路，提升純化效果，還能確保系統的長期穩定運行。通過合理選擇軟管與接頭、硬管與快速連接系統，或是聯鎖閥門與自動化系統的組合，能夠使整個實驗過程更加高效與精確。專業的連接方案在蛋白質純化的各個環節中發揮著至關重要的作用，保障研究工作的成功開展。

2022-01-05 18:00:28Dixon序列用于大鼠、小鼠水脂分離磁共振成像-脂肪抑制技術: Dixon序列用于大鼠、小鼠水脂分離磁共振成像-脂肪抑制技術Dixon脂肪抑制技術是由Dixon 提出，其基本原理是利用水、脂肪的化學位移差異，使用不同的回波時問，分別采集水和脂肪質子的in Phase 和 opposed -phase兩種回波信號。當水和脂肪相位相同時，采集到的信號為：S1=W + F;當水和脂肪相位相反時，采集到的信號為：S2=W – F;兩種不同相位的信號相加：S1 + S2 =2W;即可以得到去除脂肪信號，產生一幅純水質子的圖像，從而達到脂肪抑制的目的。兩種信號相減：S1 – S2 =2F;也可以得到純脂肪的信號，產生脂肪圖像；這就是原始的兩點式Dixon方法，還有多種擴展形式，以及三點式Dixon成像方法。Dixon技術的應用Dixon技術可用于多方面研究，包括肝臟脂肪研究、肥胖與代謝性疾病、脂肪腫瘤、腎臟、肝臟局灶性病變等。小鼠核磁共振Dixon水脂成像圖 Dixon水脂分離技術是一種使用的核磁成像技術，在某些動物疾病模型的診斷、鑒別與 zhi 療過程的評估上具有一定的獨到之處。