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2025-01-21 09:35:14高通量多毛細(xì)管電泳
高通量多毛細(xì)管電泳是一種高效的分離分析技術(shù),它利用多根細(xì)小的毛細(xì)管同時進(jìn)行電泳分離,能夠大幅度提高分析通量和分離效率。該技術(shù)具有分辨率高、靈敏度高、樣品消耗少、分析速度快等優(yōu)點,廣泛應(yīng)用于生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸等的分離分析,以及藥物代謝、環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領(lǐng)域。通過優(yōu)化毛細(xì)管材料、電泳緩沖液及電壓等條件,可進(jìn)一步提升其分離性能和適用性。

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高通量多毛細(xì)管電泳相關(guān)內(nèi)容

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2023-01-09 17:03:25Ebook 下載 —— ImageXpress 高內(nèi)涵在高通量篩選中的應(yīng)用
醫(yī)藥發(fā)展依賴于新藥開發(fā)的進(jìn)度,而高通量藥物篩選(High-Through Screening,HTS)可短時間內(nèi)篩出數(shù)種化合物,有助于加速研究進(jìn)程,因此高通量藥物篩選技術(shù)在世界范圍內(nèi)得以廣泛應(yīng)用。學(xué)術(shù)研究和生物制藥公司加大投資力度將會推進(jìn)高通量藥物篩選技術(shù)市場的發(fā)展,而高通量藥物篩選技術(shù)的也是生命科學(xué)研究乃至整個醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展的原動力。隨著技術(shù)的進(jìn)步和先進(jìn)迭代產(chǎn)品不斷增加,預(yù)計未來高通量藥物篩選技術(shù)市場內(nèi)將迅速增長 , 而高通量藥物篩選技術(shù)的應(yīng)用也會隨之迅速增加。此外,隨著高內(nèi)涵(High-Content Screening,HCS)系統(tǒng)的不斷完善,基于細(xì)胞的測定有望得到更多的利用,并且從生化測定向基于細(xì)胞測定的方式大幅轉(zhuǎn)變。Molecular Devices 公司的 ImageXpress 系列高內(nèi)涵系統(tǒng),不但提供了細(xì)胞成像技術(shù)實現(xiàn)的所有細(xì)節(jié)和功能,其完善的激光自動聚焦加圖像自動聚焦技術(shù)有極大的兼容性和開放性,能夠?qū)崿F(xiàn)未來新型耗材和方法的檢測和分析。MetaXpress PowerCore 高內(nèi)涵并行加速軟件系統(tǒng)能夠大大提高系統(tǒng)分析通量,加速藥物檢測的速度,節(jié)省時間和人力的成本。這些特性決定了 ImageXpress 系統(tǒng)將會成為高內(nèi)涵篩選中不可替代的篩選檢測終端,為醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展做出巨大的貢獻(xiàn)!Ebook下載請掃描二維碼
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2023-03-07 22:09:15高通量單細(xì)胞力譜測定!多功能單細(xì)胞顯微操作技術(shù)助力單細(xì)胞力學(xué)研究
單程細(xì)胞具有復(fù)雜生物學(xué)性質(zhì),它們通過細(xì)胞外基質(zhì)ECM形成緊密的細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞與細(xì)胞連接,諸如上皮細(xì)胞通過這種特殊的鏈接方式構(gòu)成了屏障層保護(hù)人體免受外界損傷。因此細(xì)胞之間以及細(xì)胞基底的粘附力測定對于研究細(xì)胞粘附蛋白的機(jī)制有著重要意義。使用力學(xué)工具測量細(xì)胞間以及細(xì)胞與基質(zhì)之間的粘附力始終不是一件容易的事情。首先,由于細(xì)胞與基質(zhì)的作用力僅為nN級別,因此需要力學(xué)精度較高的設(shè)備才能夠測量,而且在這其中較為適合的工具為原子力顯微鏡(AFM)。原子力顯微鏡能夠提供納米級別的操作精度并可測量從pN~nN范圍的力譜。但是受制于AFM探針本身的限制,需要借助修飾手段才能夠讓細(xì)胞與探針固定到一起,這個過程十分繁瑣,并且由于需要大量手工操作很難實現(xiàn)高通量的測量。而不同的細(xì)胞由于細(xì)胞異質(zhì)性使得要想確定粘附力需要較多樣本才能獲得相對準(zhǔn)確的值,無法實現(xiàn)高通量測量直接限制了原子力探針在細(xì)胞粘附力上的應(yīng)用。而多功能單細(xì)胞顯微操作FluidFM技術(shù)的出現(xiàn)改變了這一現(xiàn)狀,它使用特殊的中空探針能夠輕松地通過負(fù)壓抓取細(xì)胞,取得和AFM近似精度的數(shù)據(jù),無需在探針上進(jìn)行任何修飾,不會改變細(xì)胞表面的任何通路,從而能夠得到接近細(xì)胞原生的數(shù)據(jù)。在實驗結(jié)束后能夠通過正壓快速丟棄用過的細(xì)胞,具備很高的自動化,能夠快速測量細(xì)胞粘附力。使用FluidFM對細(xì)胞操作的基本流程 FluidFM在粘附力測量上具備顯著優(yōu)勢。如圖所示,F(xiàn)luidFM能夠通過負(fù)壓將細(xì)胞吸附到原子力探針的末端,通過高精度位移臺的控制將細(xì)胞從基底上分離,并且同時記錄FD曲線。通過FD曲線能夠獲得最大粘附力Fmax和粘附能量Emax。通過高度自動化的控制系統(tǒng)能夠在短時間內(nèi)測量大量細(xì)胞粘附力,評估細(xì)胞群體分布以及細(xì)胞間差異,并且可有效避免傳統(tǒng)粘附力測量因準(zhǔn)備時間過長而錯過最佳測量時間導(dǎo)致的細(xì)胞粘附力改變,得到更為精準(zhǔn)的結(jié)果。近期,Agoston等人使用多功能單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)FluidFM實現(xiàn)了高通量細(xì)胞粘附力測量,對同種細(xì)胞不同區(qū)以及不同細(xì)胞之間的粘附力進(jìn)行測量和比較。作者首先對Vero和Hela細(xì)胞在不同狀態(tài)下的粘附力進(jìn)行了測量和比較,總共測量了214個細(xì)胞。通過比較明膠涂層上處于單個細(xì)胞、孤島狀細(xì)胞、致密連接細(xì)胞以及單層細(xì)胞上游離細(xì)胞之間的粘附力,能夠明顯觀測到Vero細(xì)胞處于致密連接的細(xì)胞粘附力最大,大概在750 nN左右,隨著細(xì)胞單細(xì)胞層的稀疏,細(xì)胞粘附力有所下降,而處于細(xì)胞層頂部的細(xì)胞粘附力最低僅為50 nN左右。這一點充分說明上皮細(xì)胞能夠在細(xì)胞之間形成緊密的連接,而處于細(xì)胞層外的細(xì)胞則幾乎沒有粘附力。而對于HeLa這樣的腫瘤細(xì)胞測量的結(jié)果卻顯示出了截然不同的結(jié)果,處于不同狀態(tài)的細(xì)胞有著近似的粘附力,基本都在200 nN左右,這與處于單個游離上皮細(xì)胞的粘附力十分接近,表明HeLa細(xì)胞在不同環(huán)境下仍然具有較高遷徙能力。使用FluidFM對不同區(qū)域細(xì)胞的FD曲線測定結(jié)果和對比        通過對這兩種細(xì)胞的最大粘附力、最大粘附能量、最大拉伸距離和細(xì)胞接觸面積進(jìn)行統(tǒng)計分析可以發(fā)現(xiàn),HeLa腫瘤細(xì)胞在粘附力和粘附能量上均有所降低,但是當(dāng)HeLa細(xì)胞形成了單層后,兩者區(qū)別不大。對比Hela和Vero在不同生長狀態(tài)下的最大粘附力、最大粘附能量、粘附拉伸距離和粘附面積。再進(jìn)一步對Vero與HeLa細(xì)胞最大粘附力與距離和接觸面積進(jìn)行對比,依然可以得到與單獨比較粘附力相同的結(jié)果,并且最大能量與細(xì)胞接觸面積的比值中也存在著類似的結(jié)果。由此可見腫瘤細(xì)胞通過降低自身粘附力從而獲得了更好的遷移能力。對不同狀態(tài)Vero和A549之間的粘附力/粘附距離、粘附力/粘附面積、粘附能量/粘附面積 總結(jié)       細(xì)胞粘附力測定在細(xì)胞生命科學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用,然而傳統(tǒng)手段中有著各種各樣的局限性,主要原因是缺乏一種有效抓取細(xì)胞并進(jìn)行力學(xué)測定的手段。現(xiàn)如今FluidFM技術(shù)在細(xì)胞粘附力測定中的應(yīng)用,使得研究者們有了一種能夠有效、低損的方式抓取細(xì)胞,配合原子力顯微鏡精確測量的特性,真正意義上做到精準(zhǔn)、無損、快速的測量單細(xì)胞粘附力,幫助研究者尋找細(xì)胞粘附力與細(xì)胞生命發(fā)展、腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系。 【參考文獻(xiàn)】[1] A. Sancho, M. B. Taskin, L. Wistlich, P. Stahlhut, K. Wittmann, A. Rossi & J. Groll. Cell Adhesion Assessment Reveals a Higher Force per Contact Area on Fibrous Structures Compared to Flat Surfaces. ACS Biomater. Sci. Eng. 2022, 8, 2, 649–658.[2] P.W. Doll, K. Doll, A. Winkel, R. Thelen, R. Ahrens, M. Stiesch & A.E. Guber. Influence of the Available Surface Area and Cell Elasticity on Bacterial Adhesion Forces on Highly Ordered Silicon Nanopillars. ACS Omega. 2022, 7, 21, 17620–17631.[3] Sankaran, S. Jaatinen, L. Brinkmann, J. Zambelli, T. V?r?s, J. Jonkheijm, P. Cell adhesion on dynamic supramolecular surfaces probed by fluid force microscopy-based single-cell force spectroscopy. ACS Nano 2017, 11, 3867–3874.[4] Sancho, A. Vandersmissen, I. Craps, S. Luttun, A. Groll, J. A new strategy to measure intercellular adhesion forces in mature cell-cell contacts. Sci. Rep. 2017, 7, 46152.[5] Ines, Lüchtefeld. Alice, Bartolozzi. Julián M. M. Oana, Dobre. Michele, Basso. Tomaso, Zambelli. Massimo, Vassalli. Elasticity spectra as a tool to investigate actin cortex mechanics. J Nanobiotechnol. 2020, 18, 147.[6] Dehullu, J. Valotteau, C. Herman-Bausier, P. Garcia-Sherman, M. Mittelviefhaus, M. Vorholt, J. A. Lipke, P. N. Dufrene, Y. F. Fluidic force microscopy demonstrates that homophilic adhesion by Candida albicans Als proteins is mediated by amyloid bonds between cells. Nano Lett. 2019, 19, 3846–3853.[7] Mittelviefhaus, M. Müller, D. B. Zambelli, T. Vorholt, J. A. A modular atomic force microscopy approach reveals a large range of hydrophobic adhesion forces among bacterial members of the leaf microbiota. ISME J. 2019, 13, 1878–1882.[8] F. Weigl, C. Blum, A. Sancho & J. Groll. Correlative Analysis of Intra- versus Extracellular Cell Detachment Events vis the Alignment of Optical Imaging and Detachment Force Quantification. Adv. Mater. Technol. 2022, 2200195.【相關(guān)產(chǎn)品】  多功能單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)- FluidFM OMNIUM:http://www.ghhbs.com.cn/zt2203/product_386418.html
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2022-07-04 17:35:41高通量冷凍研磨儀對樣品前處理時如何選擇研磨珠?
  研磨珠對樣品研磨來說是不可或缺的一類耗材應(yīng)用,但對磨珠的選擇也切不可忽視。由于磨球的直徑、材質(zhì)等不同,對樣品的研磨效果也有不同,因此在樣品前處理實,對磨球的選擇還是很重要的。  高通量冷凍研磨儀在被應(yīng)用研磨時,其對研磨珠和樣品的準(zhǔn)備通常在5:1左右,磨球和試品的體積不能超過球磨罐體積的百分之80,通常在百分之40到百分之60之間較佳。    在選擇應(yīng)用磨球時,通常會根據(jù)磨球的直徑來進(jìn)行選擇;當(dāng)磨球的直徑3mm到40mm的范圍內(nèi)去選擇。通常,研磨珠通過直徑大小可分為大、中、小三個規(guī)格的磨球,大磨球可產(chǎn)生更大的動能,使樣品可迅速破碎,小磨球可提高樣品研磨的密度和一致性。    在樣品前處理過程中,不僅要選擇球磨罐的應(yīng)用,還要選擇研磨珠的應(yīng)用,但不同材料的球磨罐匹配的磨球也不同。在使用聚氨酯材料的球磨罐時,是可以與瑪瑙磨球、氧化鋯、氧化鋁等磨球一起使用;在使用聚合物聚乙烯球磨罐時,是可與氧化鋁、氧化鋯和瑪瑙磨球一起應(yīng)用;在使用聚四氟乙烯球磨罐時,是可與氧化鋯、氧化鋁、瑪瑙磨球一起應(yīng)用;在使用聚丙烯球磨罐時,是可與氧化鋯、瑪瑙磨球、氧化鋁等一起應(yīng)用;在使用尼龍球磨罐時,是可與不銹鋼板、氧化鋯、氧化鋁、瑪瑙磨球等一起研磨應(yīng)用的。  在使用高通量冷凍研磨儀開展樣品的研磨實驗時,不但要牢記掌握研磨機(jī)的使用技巧,還要能夠正確的選擇出所需應(yīng)用的耗材等,使用不同直徑大小的磨球或不同規(guī)格的磨球,對樣品的研磨處理效果都會不相一致,甚至有時還會影響到樣品的研磨效果,所以對磨球的正確選擇是很重要的一個選擇應(yīng)用哦!
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2022-01-18 14:24:50瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒
瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒Prestained Agarose Gel Electrophoresis Kit產(chǎn)品特點及優(yōu)勢:本產(chǎn)品是用于核酸電泳的試劑盒,具有以下特點及優(yōu)勢:1. 省事:您不用再四處采購瓊脂糖、核酸染料、電泳液和 loading buffer 等試劑,一個試劑盒全部解決。2. 省時:為您省去了您親自制膠的繁瑣,為您省出一個小時左右的實驗時間。3. 省力:瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠采用特制安全可靠的核酸染料預(yù)染,電泳過程無需電泳液染色或后染色,簡捷方便,即開即用。4. 省心:用本產(chǎn)品電泳得到的 DNA 片段進(jìn)行膠回收,不影響后續(xù)的 DNA 連接等反應(yīng)。5. 兼容:瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠為 TAE 體系,與實驗室常規(guī)自制的 TAE 瓊脂糖膠完全一致,使用完美銜接,您只需要用您之前的 TAE 電壓電泳即可。貨號及成分1. 瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠 10 塊,規(guī)格:8 孔,每孔上樣量:25μl,您有六個固定濃度可選,對應(yīng)貨號見下表:當(dāng)然,您也可以同您的供貨商溝通定制您需要的其他濃度!2. 6×DNA Loading Buffer 一支,貨號:10052,規(guī)格:500μl。6×DNA Loading Buffer 用于瓊脂糖凝膠電泳前 DNA 樣本的處理,使用時將 1 倍體積的 6×DNA Loading Buffer 與 5 倍體積的 DNA 樣品混合均勻后上樣。緩沖液組分經(jīng)過優(yōu)化,其中的染料溶液包括指示劑溴酚藍(lán)和二甲苯青 FF,電泳時可肉眼監(jiān)控 DNA 的遷移。甘油確保樣本在點樣孔底部聚集;EDTA 結(jié)合二價金屬離子并抑制金屬離子依賴性核酸酶。在 1%的瓊脂糖凝膠中,溴酚藍(lán)的遷移率與 300bp 的雙鏈線性 DNA 片段大致相同,二甲苯青 FF 的遷移率與 4000bp 的雙鏈線性 DNA 片段大致相同。3. TAE 電泳液一瓶,貨號:1060,規(guī)格:60ml/瓶。TAE 是廣泛使用的核酸電泳緩沖液,主要成分是 Tris-乙酸鹽和 EDTA。DNA 分子在高于等電點的緩沖液中帶負(fù)電,向正極移動。TAE 緩沖液常用于基因組 DNA、大分子超螺旋 DNA、擴(kuò)增DNA 片段電泳分離,電泳大于 13kb 的片段時用 TAE 緩沖液將取得更好的分離效果。貨 號10088 10108 10128 10158 10188 10208濃度0.8% 1.0% 1.2% 1.5% 1.8% 2.0% MYDEER 使用手冊運(yùn)輸及保存:瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒的小黑盒需要 4℃保存和運(yùn)輸,有效期 12 個月。6×DNA Loading Buffer 可以短時間 4℃運(yùn)輸,長期需要-20℃保存,有效期 12 個月。TAE 電泳液需要常溫運(yùn)輸和保存,有效期 24 個月。自備試劑:核酸樣品、Marker、去離子水使用方法:1. 在低溫條件下 TAE 電泳液會有沉淀物析出,請 37℃水浴溶解并搖晃均勻后使用,不影響使用效果。用去離子水稀釋 50 倍(1 mL 本產(chǎn)品加 49 mL 去離子水),用作電泳液,倒入電泳槽中,電泳液以沒過膠面 1mm 為宜。2. 取出一塊獨立包裝的瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠,撕掉表面的塑料膜,反轉(zhuǎn)包裝,用兩手的食指和中指托住塑料殼邊緣,開口向下沒入電泳液中,然后用兩個大拇指輕輕按壓塑料殼背面中心部分,瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠就會落入電泳液中,此時的預(yù)制膠帶孔面向上,移動膠塊,使孔側(cè)端靠近電泳槽負(fù)極。如樣品孔內(nèi)有氣泡,應(yīng)設(shè)法除去。3. 在 DNA 樣品中加入 6×DNA loading buffer,混勻后,用移液器將樣品混合液緩慢加入被浸沒的凝膠加樣孔內(nèi),同時加入您自己準(zhǔn)備的 Marker。4. 接通電源,紅色為正極,黑色為負(fù)極,切記 DNA 樣品由負(fù)極往正極泳動 (靠近加樣孔的一端為負(fù))。5. 根據(jù)指示劑泳動的位置,判斷是否終止電泳。6. 電泳完畢,關(guān)閉電源,用凝膠成像儀觀察電泳條帶及其位置,與 Marker 比較擴(kuò)增產(chǎn)物的大小。電泳膠圖:100bp 2% 2000bp 1% 1kb 1%TAE 系列 80v 60min
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