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2025-01-21 09:32:41損害鑒定評估
損害鑒定評估是對受損財產或權益進行專業評估的過程,以確定損害的程度、原因及價值。它涉及多個領域,如環境監測、建筑安全、資產評估等,旨在通過科學的方法和手段,為后續的賠償、修復或法律訴訟提供依據。損害鑒定評估通常由專業機構或專家進行,確保評估結果的客觀性和準確性。這一過程對于維護公平正義、保障當事人權益具有重要意義。

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2023-02-15 14:27:47腫瘤疫苗生物學活性評估
腫瘤疫苗背景腫瘤疫苗,是一種具有預防和治 療潛力的有吸引力的替代免疫治 療選擇,是近年研究的熱點之一。針對腫瘤相關抗原(Tumor-associated antigen,TAA)或腫瘤特異性抗原 (Tumor specific antigen,TSA) 的疫苗可以特異性地攻擊和破壞抗原過表達的惡性細胞,并由于免疫記憶而實現慢性治 療反應。因此,與其他免疫療法相比,癌癥疫苗提供了特異性、安全性和可耐受的治 療。根據腫瘤抗原的組分,癌癥疫苗大致可以分為四種類型:基于 DNA 的疫苗,基于 RNA 的疫苗,基于多肽的疫苗和基于免疫細胞的疫苗。FDA 批準的首 個個性化腫瘤疫苗 PROVENGE (Sipuleucel-T) 是一種基于免疫細胞的疫苗,用于激素難治性前列腺癌的治 療。除此之外,Moderna,BioNTech 都在布局基于 mRNA 的腫瘤疫苗。圖 1 腫瘤疫苗抗原呈遞平臺示意圖腫瘤疫苗有效性評估方法生物體接種疫苗后,腫瘤抗原被帶到淋巴結,進而激活抗原特異性的 B 細胞和 T 細胞,活化的 B 細胞產生的抗體及活化的效應 T 細胞會使腫瘤內脹并誘導腫瘤細胞死亡。圖 2 腫瘤疫苗誘導的免疫反應示意圖如何有效的評估腫瘤疫苗的有效性是一個非常值得探討的問題,常用的腫瘤疫苗有效性驗證的方法,包括細胞因子檢測、CTL 活性檢測、T 細胞活化標志物檢測、抗體滴度檢測、ADCC 檢測等。1、細胞因子檢測細胞因子是由免疫細胞經過刺激而合成并分泌的小分子蛋白質,在免疫應答中起著非常重要的作用,因此可以通過細胞因子的分泌能力來反應疫苗誘導的細胞免疫的水平。常見的細胞因子有白介素 (IL) 、干擾素 (IFN)、 腫瘤壞死因子 (TNF) 等。下面比較了幾種常見的檢測方法。ELISA 是一種非常經典的細胞因子的檢測方法,例如在王曉東等人發表的關于胃癌疫苗研究的文章中,提到了用 ELISA 的方法檢測接種疫苗后小鼠骨 髓源樹突狀細胞(BMDCs)分泌細胞因子的能力,檢測方法如下:BMDCs 在含有 10ng/mL GM-CSF 和 10ng/mL IL-4 的 X-vivo 15 培養基中培養,37℃下培養 6 天,然后以每孔 5×104 細胞的密度在 96 孔板中接種。以 5μM 或 10μM 的最 終濃度加入疫苗抗原,孵育 24 小時。使用小鼠 TNF-α 和 IL-12 p70 ELISA Ready-SET-Go 試劑組定量培養上清中的 TNF-α 和 IL-12 。首先在 4℃下用捕獲抗體包被 ELISA 板過夜,然后在室溫下依次加入阻斷液、細胞培養上清和檢測抗體,孵育 1h 。 最 后加入終止液和顯色劑,用酶標儀 (BioTek) 在 450nm 處記錄 OD 值。檢測結果如下:從檢測結果可以看出,T7(TLR7 激動劑)的存在可以顯著提升 ML/MB 抗原誘導的免疫反應。圖 3 ELISA 法測定小鼠骨 髓樹突狀細胞 (BMDCs) 分泌TNF-α (a) 和 IL-12 (b) 的水平Ankita Leekha 等人發表的關于 SRAS-COV2 疫苗文章中,提到了用 ELISPOT 的方法評估細胞因子的分泌水平,可以作為參考。具體方法如下:從小鼠中分離脾細胞和肺細胞,使用小鼠 IFNγ ELISpot 基礎試劑盒和小鼠 IL4 ELISpot 基礎試劑盒 (Mabtech, VA, USA) 進行 IFNγ 和 IL4 ELISpot 檢測。在 37℃ 下,在預包被抗體的 ELISpot 板中,用抗原刺激脾細胞和肺細胞,培養 16-18 小時。第二天,洗掉細胞,加入生物素化的檢測抗體。洗板后,加入 1:30000 稀釋的 Extravidi-ALP 偶聯物,室溫孵育 1 小時。洗板后,每孔添加 70μL 顯色液,孵育 20-30min,形成斑點,然后用水清洗,干燥。使用 Cytation 7 (BioTek) 對斑點進行量化。每個點對應一個單獨的細胞因子分泌細胞。檢測結果如下:圖 4 ELIPSOT 方法檢測小鼠脾細胞和肺細胞分泌細胞因子的水平2、CTL 活性檢測疫苗誘導的細胞毒性 T 淋巴細胞 (CTL) 可以直接殺傷腫瘤細胞,起到抗腫瘤的作用,因此可以通過檢測 CTL 的殺傷效應來反應疫苗的效果。常用的檢測細殺傷效應的方法有很多,下表列舉了一些常用的方法。王曉東等人發表的文章中提到了 LDH 檢測,檢測方法如下:從接種疫苗小鼠的脾 臟中分離淋巴細胞(效應細胞)。EAC 腫瘤細胞(靶細胞)與淋巴細胞(效應細胞-靶細胞比例為 50:1)共培養 4h,使用乳酸脫氫 (LDH) 法測定細胞毒性。將培養 4h 后的培養上清加入在 ELISA 板中,室溫下加入底物溶液,孵育 30min。最 后,加入終止液終止反應,并用酶標儀 (BioTek) 在 490nm 處檢測光密度。檢測結果如下:相對于 PBS 對照組來說,T7-MB 組 CTL 細胞具有顯著的殺傷效應。圖 5 LDH 法測定 CTL 介導的 EAC 靶細胞的裂解水平3、抗體滴度及親和力檢測腫瘤疫苗除了可以誘導細胞免疫之外,也可誘導體液免疫,對此可通過對抗體滴度及親和力進行檢測來反應疫苗抗腫瘤的效果,ELISA 是一種非常經典的檢測方法。上述關于胃癌疫苗的文章中通過 ELISA 方法測定小鼠接種疫苗后血清中總 IgG 含量,具體檢測過程如下:小鼠接種疫苗后收集血液樣本,通過 3000g 離心 15 分鐘獲得血清樣本。ELISA 板預先在 4℃ 包被 BSA-MG1 過夜,然后在室溫下依次加載封閉溶液 2h,血清樣品 (1:50 稀釋) 和檢測抗體 1h。最 后,在體系中加入 p-NPP 底物 (Millipore) 和終止液,用酶標儀 (BioTek) 在 405nm 處記錄 OD 值。檢測結果如下:相對于 PBS 對照組來說,T7-MB 組抗體含量明顯上升。圖6 ELISA法測定疫苗誘導的血清抗體水平除此之外,在 Emily C. Gale 等人發表的關于 mRNA 遞送系統及輔劑研究的文章中,通過 ELISA 的方法測定了 mRNA OVA 模式疫苗誘導的 OVA 特異性抗體的絕 對含量及其親和力。具體檢測方法如下:抗體濃度:小鼠接種加強疫苗后,采集血液樣品,血清按照 1:100 000 進行稀釋。采用 anti-OVA mouse IgG1 ELISA (Cayman Chemicals) 試劑,按照試劑廠家的說明進行 ELISA 實驗。使用 Synergy H1 Microplate Reader (BioTek) 在 450nm 處記錄 OD 值。根據標準曲線計算血清抗體濃度,表示 mg/mL。抗體親和性:將 12 個梯度稀釋的血清與恒定濃度標記 HRP 的 anti-OVA 抗體 (3nM) 混合,并在 OVA 抗原包被的板中室溫孵育 2 小時,洗板后用 TMB 底物孵育,用 HCl 停止反應。測定 450nm 處的 OD 值。根據業內發現的單克隆抗體的共同親和力,假設對照抗體的 KD 為 1nM 對實驗組的 KD 值進行統計。這一假設僅影響報告的絕 對 KD 值,而不影響實驗組之間的相對差異。檢測結果如下:pIC 為雙鏈 RNA 結構模擬物,圖E中比較了可溶性的 pIC 和不同納米顆粒遞送系統誘導的絕 對抗體含量,從圖 E 中可以看出 2B 遞送系統誘導的 OVA 特異性抗體含量最 高。從F和G可以看出 2B 遞送系統相對于可溶性 pIC 來說誘導的 IgG 親和力也顯著升高。圖 7 pIC/PBAE NPs 增強體液免疫4、ADCC 檢測疫苗誘導體液免疫產生的抗體能夠捕捉目標抗原,阻斷這個靶分子的功能,也可以引導其他免疫細胞(如巨噬細胞和自然殺傷細胞)殺死表達抗原的靶細胞,在腫瘤治 療中,特別是血液腫瘤中,抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用 (ADCC) 起著關鍵作用,ADCC 常用的檢測方法包括細胞活力檢測、LDH 檢測、工程細胞株、Delfia、RTCA、細胞成像檢測等。王曉東等人發表的關于胃癌疫苗研究的文章中,提到了 LDH 方法檢測 ADCC,檢測方法如下:小鼠接種疫苗后,采集其血清樣本(1:25 稀釋),然后與 EAC 細胞(靶細胞)在 37°C 孵育 30min。使用小鼠 NK 細胞分離試劑盒從正常 BALB/c 小鼠中分離出自然殺傷 (NK) 細胞(效應細胞),與抗體標記的 EAC 細胞以效靶比 50:1 共培養 4 小時。采用 LDH 法 (Promega) 測定細胞毒性,檢測方法與之前提到的 CTL 活性檢測的方法一致。檢測結果如下:相對于 PBS 對照組來說,T7-MB 組產生的抗體具有顯著的殺傷效應。圖 8 LDH 法測定血清抗體介導的 EAC 靶細胞的裂解水平腫瘤疫苗生物學活性檢測解決方案推薦本文介紹了腫瘤疫苗活性檢測的常用方法,包括細胞因子檢測、CTL 活性檢測、抗體滴度及親和力檢測、ADCC 檢測等方法,涉及到了酶標儀、成像系統、流式、RTCA、洗板分液系統等設備。Agilent 細胞分析事業部可以從多個角度為用戶提供從樣品處理,到結果檢測再到數據分析的全面解決方案。
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2024-12-30 13:15:11有機質譜儀鑒定標準有哪些
有機質譜儀鑒定標準有哪些? 有機質譜儀廣泛應用于化學分析、藥物研發、環境檢測等領域,因其度高、分辨率強,能夠有效鑒定復雜有機分子的結構和成分。為確保質譜儀在實際應用中的可靠性與精確性,必須遵循一定的鑒定標準。本文將介紹有機質譜儀在鑒定過程中所需遵循的標準,以及這些標準在確保分析結果性和有效性中的關鍵作用。 1. 標準化操作流程 規范的操作流程是確保有機質譜儀鑒定標準的基礎。操作人員必須嚴格按照設備制造商提供的操作手冊進行操作,確保儀器的調試、校準、樣品處理等步驟符合標準化要求。在每一次分析之前,必須對質譜儀進行常規檢查與校準,以避免因儀器偏差導致的分析誤差。操作環境也需符合質譜分析的要求,例如溫度、濕度、氣壓等,確保這些外部因素不會影響儀器的穩定性與檢測精度。 2. 校準標準 有機質譜儀的校準是保證鑒定精度的關鍵環節。根據不同的應用需求,校準標準可能包括質量標準、濃度標準和分辨率標準等。通常,質譜儀通過使用已知分子量的標準物質(如質譜標準物質、校準液等)進行校準。這些標準物質的選擇需要滿足一定的質量要求,并且在規定的時間內進行驗證。對于復雜的有機分子分析,校準過程中還應涵蓋不同質量范圍的標定物,以確保儀器在不同質量區間內均能保持較高的準確性。 3. 精確度與重復性標準 精確度和重復性是有機質譜儀分析結果的重要指標。國際上,許多標準組織(如ISO、ASTM等)為有機質譜儀提供了精確度和重復性方面的要求。這些標準規定了儀器的測量誤差應在一個合理的范圍內,并要求相同樣品在重復測試中得到一致的分析結果。為了確保精確度,操作人員必須嚴格控制樣品的處理過程,避免外部污染因素干擾。儀器也需要定期進行性能驗證和維護,確保其長期穩定運行。 4. 數據處理與報告標準 在有機質譜分析中,數據處理與報告也是非常重要的一環。數據處理應遵循國際通用的標準方法,確保數據的可比性和可重復性。分析結果不僅要提供定性分析,還要給出定量結果,并附帶一定的誤差范圍。質譜報告的格式和內容也應符合標準要求,確保其具有清晰的可讀性和專業性。數據存儲應符合相應的數據管理標準,便于追溯和復核。 5. 儀器性能驗證與質量控制 除了操作和數據處理標準外,有機質譜儀的性能驗證和質量控制同樣是不可忽視的標準。在質譜儀的使用過程中,必須定期進行質量控制與性能驗證。例如,使用標準物質進行性能評估、檢查儀器的靈敏度、分辨率、線性范圍等性能指標,確保儀器始終處于佳工作狀態。儀器制造商和實驗室應當建立完善的質量管理體系,定期進行校驗、維修和升級,確保儀器符合行業標準并保持其高效穩定運行。 結語 有機質譜儀的鑒定標準不僅關系到分析結果的準確性,還直接影響到研究與應用的可靠性。遵循標準化操作流程、嚴格執行儀器校準、保障數據處理的精確性和可追溯性,是確保質譜分析有效性的重要措施。只有在嚴格遵循這些標準的基礎上,才能在不同領域中得到高質量、可靠的分析結果。作為專業的實驗室操作人員和研究人員,必須時刻保持對質譜儀標準的高度關注,確保每一次分析都能達到預期的科研或應用目標。
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2025-01-21 12:00:12瀝青含量測試儀如何鑒定
瀝青含量測試儀是用于測定瀝青混合料中瀝青含量的重要設備。在道路建設和維護領域,準確的瀝青含量測試是確保道路質量、耐久性和安全性的關鍵因素。本文將介紹瀝青含量測試儀的工作原理、常見的測試方法及其在道路建設中的重要作用,幫助讀者更好地理解如何使用這些儀器進行準確的瀝青含量鑒定,并提高相關測試的精確度。 瀝青含量測試儀的主要功能是通過分析瀝青混合料的成分來確定其中瀝青的比例,通常采用的測試方法包括溶劑法、燒失法、紅外法等。其中,溶劑法通過化學溶劑的溶解作用將瀝青提取出來,而燒失法則是通過高溫焚燒使瀝青揮發,剩余的物質可用于計算瀝青含量。紅外法則通過高精度紅外線分析設備,地測量瀝青的含量。這些方法各有優劣,使用時要根據實際情況進行選擇。 在瀝青混合料的生產和質量控制過程中,瀝青含量的測試是至關重要的。過低的瀝青含量會影響混合料的粘結性,從而影響道路的抗壓、抗裂性能;而過高的瀝青含量則可能導致材料的浪費及其他性能不達標。瀝青含量測試儀正是為了確保每一批次混合料的瀝青比例符合設計要求,從而保障道路工程的質量。 瀝青含量測試儀的精確性對工程質量有著直接的影響,只有通過準確的測試結果,才能確保瀝青混合料在使用過程中達到佳的性能表現。因此,了解不同測試方法的優缺點,并選擇適合的測試儀器,才能有效地提高道路工程的施工質量和耐用性。
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2023-06-05 14:10:12鑒定鴿子公母設備有哪些?鴿子性別鑒定儀器是什么?
【TH-GZ01】鑒定鴿子公母設備有哪些?鴿子性別鑒定儀器是什么? 鑒定鴿子公母的設備是天合環境生產的,針對于如何能夠快速針對于鴿子的性別做出檢測,對于養殖場和繁育場來說都是非常重要的,鑒別公母對于新手來說是一個充滿了挑戰的工作。 鴿子性別鑒別儀是實時檢測反應的儀器,主要由基因擴增熱循環組件、微量熒光檢測光學系統、微電路控制系統、計算機及應用軟件組成。操作簡單,可無創鑒別鴿子性別,準確率達到99.9%。  儀器特點  1.體積小,重量輕,易于攜帶。輕松滿足外出實驗的需求。  2.內置10寸高清電容屏PDA,觸屏操作,簡便快捷。  3.Marlow高品質Peltier制冷片,結合德國高端PT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補償邊緣的溫度控制模式,最大升溫速度7℃,最大降溫速度5℃,大大縮短實驗時間。  4.支持恒溫、熒光定量雙模式,適配市面上所有的恒溫PCR試劑盒和熒光定量PCR試劑盒,功能強大一臺頂兩臺  5.整板3s快速采光模式,保證實驗結果孔位一致性。  6.簡潔直觀的軟件引導,輕松開啟檢測實驗。  7.支持儀器自帶系統和電腦系統雙系統操作,適合各種使用習慣和模式。  技術參數  樣品容量:16x0.2ml、支持8聯管  適用耗材:常見透明PCR耗材,8x0.2ml排管,0.2ml單管  反應體系:5-120ul反應模式體系  加熱/制冷模塊:高性能進口半導體熱電模塊  溫度控制范圍:4°C-99℃  熱蓋溫度:30℃-108℃(默認105℃,熱蓋溫度可調)  升溫速率:3.5℃/s(MAX)  降溫速率:2.5℃/s(MAX)  溫控精度:±0.1°C  溫度均勻性:±0.25°C  溫度準確度:±0.1℃  溫控區域數量:多點(2點)  梯度數:0個  梯度溫度范圍:無  梯度孔數:無  激發光源:大功率LED(免維護,壽命長)  激發光波長范圍:400-700nm  檢測部件:進口高靈敏度光電傳感器  激發和檢測傳播介質:耐高溫專業導光光纖  檢測通道數:標配2通道(FAM/VIC)  適用染料和探針:FAM,SYBR Green  HEX,JOE,VIC  軟件功能:具多重qPCR數據分析功能,可同時檢測2個檢測通道  擴增曲線,  標準曲線定量、  熔解曲線、  支持HRM檢測  數據導出:可將實驗結果以圖形和表格的形式直接導出;詳細的數據報告內容包括實驗條件,數據坐標和表格,數據分析參數。  數據格式:XLS,PDF,DOCX  噪音:<45 dB  屏幕尺寸:10英寸(HD)  觸摸屏:電容式  外接USB:支持數據導入導出  熱蓋:自動壓力調節
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2022-10-31 14:14:47嚙齒類動物的外周神經損傷如何評估?
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創新孵化基地
重大技術裝備
微量鈾測量裝置
在線校準規范
監測技術規程
汽車側滑檢驗臺
多天線系統
能力驗證項目
機床企業轉型
實驗班安全
量子精密測量技術領域
職業技能提升
智慧物流裝備
間接視野裝置
鍋爐氮氧化物
工業通信業
就地高純鍺譜儀
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氣象用溫濕度檢定箱
電壓暫降抗擾度測試
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