- 2025-01-21 09:32:06普通氨基酸
- 普通氨基酸是構成蛋白質的基本單位，具有氨基和羧基官能團。它們在生物體中發揮著至關重要的作用，參與蛋白質合成、能量代謝、信號傳導等多種生物過程。普通氨基酸種類繁多，根據側鏈（R基）的不同可分為不同類型，如甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸等。這些氨基酸在人體中有的可自身合成，稱為非必需氨基酸；有的則必須從食物中攝取，稱為必需氨基酸。它們在維持生命活動、促進生長發育等方面具有重要意義。
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普通氨基酸問答
- 2017-09-11 19:56:26復合氨基酸和普通氨基酸片有什么區別？
- 復合氨基酸和普通氨基酸片有什么區別？ 我想利用它來，哪中比較好？？？
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- 2022-04-18 09:18:05普通氣體發生器的介紹
- 下面僅就市場上常用的三種氣相色譜儀的氣體發生器（氫氣發生器、氮氣發生器、空氣泵）的結構、特點做簡單的分析。 一． 氣體發生器的干燥過濾裝置 下面談談氣體發生器上的干燥過濾器，無論是分體的發生器還是組合的發生器，都需要對輸出的氣體進行干燥凈化，即除濕除烴（或者除油）等。現有的除濕除烴方法基本都采用吸附劑吸附法，吸附劑大體都采用變色硅膠、分子篩和活性炭。由于使用變色硅膠除濕，需要定期觀察硅膠的變色程度，采用透明的有機玻璃材料或者工程塑料成為優選，不銹鋼管由于不能隨時觀察硅膠的顏色不太適用。過濾管的安裝樣式1）吊裝式：凈化管的進氣口和出氣口都在儀器上部，出管口向下，從電解分離池或者壓縮機過來的氣體首先從固定蓋中間內突起的進氣口向下通過內襯芯管進入干燥劑底部，然后經過吸附劑的過濾后再從向上返回到固定蓋周邊的出氣口，從而保證氣體經過有效的過濾后再輸出。2） 立裝式：凈化管的進氣口和出氣口都在儀器底部,開口向上。此方法有兩種:a凈化管內加襯管,吸附劑裝入襯管內,氣體先經吸附劑吸附后再經凈化管與襯管中間的縫隙到凈化管底部輸出, 此,方法由于受結構及加工工藝的影響,襯管不易從凈化管內取出,甚者氣體受吸附劑阻力的影響而不流經吸附劑，造成未過濾的氣體直接輸出，影響色譜的正常使用;b凈化管內加導管吸附劑裝入凈化管內,氣體先經吸附劑吸附后再經導管輸出,此方法多為不銹鋼管采用,但不銹鋼管為不透明不便于用戶直接觀察吸附劑的變化;不方便使用。由于受工作原理的限制，氮氣發生器和氫氣發生器電解分離池出來的氣體濕度都比較大，當氣體經電解分離池后或多或少都會有水汽凝結成水珠、采用立裝式固定凈化管，液滴由于重力的作用，會在更換過濾器時滴入出氣口，進入色譜儀的管道，造成管路系統的污染。吊裝式避免了以上的問題。我單位現有的凈化管完全采用吊裝方式。有些廠家為了降低電解分離池輸出氣體的濕度，在電解池和凈化管之間加裝了汽水分離器，由于分離器內的過濾材料多為燒結的粉末金屬材料，電解分離池輸出的未干燥氣體為堿性氣體，堿性氣體會腐蝕分離器內粉末金屬材料甚至造成堵塞，影響發生器的正常使用，極端情況可能會由于堵塞造成壓力過高引起爆炸，希望用戶使用時一定注意。二、 高純氫發生器目前市場上為氣相色譜配套的氫氣發生器按電解膜材料分主要有堿石棉膜、離子膜、鈀金屬膜三種。堿石棉膜價格低廉、使用方便、便于維護；離子膜價格稍高、且目前國內此項技術不太成熟、同時離子膜對電解水質要求較高，水的電導率不高時會產生離子膜“中毒”現象，更換離子膜的費用也比較高。鈀金屬膜制氫價格高、以300ML/min的輸出量計算，價格大約在4萬元左右。若使用不當、會使鈀金屬表面氧化，造成電解率下降，影響正常的使用。 三、 空氣泵目前市場上為氣相色譜儀配套的空氣泵，其壓縮機主要以冰箱壓縮機為主，另外就是采用擺動活塞式的壓縮機，擺動活塞式壓縮機又分為進口和國產。冰箱壓縮機價格低廉、但是壓縮后的氣體含油，所以需要經過活性炭脫油。另外由于冰箱壓縮機一般需要閉環運行。但是在色譜儀空氣泵上使用時，是開環使用，這樣當空氣輸出流量很大時，潤滑油隨工作溫度的升高蒸發很快，壓縮機會由于缺少潤滑油而損壞。擺動活塞式壓縮機的活塞是無油潤滑，產氣量大，即使系統出現漏氣也不會造成壓縮機的損壞，抗誤操作的能力強。通過合理安裝可以降低其工作噪音（55dba）。工作的可靠性大大高于冰箱壓縮機式的空氣泵。 四 、氮氣發生器 氮氣發生器從制氮原理上來分有中空纖維膜分離法、變壓吸附法、電化學分離法三種。1）中空纖維膜分離法：氮氣純度99.999%，流量范圍為0-10升/min。2）變壓吸附法：氮氣純度99.999%，流量范圍為0-10升/min。3） 電化學分離法：氮氣流量在0.3-0.5L/min, 氧含量可以控制在幾個ppm， 氣體露點根據吸附劑效能可以達到-55℃。目前國內配套氣相色譜儀的氮氣發生器主要是該類型的。電化學分離法的氮氣來自于在電解分離池, 空氣中的雜質氣體經過電解分離池后, 在電解液和貴金屬及電場作用下被分離。電解分離池內電解液主要為KOH或NaOH與蒸餾水配制而成, 一些廠家為了節省制造成本，選用低價格的不銹鋼（貴金屬的含量極低）， 因而使電解分離池在強堿液及電場的作用下極易損壞，降低了氮氣的純度，影響到儀器的正常使用。電化學分離法制造氮氣還要求整個氣液系統有完善的自動控制功能，否則在突然斷電停機時，電解分離池內沒有電場的作用，空氣不能被分離，輸出將的是大量的空氣，如果不能及時的關閉氮氣輸出，大量的空氣直接進入色譜柱將造成色譜柱提前損壞。所以在氮氣輸出氣路中增加斷電保護切換閥是必須的。 目前市場上的氮氣發生器一般都具有啟動后延時排空的功能，即氮氣發生器在剛剛開機的10分鐘內，由于氣體純度低及管路系統內有空氣，所以需要把輸出的氣體排空到大氣。排空氣體的流量控制，大多數廠家都采用在排空閥出口加固定氣阻，這種方法在排空的過程中，可以控制輸出的氣體流量，但是排空結束，氮氣切換到色譜氣路中時，由于輸出的氮氣要很快在連接的管路內建立壓力，所以會使氮氣發生器輸出流量很快增大，電解分離池在短時間內來不急分離空氣，從而使大量的沒有分離過的空氣直接進入色譜系統，造成色譜柱損壞或者脫氧管很快失效。一些廠家在排空口前增加針型閥來限流，這種方法hui出現另外的問題，當氮氣系統從排空切換到正常供氣狀態時，由于色譜儀的柱頭壓力逐漸上升穩定后，針型閥的輸出流量會慢慢變小，如果要想得到正常的流量需要再次調節針型閥通徑，這樣會使穩定的高純度氮氣系統再次被污染。要想的到高純度而又穩定的氮氣除克服上述問題，還須克服電解分離池的堵塞和返液現象。
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- 2022-08-17 10:08:59普通PCR引物 VS qPCR 引物
- 導讀說起引物，大家都再熟悉不過了。引物，在核苷酸聚合作用的起始時，可以刺激合成另一種大分子，并與反應物以共價鍵形式連接的序列。在核酸化學中，引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段，可結合在核酸鏈上與之互補的區域，其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點，核酸聚合酶可由其3′端開始合成新的核酸鏈。無論是做普通PCR還是熒光定量PCR，設計合適的引物是非常關鍵的一步。普通PCR和熒光定量PCR的檢測方式具有較大的差別。熒光定量PCR實時監測與DNA結合的熒光染料激發的熒光，普通PCR通過檢測插入DNA中核酸染料的量來測定PCR產物量。熒光定量PCR可以通過擴增曲線進行精確定量，普通PCR則是通過電泳的方式進行定性分析。那么在普通PCR和熒光定量PCR的引物設計方面，有什么相同點和不同點呢？今天小編就給大家匯總一下。相同處：? 序列的查找是一致的。? 序列選取應在基因的保守區段。? 選取合適的擴增片段大小。? 避免引物自身或與引物之間形成4個或4個以上連續配對。? 避免引物自身形成環狀發卡結構。? Tm值在55－65℃，GC含量在40%－60%。? 引物之間的Tm相差避免超過2℃。? 引物的3’端避免出現3個或3個以上連續相同的堿基。不同處：熒光定量PCR 引物? PCR產物長度：要求在300bp以內，一般選80-150bp之間。? 引物特異性：對引物要求高，盡量減少引物二聚體的產生，熔解曲線要求單一產物。? 擴增效率：熒光定量 PCR的目的是進行定量或者相對定量，擴增效率應在90%—110%之間。? 多對目的基因同時擴增，文獻上查來的引物條件會不同，需要設計盡可能條件一致的引物。? 目的基因含量比較低時，需要設計靈敏度比較高的引物。普通PCR 引物? 普通PCR的擴增長度，根據實驗的要求不同，一般是從150bp到幾千bp不等。? 相對于熒光定量PCR，普通PCR對二級結構要求較低。? 對擴增效率要求不高。? 可以選用梯度PCR儀，選擇不同退火溫度，對引物退火溫度要求不需要一致。Cielo?實時熒光定量PCR系統Harness of the power of qPCR? 數據可靠性：連續1000次實驗后，結果高度一致。? 應用靈活性：提供多種qPCR應用分析。? 流程智能化：中英文用戶界面，觸控操作，可多機聯用。? 在線便捷性：主機可獨立運行qPCR程序，數據可USB、Wi-Fi等網絡傳輸。
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- 2022-07-11 09:57:23抑郁有可能是氨基酸攝入過多了
- 飲食正是影響腸道微生物群組成的主要因素之一，因此飲食如何通過微生物群來影響大腦健康和精神疾病，也受到了很多研究的關注。日前，西班牙赫羅納生物醫學研究所（IDIBGI）的一支研究團隊，在人類以及果蠅、小鼠等多個物種中證明，抑郁的嚴重程度與血液中一種常見氨基酸——脯氨酸（proline）含量升高顯著相關，而血液中的脯氨酸水平則取決于飲食以及腸道微生物的組成與代謝活性。研究結果發表在《細胞》旗下子刊Cell Metabolism上。倫敦國王學院（King’s College London）的代謝專家Sandrine Claus教授評論說：“據我所知，這是***次有研究團隊真正證明，脯氨酸攝入量與抑郁行為之間存在因果關系。”研究人員從一份調查食物攝入頻率的問卷中注意到了脯氨酸。這份問卷調查包含人們日常攝入的80項食物，涉及各種膳食營養素。研究人員將數十名參與者的問卷調查結果與他們的抑郁癥評估得分進行了比較。結果顯示，各項膳食營養素中，脯氨酸與抑郁特征的關聯***為明顯。在對參與者進行血液檢測后，結果同樣顯示，血液循環中的脯氨酸含量與抑郁嚴重程度顯著相關。那些膳食脯氨酸攝入量高且血液脯氨酸高于中位數的受試者，抑郁評分***高。“我們發現，不僅是在重性抑郁中，在中性抑郁患者中也可以看到脯氨酸循環含量升高的現象。”研究人員強調。然而，研究人員敏銳地注意到數據中有些不一致的地方。簡單來說，通過飲食攝入脯氨酸同樣多的人，血漿的脯氨酸水平并沒有全都升高。在對這些參與者的血液和糞便樣本進行多組學分析后，研究人員找到了解釋：血漿脯氨酸水平與特定幾種腸道細菌（例如某些乳酸桿菌屬的細菌）的存在及其活性有關。攝入的脯氨酸量相同，但血液循環中的脯氨酸含量有差異的個體，腸道菌群的組成不同，而其中脯氨酸較高的人，腸道菌群的組成特征與較嚴重的抑郁癥密切相關。▲該研究示意圖脯氨酸與抑郁癥之間的聯系在后續的動物實驗中得到了進一步驗證。研究人員給一些小鼠的飲食中額外添加了脯氨酸補充劑，一段時間后，這些小鼠的脯氨酸循環含量高于普通飲食的小鼠，而它們在承受壓力時，也會比對照組小鼠表現出更多的類似抑郁的行為，例如不再對好喝的糖水感興趣。小鼠實驗還顯示了腸道菌群在其中起到的重要作用。研究人員從20名人類志愿者中獲取了糞便樣本，通過糞便移植將其中的腸道菌群植入無菌小鼠體內。這些志愿者中，有一部分人的血漿脯氨酸水平很高，抑郁程度也相對嚴重。結果他們的腸道菌群進入小鼠腸道后，小鼠的行為也跟著有了變化。研究人員發現，來自抑郁評分***高的受試者的腸道菌群，誘導小鼠出現了更明顯的抑郁情緒特征。不僅如此，研究人員還通過RNA測序發現，糞便移植后的小鼠，大腦中一些基因表達發生了變化。這些小鼠的前額葉皮層（這個腦區與認知有關）中，與抑郁行為相關的基因表達增加，以及一個關鍵基因——編碼脯氨酸轉運蛋白的基因slc6a20a表達增加。而這個脯氨酸轉運蛋白的表達量高低，在果蠅實驗中得到證明，會影響動物是否更容易出現抑郁行為。盡管無法在人類身上進行類似的實驗，但綜合這些動物實驗的結果來看，特殊的腸道菌群通過脯氨酸代謝影響了大腦在發展抑郁癥狀方面的功能。研究人員指出，后續他們將進一步在人群中驗證脯氨酸含量不同的飲食對抑郁癥狀與表現的影響，研究結果有望通過針對腸道菌群和膳食脯氨酸為有效抑郁癥打開新的窗口。生物磁珠對細胞篩選的方法已日漸成熟，原理是將包被一抗的磁珠與細胞表面對應的分子特異性結合，或者將包被二抗的磁珠與已經與細胞表面分子特異性結合的一抗結合。磁珠攜帶與之結合的細胞吸附與分離柱或試管上，實現陽性細胞或陰性細胞的分離。洛陽吉恩特生物自主研發生產了各類生物磁珠，可以實現穩定的實驗結果。
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- 2022-11-29 12:00:18【Application Note】受阻、非標準氨基酸的微波輔助多肽固相合成
- 摘要?微波增強的多肽固相合成（SPPS）能夠快速有效地進行大體積氨基酸（如Aib和N-Me-A）的常規困難偶聯? 酰基載體蛋白衍生物VQAibAibIDYINGOH和VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH的合成在2小時內完成，純度分別為95%和86%? GEQKLGAibAibAibASEESLG-NH2的合成在3小時內完成，純度為 89%介紹在許多生物學相關的化合物中都可以找到受阻的非標準氨基酸，例如α-氨基異丁酸(Aib)和N-甲基丙氨酸((N-Me)-A)（圖1）1-3。然而，包括Aib或N-甲基化氨基酸的肽合成已被證明具有挑戰性；第二個甲基引入的空間位阻，無論是在α-碳還是酰胺氮上，都使這些氨基酸衍生物在傳統SPPS中難以偶聯。圖1 位阻、非標準氨基酸然而，通過使用微波增強的SPPS，與受阻非標準氨基酸相關的困難已被最小化。在SPPS中使用微波能量可以快速有效地完成大體積氨基酸（如Aib和N-甲基丙氨酸）的常規困難偶聯4,5。材料和方法試劑N-α-Fmoc-α-氨基異丁酸獲自AnaSpec(Freemont,CA)。Fmoc-N-Me-Ala-OH獲自Peptides International(Louisville,KY)。所有其他氨基酸均獲自CEM Corporation(Matthews,NC)，并含有以下側鏈保護基團：Asn(Trt)、Asp(OMpe)、Gln(Trt)、Glu(OtBu)、Lys(Boc)、Ser(OtBu) 和Tyr(tBu) 。Oxyma Pure和Rink Amide ProTideTM LL樹脂購自CEM Corporation(Matthews,NC)。N,N-二異丙基碳二亞胺(DIC)獲自CreoSalus(Louisville,KY)。Fmoc-Gly-Wang Resin LL購自NovaBiochem(St.Louis,MO)。哌啶獲自Alfa Aesar(Ward Hill,MA)。三氟乙酸(TFA)、3,6-dioxa-1,8-octanedithiol(DODT)、三異丙基硅烷(TIS)和乙酸購自Sigma-Aldrich(St.Louis,MO)。二氯甲烷(DCM)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)和無水乙 醚(Et2O)購自VWR (West Chester,PA)。HPLC級水(H2O)和HPLC級 乙 腈(MeCN) 購 自 Fisher Scientific (Waltham, MA) 。多肽合成：GEQKLGAibAibAibASEESLG-NH2使用CEM Liberty Blue?自動微波肽合成儀在Rink Amide ProTide LL樹脂（離子交換容量：0.18meq/g）上以0.1mmol規模制備多肽。用哌啶和Oxyma Pure在DMF中進行脫保護。使用DMF中的DIC、DMF中的Oxyma Pure和5倍過量的Fmoc-AA-OH進行偶聯反應。使用具有TFA/H2O/TIS/DODT的CEM Razor高通量肽切割系統進行切割。裂解后，肽在無水乙 醚中沉淀并凍干過夜。多肽合成：VQAibAibIDYING-OH使用CEM Liberty Blue自動微波肽合成儀在FmocGly-Wang LL 樹脂（離子交換容量：0.33meq/g）上以0.1mmol規模制備。用哌啶和Oxyma Pure在DMF中進行脫保護。使用DMF中的DIC、DMF中的Oxyma Pure和5倍過量的Fmoc-AA-OH進行偶聯反應。使用具有 TFA/H2O/TIS/DODT的CEM Razor高通量肽切割系統進行切割。裂解后，肽在無水乙 醚中沉淀并凍干過夜。多肽合成：VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH使用CEM Liberty Blue自動微波肽合成儀在FmocGly-Wang LL 樹脂（離子交換容量：0.19meq/g）上以0.1mmol規模制備肽。用哌啶和Oxyma Pure在DMF中進行脫保護。使用DMF中的DIC、DMF中的Oxyma Pure和5倍過量的Fmoc-AA-OH進行偶聯反應。使用具有 TFA/H2O/TIS/DODT的CEM Razor高通量肽切割系統進行切割。裂解后，肽在無水乙 醚中沉淀并凍干過夜。多肽分析在配備有PDA檢測器的Waters Acquity UPLC系統上分析肽，該檢測器配備Acquity UPLC BEH C8柱（1.7mm和2.1x100mm）。UPLC系統連接到Waters 3100 Single Quad MS用于結構測定。在Waters MassLynx軟件上進行峰分析。使用(i)H2O和(ii)MeCN中的0.1%TFA梯度洗脫進行分離。結果在Liberty Blue自動微波肽合成儀上GEQKLGAibAibAibAibASEEDLG-NH2的微波增強SPPS產生了89%純度的目標肽（圖2）。圖2.GEQKLGAibAibAibASEEDLG-NH2的HPLC色譜圖在Liberty Blue自動微波肽合成儀上的VQAibAibIDYING-OH的微波增強SPPS產生了純度為95% 的目標肽（圖3）。圖 3：VQAibAibIDYING-OH的HPLC色譜圖在Liberty Blue自動微波肽合成儀上的VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH的微波增強SPPS產生了純度為86%的目標肽（圖4）。圖 4：VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH的HPLC色譜圖結論微波增強的SPPS能夠快速有效的進行大體積氨基酸（如Aib和N-Me-A）的常規困難偶聯。常規合成GEQKLGAibAibAibASEEDLG-NH2需要40小時且純度< 10%，但微波增強SPPS在3小時內產生目標肽且純度為89%。此外，酰基載體蛋白衍生物VQAibAibIDYING-OH和VQ(N-Me-A)(N-Me-A)IDYING-OH的合成在2小時內完成，純度分別為95% 和86%。微波增強的SPPS已被證明是一種有效的工具，可以最 大限度地減少SPPS中受阻的非標準氨基酸相關的困難。參考文獻Mueller, P.; Rudin, D. O. Nature. 1968, 217, 713–719.Rebuffat, S.; Goulard, C.; Hlimi, S.; Bodo, B. J. Pept. Sci. 2000, 6, 519–533.Ahmed, G.; Elger, W.; Meece, F.; Nair, H. B.; Schneider, B.; Wyrwa, R.; Nickisch, K. Bioorg. Med. Chem. 2017, 25, 5569–5575. Collins, J. M. Microwave-Enhanced Synthesis of Peptides, Proteins, and Peptidomimetics. In Microwaves in Organic Synthesis, Third Edition; de la Hoz, A.; Loupy, A.; Wiley-VCH: Weinheim, 2012; 897–959.Ben Haj Salah, K.; Inguimbert, N. Org. Lett. 2014, 16 (6), 1783–1785.
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