赫施曼助力雞蛋蛋清中溶菌酶的測定
溶菌酶是一種天然蛋白質,具有抗病毒等功能。而蛋清中的溶菌酶含量較高,很多商品的溶菌酶都是從蛋清中提取的,廣泛應用于醫藥制劑、食品防腐和生物工程等領域。
根據GB/T 25879-2010,測定雞蛋蛋清中溶菌酶含量的方法為:分光光度法。
1.試劑配制
氯化鈉溶液:稱取氯化鈉0.9g,溶解于蒸餾水中,定容至100mL。
溶菌酶標準工作液:稱取溶菌酶標準品(優級純,活力在20000U/mg左右),0.5000g,以氯化鈉溶液定容至1000mL,得到500μg/mL溶菌酶標準工作液,于4℃密封保存,一周內使用。
2.繪制標準曲線
準備5個25mL容量瓶,采用opus電子瓶口分配器(20mL款)的stepper模式,設置5個分液體積分別為1、2、3、4、5mL,排氣泡后進行分液,將此5個體積的溶菌酶標準工作溶液分別加入5個容量瓶中,以氯化鈉溶液釋至刻度,混勻,用10mm石英比色皿比色,以氯化鈉溶液為參比溶液,在波長281nm處依次測定各標準工作液的吸光度,以溶菌酶標準工作液濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標繪制標準曲線,并求出標準曲線回歸方程。
3.試樣測定
雞蛋蛋清用4層紗布過濾,用Miragen電動移液器移取過濾試樣1mL,用氯化鈉溶液稀釋定容至100mL,混勻,避免起泡沫。再用Miragen電動移液器吸取5mL蛋清的氯化鈉溶液,1310g離心5min,取上清液,按照繪制標準曲線的操作步驟,在波長281nm處測定試樣溶液的吸光度。平行測定三次,取結果的算術平均值,由標準曲線回歸方程計算試樣溶液中溶菌酶的濃度。
實驗室移取幾微升到幾毫升的液體,一般采用移液器(手動和電動兩種)。手動移液器需要手轉旋鈕調節數值,手指按壓和回松進行排液和吸液。Miragen電動移液器,數值靠設定或選定,電機控制活塞運動。而且吸液和排液可分次數且各段體積可調,分液程序可儲存,可實現單吸多排、多吸單排等效果,具有步驟少、更穩定、調數快、模式多等諸多優勢。
赫施曼opus電子瓶口分配器精度可達萬級,一次裝液可完成相同或不同體積的連續分液,搭配Miragen電動移液器,非常適合做標準曲線,適用各種需要分液和配制標準曲線的實驗室、生產線,應用廣泛。
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