SCIEX中國本土化產品Triple Quad 6500+質譜系統檢測細胞中的能量代謝物

2025-03-28 13:15:13 27閱讀次數

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本土化產品

作為全球生命科學分析技術的創新者，在2024年10月30日宣布在中國本土化生產 Triple Quad 6500+系統和QTRAP 6500+系統。這標志著本土化戰略的又一個里程碑，自2023年在中國蘇州成功交付本土化 Triple Quad 4500系統、QTRAP 4500系統和 5500+系列質譜以來， 6500+系列高端質譜的2個型號也已經實現中國本土生產。

6500+系統是高端三重四極桿/QTRAP質譜產品，在復雜基質中能為不同類型分子提供卓越的靈敏度。它為具有挑戰性的檢測設計，具備優異的可靠性和穩健性。其主要特點包括快速極性切換和多反應監測（MRM）速度，可兼容更靈活的色譜方法并提高檢測通量。無論是利用四極桿功能還是線性離子阱QTRAP增強子離子掃描功能，都能為樣品的鑒別、表征和定量帶來新穎的發現。

概述

細胞能量代謝研究可借助于各種細胞模型, 鑒識細胞內源性能量代謝物, 直接反映細胞生命活動的生物標志物信息, 從而揭示有關細胞的代謝途徑和過程, 對于體外研究藥物作用下代謝物的變化及改變機制具有重要意義。能量代謝物中包含很多高能磷酸鍵化合物如ATP，ADP等，在進行液相質譜分析時，容易與管路中的金屬離子絡合導致峰型變差，靈敏度降低。

本文優化了流動相條件，通過加入亞甲基二膦酸來改善峰型，在本土化產品 Triple Quad 6500+系統上建立了300多種能量代謝物的檢測方法，可以進行高通量靶向分析。

實驗條件

液相方法

流動相：A: 90%水（含20mM乙酸銨，5μM亞甲基二膦酸）B: 90%乙腈（含20mM乙酸銨，5μM亞甲基二膦酸）

流速：0.3 mL/min

柱溫：40 ℃

梯度洗脫：

表1. 液相梯度條件

時間 *(min)*	A%	B%
0	0	100
1	0	100
12	25	75
15	60	40
20	60	40
20.1	0	100
26	0	100

質譜方法

數據采集方法：MRM（多反應監測）

離子源：ESI源正模式/負模式

實驗結果

1. 化合物峰型好，靈敏度高。

正離子模式下目標化合物的提取離子流圖見圖1，負離子模式各目標化合物的提取離子流圖見圖2。

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圖1.部分正模式化合物提取離子色譜圖

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圖2.部分負模式化合物提取離子色譜圖

2. 數據分析

實驗共檢測了12個細胞樣品用于差異性分析，其中6個為給藥組細胞樣本，另外6個為對照組樣本。利用該方法對這批樣本中能量代謝物進行了靶向的分析。為了找出變化差異明顯的能量代謝物成分，進行了統計分析，得到每種代謝物在兩組樣品中的p-value和VIP值，通過p-value< 0.01和VIP>1的篩選，共有92種代謝物有顯著變化。從熱圖（圖3）可以發現對照組與給藥組有顯著差異，在top25的化合物中，給藥組中腺苷、鳥苷、肌苷、尿嘧啶等14種物質含量升高，脫氧鳥苷三磷酸、甘氨酸、肌醇、天門冬氨酸、肌氨酸等11種物質含量降低。

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圖3. 兩組細胞樣品的熱圖（top25）

（G為給藥組，C為對照組）

方法特點及優勢

在本土化產品Triple Quad 6500+建立了330種能量代謝物LC-MS/MS檢測方法，可用于細胞中能量代謝物的靶向研究。該方法不僅能高效準確地檢測出樣品中的代謝物成分，而且能夠提供有效地差異性分析，為高通量分析不同模型下能量代謝物的差異提供了快速可靠的方法。本土產品Triple Quad? 6500+擁有跟進口產品一樣的性能，整套系統具有非常強的抗基質干擾能力，靈敏度高，進而可以簡化前處理的流程，且回收率滿足要求，儀器重復性好。