一、結構與性質

雜色曲霉素主要是曲霉屬的某些菌種產生的有毒代謝產物，1954年首先從雜色曲霉的培養物中分離出來，是一組化學結構相似的化合物，目前已知有十多種衍生物。在化學結構上，雜色曲霉素與黃曲霉毒素B1相似，均具有二呋喃雜氧蒽酮，用MC標記研究證實，雜色曲霉素能轉變成黃曲霉毒素B1。雜色曲霉素為淡黃色結晶，化學結構式如圖11—9所示。分子式C18H12O6，相對分子質量338，熔點246oC。在紫外光下具有暗磚紅色熒光。易溶于氯仿、乙腈、苯等有機溶劑中，不溶于水、氫氧化鈉及碳酸鈉水溶液。

二、污染來源與分布

雜色曲霉素主要由雜色曲霉群和構巢曲霉群的某些菌種產生。主要產毒真菌有：雜色曲霉、構巢曲霉、皺褶曲霉、黃褐曲霉、四脊曲霉、兩端離蠕孢霉等；此外，還有人報道毛殼屬的某些種也能產生雜色曲霉素。

雜色曲霉在自然界分布很廣，主要污染玉米、花生、大米和小麥等谷物，但污染范圍和程度不如黃曲霉毒素。

三、毒性與危害

雜色曲霉素是一種毒性很強的肝及腎臟毒素，可引起動物肝和腎的壞死。能造成大鼠和猴子類似黃曲霉毒素B1的損傷，包括膽管增生、核多型性變、腎和肝的出血壞死。雜色曲霉素可導致大鼠的肝瘤和皮膚扁平細胞癌，誘發猴的肝腫瘤，反復多次靜注雜色曲霉素可引起大鼠的肉瘤。

小鼠對雜色曲霉素的急性毒性作用有較強的抵抗力，其LD50大于800mg／kg。大鼠經口服的LD50雄性為166mg／kg，雌性為120mg／kg；腹腔注射的LD50為60mg／kg(溶劑為二甲基甲酰胺)及65mg／kg(溶劑為小麥胚油)。猴經腹腔注射的LD50為32mg／kg。

雜色曲霉素對枯草桿菌DNA重組缺陷型有致突變性；對鼠傷寒沙門菌四種突變株TA98、TAlOO、TAl535和TAl537的誘變性為陽性。

雜色曲霉素也可導致人類食物中毒和毒性損傷效應。在肝癌高發區居民所食用的食物中，雜色曲霉素污染較為嚴重，提示該地區肝癌發生可能與雜色曲霉素對食品污染有關。

四、防止雜色曲霉素中毒的措施

①玉米、花生、大米和小麥等谷物應儲存于干燥、通風、清潔的地方。空氣潮濕的地區，糧庫要增加通風設施，防止霉菌污染和毒素產生。

②揀去霉變谷物顆粒，不用霉變谷物加工食品。

③不食用已經霉變的谷物及其制品。

五、食品中雜色曲霉素的測定

1、原理

 樣品經提取液提取、過濾、稀釋，然后通過鍵合有雜色曲霉毒素特殊抗體的免疫親和柱。此時，雜色曲霉毒素被親和柱中的抗體特異性的吸附，用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質除去，然后用甲醇使抗體變性，從而將雜色曲霉毒素從親和柱上洗脫下來。最后，用HPLC或熒光計進行定量檢測。

2、實驗溶液制備

1)       HPLC流動相，甲醇/水（75+25）：取750mL甲醇加250mL水，混合均勻，用0.22微米的尼龍篩過濾。

2)       pH7.0 PBS溶液： Clover pH7.0 PBS鹽包（貨號：C3001）：將鹽包用1000ml純水直接溶解，備用。保質期18個月。

3、液相色譜條件

色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）

流動相：甲醇-水（75+25，v/v）

流速：0.8mL/min

檢測器：紫外檢測器，波長325 nm

進樣體積：20~100uL

4、分析步驟

 方法1：樣品提取及稀釋：

準確稱取試樣25.0g于250mL具塞錐形瓶中，加入5.0g氯化鈉，準確加入100.0mL,80%甲醇水，以均質器高速攪拌提取2min。槽紋濾紙過濾，準確移取5mL濾液，然后用pH 7.0 PBS溶液定容至50mL，用玻璃纖維濾紙過濾，取濾液10 mL，備用。

 方法2：樣品提取及稀釋：

準確稱取試樣40.0g于250mL具塞錐形瓶中，加入5.0g氯化鈉及準確加入100.0mL乙腈，以均質器高速攪拌提取2min。槽紋濾紙過濾，準確移取20.0mL濾液，50℃氮氣吹干儀下氮吹，吹干后，加入1mL甲醇溶解沉淀物，然后用pH 7.0 PBS溶液定容至20mL，用玻璃纖維濾紙過濾，取濾液10 mL，備用。

5、樣品的凈化  

雜色曲霉毒素免疫親和柱的柱容量(最DA吸附雜色曲霉毒素)為600ng，當樣品中雜色曲霉毒素超過測定范圍時，請適當減小上柱體積，使其在檢測范圍內，計算出準確含量。

   將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器中，將空氣壓力泵與玻璃注射器連接，調節壓力使溶液以約2mL/min（1滴/秒）流速緩慢通過免疫親和柱，直至2~3mL空氣通過柱體。以2-3mL/min（1-2滴/秒）流速用10.0mL水淋洗柱子2次，棄去全部流出液，并使2mL~3mL空氣通過柱體。準確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫，流速為1 mL/min ~2mL/min（1滴/秒），收集全部洗脫液于玻璃試管中，供檢測用。

需要準備的設備及試劑（中檢維康提供）