【空間蛋白組學】2024年度技術(shù)詳解
空間組學是什么?可以用來研究什么科學問題?
空間組學是一個快速發(fā)展的領(lǐng)域,它將空間信息與組學數(shù)據(jù)(如基因組學、轉(zhuǎn)錄組學、蛋白組學和代謝組學)相結(jié)合,以全面了解組織中空間背景下的分子特征。
這種方法解決了傳統(tǒng)組學方法難以獲得空間信息的局限性,提供了對細胞微環(huán)境和相互作用的更深入了解。
由于空間組學能夠?qū)⒖臻g信息與組學數(shù)據(jù)相結(jié)合,它可以解決傳統(tǒng)方法無法解決的幾個科學問題。代表性問題包括(上下滑動查看全部):
與傳統(tǒng)的批量或單細胞測序方法相比,通過保留分子數(shù)據(jù)的空間背景,空間組學可以從空間維度更全面地了解三維的生物過程。
空間組學方法分類
空間組學采用多種方法將空間信息與各種組學數(shù)據(jù)類型整合在一起。這些方法包括(上下滑動查看全部):
這些方法通常結(jié)合使用,可對組織進行全面的空間分析,從而深入了解分子在其原生環(huán)境中的空間組織和相互作用。
空間蛋白組學方法比較
基于抗體的成像分析是空間蛋白組學常用的研究思路,主要包括的方法分類、大致流程、各自的優(yōu)缺點如下表:
表1. 基于抗體的空間組學成像分析方法對比
參考文獻:
Nat Methods. 2022 March ; 19(3): 284–295. doi:10.1038/s41592-021-01316-y.
Nature Methods | VOL 18 | September 2021 | 997–1012 | www.nature.com/naturemethods
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空間組學利器推薦
空間蛋白組學
表2. Invitrogen? 空間蛋白組學利器一覽
【組織低豐度蛋白檢測】Aluora? 空間組學信號擴增試劑盒
亮點:
亮度高:新一代 Aluora熒光染料,性能優(yōu)異
靈敏:極低豐度靶標也能檢測到
無縫兼容光譜拆分:專為熒光光譜成像設(shè)計
最多可同時檢測8個蛋白靶點
圖1. Aluora? 空間組學信號擴增試劑盒工作流程
(代表貨號:A40001338)
表3. Aluora? 空間組學信號擴增試劑選擇指南
【中高豐度靶點檢測】經(jīng)過組織染色驗證的直標一抗
亮點:
背景低:無需使用二抗,背景信號顯著降低
節(jié)省時間:無需二抗孵育步驟,縮短實驗時間
中高豐度靶點檢測首選,切記選擇組織染色驗證過的直標抗體!
圖 2. 用直標一抗染色的 FFPE 正常人扁桃體 (A) 和扁桃體淋巴瘤 (B)。
【兼容BSA】ReadyLabel? 抗體標記試劑盒
亮點:
方便:無需純化,20分鐘上手時間、1小時完成標記
靈活:可標記任何IgG抗體,不挑物種、亞型和儲存液
多色可選:7色熒光、生物素;還有Flex試劑盒,可搭配任意胺反應(yīng)性染料使用。光譜成像絕佳搭檔
圖3. 使用ReadyLabel試劑盒進行組織7色標記
(代表貨號:R10723)
空間轉(zhuǎn)錄組學
【RNA轉(zhuǎn)錄本原位檢測】ViewRNA? 組織檢測試劑盒
亮點:
固定組織切片驗證+優(yōu)化
可搭配免疫熒光/組化使用,同時檢測蛋白和RNA
同時可檢測多達 4 個 RNA 靶標
圖4. ViewRNA試劑盒在小鼠腦切片中的實驗結(jié)果
(代表貨號:QVT0700)
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