食品和生物體內氨基酸種類和含量對于人體健康至關重要。毛細管電泳儀以其成本低、污染小、gao效和操作簡易等優點被廣泛應用于氨基酸的分析中?？偨Y了毛細管電泳儀結合紫外、質譜、熒光和電化學等檢測器用于氨基酸分析的Zxin應用進展，綜述了毛細管電泳法在氨基酸手性分離方面的應用。

一、毛細管電泳儀在氨基酸中的應用

氨基酸是生物體的重要組成單元，參與并控制著體內代謝，對一切生物體的生長發育有舉足輕重的作用，因此，氨基酸的檢測對于營養食品的研究與對機體營養狀況的判斷有著重要意義。分光光度法、液相色譜法、氣相色譜法和氨基酸分析儀方法等都可應用于氨基酸的檢測中，但是上述方法均存在各自局限性，如檢測靈敏度低、操作繁瑣、操作費用高等，在一定程度上限制了其在氨基酸檢測中的應用。

毛細管電泳法(capillary electrophoresis，CE)是20世紀80年代發展起來的一種以電場為推動力的gao效分離技術，該方法具有成本低、污染小、gao效和操作簡單等優點。因此，毛細管電泳法用于氨基酸分析成為研究的熱點課題，主要應用于食品安全、生物科技、yi療診斷等領域。本文綜述了結合不同類型檢測器的毛細管電泳儀在氨基酸分析中的應用，介紹了近幾年該技術在氨基酸手性分離中的應用。

二、毛細管電泳技術

毛細管電泳儀將樣品中氨基酸分離后，結合不同的檢測器對每種氨基酸進行定性和定量分析。常用的檢測器有紫外檢測器(ultraviolet detector，UV)、激光誘導熒光檢測器 (laser-induced fluorescence，LIF)、質譜檢測器(mass spectrometric detection，MS)和電化學檢測器(electrochemical detection，EC)。

1.毛細管電泳-紫外檢測法(CE-UV)

CE-UV是根據氨基酸具有的紫外吸收性質對其進行定性定量分析的。由于某些氨基酸本身對紫外吸收較弱，因此，為了提高毛細管電泳儀分析靈敏度，需要在樣品溶液中加入背景電解質(緩沖溶液)和衍生劑。因此，毛細管電泳紫外氨基酸分析方法包括直接紫外檢測法和衍生化紫外檢測法。

1.1.直接紫外檢測法

直接紫外檢測法需要在樣品溶液中加入緩沖溶液，使樣品溶液形成穩定的電滲流體系。據研究，毛細管柱內表面粒子運動方向及穩定性和待分離氨基酸的運動方向和穩定性均會受到pH值影響，因此，通過控制緩沖溶液的pH可以實現不同樣品中氨基酸的較好分離效果，常用的緩沖溶液體系是磷酸鹽和硼砂。

1.2 衍生化紫外檢測法

衍生化紫外檢測法原理是在溶液中加入發色團以增強氨基酸對紫外的吸收，因此提高了紫外檢測器對氨基酸檢測的靈敏性。對衍生劑的選擇原則是選擇產生副產物Z少，有選擇性的衍生劑。毛細管電泳儀常用的衍生劑有鄰苯二甲醛(OPA)、氯甲酸-9-芴基甲酯(FMOC-Cl)、異硫氰酸熒光素(FITC)和萘-2，3-二甲醛(NDA)等。

2.毛細管電泳-質譜檢測法(CE-MS)

CE-MS是通過測定各峰的組分碎片離子質荷比對樣品中氨基酸實現定性和定量分析的。此技術對樣品定量分析靈敏度和準確性高，干擾少。

應用CE-MS技術，樣品溶液會在毛細管電泳和質譜儀接口處被稀釋。為了解決這一問題，在毛細管后裝入了電噴射離子裝置(CE-ESI-MS)。改進后，能使電泳分離的樣品不間斷打入質譜中，不僅避免了液體在接口處稀釋的問題，而且節省了分析時間，減少了裝置接口處的死體積。實驗證明CE-ESI-MS比CE-MS花費小，且可以檢測更多種氨基酸。

3.毛細管電泳-熒光檢測法(CE-LIF)

CE-LIF要求被檢測氨基酸樣品有熒光吸收，因此要對樣品進行衍生化處理。CE-LIF對樣品檢測分析靈敏度極高，且進樣量少，因此，在疾病診斷、評估和監測疾病對藥物zhi療方面應用較多。

CE-LIF對衍生劑、分離條件和檢測條件的選擇有較高要求。王宇飛以4-氯-7-硝基苯并-2-氧雜-1，3-二唑(NBD-F)為衍生劑，選擇的25 mmol/L硼砂、20 mmol/L聚氧乙烯月桂醚(Brij-35)和體積分數5%乙腈(pH 9.5)的緩沖體系，分析了谷胱甘肽鈉藥品中氨基酸含量，分析時間為11 min，檢測限可達為0.1 μg/mL。Lorenzo應用此法，采用的衍生劑為NBD-F，衍生時間為35 min，檢測了人體血漿中氨基酸含量，從而判斷實驗者是否患有抑郁癥。

4.毛細管電泳-電化學檢測法(CE-EC)

CE-EC可直接檢測未衍生的氨基酸含量，有良好的選擇性，儀器造價低廉，多用于生理液等臨床樣品的分析檢測。實驗者往往通過修飾工作電極對CE-EC進行優化，毛細管電泳儀通常選用的工作電極有碳、銅、金和鉑等。毛細管電泳儀工作電極選擇中應該考慮對檢測物質有一定響應值，但不易被液體污染，并且經濟。研究發現，CE-EC比任何一種檢測器分離分析技術都省時。

5.其他毛細管電泳技術

毛細管電泳儀在氨基酸檢測方面已日趨重要，成為了熱點研究課題。Fengbin應用毛細管前沿技術(CE-FA)對β-甲氨基-L-丙氨酸(BMAA)和β-萘酰胺衍生劑的結合力進行了研究，表明兩者由靜電結合力聚合在一起，應用此技術可以通過計算結合鍵力來判斷Z佳衍生時間，為選擇Z好的衍生條件提供了理論基礎。

為了提高毛細管電泳儀對氨基酸的分析靈敏度，Jeongmi結合了單滴微萃取技術(SDME)對人類尿液樣品進行分析，萃取劑為壬烷-1-磺酸，萃取時間20min，把氨基酸濃度提高到了之前的120倍，檢測靈敏度明顯提高，此技術在臨床樣品分析中結合質譜檢測器可以達到更好的效果。據研究，毛細管電泳儀緩沖溶液的pH值會影響離子淌度，控制緩沖溶液pH值對毛細管電泳分離效果很重要，Tak通過監測動態pH界面，隨時調整pH至Z適宜值，優化了毛細管分離方式。

三、毛細管電泳技術在手性氨基酸分離中的應用

由于L-和D-氨基酸(手性氨基酸)在生物體中有不同的代謝作用，在制YF面也各有差異，因此，近幾年毛細管電泳儀對手性氨基酸的分離檢測也成為研究熱點和難點。毛細管電泳技術以其微量、gao效和省時等優點廣泛應用在手性氨基酸的分離和檢測。

毛細管電泳儀對于手性氨基酸的分離是通過改變其旋光性而實現的，zhong點研究領域是藥物的制備和臨床樣品的分析。毛細管電泳儀常用的手性分離劑有環糊精、金屬配合物Cu(Ⅱ)和Zn(Ⅱ)、大環抗生素和冠醚。其中環糊精因其帶電性不同又分為中性環糊精、負電性環糊精、正電性環糊精和兩性環糊精。

目前，在研究中毛細管電泳儀并不單一的使用手性分離劑，而是在樣品溶液中加入衍生劑和合適的背景電解質，使得手性劑優先與氨基酸的功能基團發生化學反應，提高手性劑的化學選擇性。因此，對于毛細管電泳手性分離技術，選擇合適的背景電解質、衍生劑和分離條件也是至關重要的，尤其當手性分離劑選擇環糊精時，溫度控制至關重要，一般高溫會減弱手性分離劑與氨基酸的結合鍵力。

四、展望

毛細管電泳技術的應用雖然不斷拓展發展，但是此技術在氨基酸分離檢測過程中還存在衍生劑的選擇和實驗條件的優化等一系列問題亟待解決。為了極ng準分析臨床樣品、藥物和食品中的氨基酸需對這些問題進行更深入細致的研究。此外，毛細管電泳儀還可以結合偏Z小二乘法、主成分回歸法和其他數學方法對分析值進行統計預測，為全面對氨基酸定性定量分析做理論支撐。