【學者論壇精彩回放】兩位專家帶您回顧類器官研究與應用轉化
2022年8月,安捷倫細胞分析學者論壇正式上線,論壇的開設是希望能夠為更多的用戶搭建一個技術交流的平臺,也讓微孔板檢測與成像技術可以更深入、更廣泛地幫助更多的實驗室、實驗者解釋科學問題。
目前,在細胞學、腫瘤、代謝等生命科學研究領域內,2D細胞模型使用頻率更高,但是2D 細胞模型體外擴增有一定局限性,在傳代后容易喪失原腫瘤的遺傳異質性,且臨床相關性較低。相比于2D 細胞模型,3D 細胞或者類器官能提供更有生物相關性的結果,簡化并加速藥物評價流程。自2009年小腸類器官首次建立至今,類器官研究已經延伸到多個組織系統,并成為當下生命科學領域最熱門的技術之一。
10月19日,安捷倫細胞分析學者論壇者第二期:類器官研究與應用轉化在轉化醫學網進行了直播,我們非常榮幸地邀請到兩位青年科學家,與我們分享兩種不同的類器官培養與應用模式,并在線與聽眾們討論了在類器官研究過程中的我們遇到的各種問題可能的解決方法,為研究者在類器官研究模式的選擇上提供一些指導思路。
本期精彩回看
報告一:類器官模型及在藥敏檢測中的應用
陳偉 博士
中山大學附屬第七醫院 助理研究員
陳博士報告的問題答疑:問:類器官檢測一般測哪些指標,在成像下?
答:目前類器官檢測主要兩種,一是通過ATP檢測活性,二是成像來研究類器官形態、大小、數量等,通過實時動態地評估藥物作用對類器官活性增殖的影響等。問:目前類器官前期樣品制備標準化是比較具有挑戰的,目前在樣品制備方面,有沒有什么比較好的策略或建議?答:樣本制備標準化目前對培養結果可能影響沒那么大,影響比較大的反而是培養基,前期消化、基質膠包埋等處理都大同小異,關鍵還是在于通過文獻等途徑找到合適的培養基,才能建立合適的培養體系。問:請問陳老師384孔板拍照和分析用的是什么儀器?
答:BioTek Cytation 多功能細胞成像微孔板檢測儀和配套的軟件。
問:怎么判斷類器官培養是否成功了呢?答:要看怎么定義成功,對于科研來說,比較公認的評價標準是原代細胞培養出類器官之后,能夠穩定傳代(30代)、擴增、復蘇。對于公司的藥敏性實驗可能就沒有這么高的要求。
問:類器官藥物活性分析,怎么樣保證每孔的一致性,不要太大的誤差
答:一個樣品孔里有幾百個類器官,有大有小,因此并不需要每個孔都完全一致。只要每個孔里面的分布都是一致的就可以,比如說就像一個正態分布一樣,直徑都在某個范圍就可以,類器官與腫瘤球不一樣,要注意區分,腫瘤球培養很多是細胞系來源,每個孔內形成一個球,如果每個孔內腫瘤球大小不一樣,確實是有問題的,但是對于類器官來講,就不存在這個問題。
報告二:基于人體器官芯片的糖類藥物吸收代謝及毒性研究
劉冬冬 博士
中國科學院過程工程研究所
劉博士報告的問題答疑:
問:能夠用于器官芯片的細胞來源有什么要求?不同的細胞來源之間可能會產生很大差異嗎?這方面有什么建議嗎?
答:目前,可接種在器官芯片上的細胞主要有三種來源:市售的細胞系;來自人體志愿者捐贈的原代細胞;以及誘導多功能干細胞衍生來源(iPS細胞),細胞系,較為穩定,這有助于提高實驗的重復性。原代細胞,不能傳代,但與人體細胞相近,可進行相應代謝類實驗,iPS誘導的細胞成本高、培養時間長,但差異性較小,是相對比較理想的方式,但在不同細胞的選擇上,沒有一個統一的標準,主要依據相應的實驗的目的來進行合理選擇。
問:器官芯片能模擬血流嗎?
答:可以。
問:3D打印的器官芯片是采用什么材質?3D打印不透明,怎么實現顯微觀察?
答:市面上相對能用于生物3D打印的材料都是可以的,要考慮生物兼容性問題,底部會結合透明的材質進行貼合后使用。
問:除了重力驅動,想實現高通量,還有哪些流體驅動方式?
答:主要是重力驅動和蠕動泵這兩種方式,目前還沒有其他可應用于微流控體系高通量的驅動方式。
問:對于環境化學品的毒性篩查來說,類器官成本過高,供體差異大,是否大材小用?
答:類器官的成本過高是暫時的,在后續類器官研究應用廣泛后,成本必然會降低,甚至和細胞培養類似。供體差異大,這不是缺點,說明類器官差異也就是反映了人體之間的差異,因此毒性評價方面更加具有真實的參考性,同時,“類器官”這個大才應用的方面很多,現在可能用途較小,但未來肯定會有大用途。
篇幅有限,所有的問題無法一一回答,關于類器官及器官芯片,還有哪些問題是您想了解的,歡迎后臺留言。
關注安捷倫細胞分析學者論壇,下期再見!
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