產品簡介

CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）是專門針對貼壁細胞設計開發的減血清培養基（使用時僅需添加2.0%血清）。相較常規培養方案，CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）+2.0%血清的培養方案在保持相同/略高目標蛋白表達情況下，減少80%血清用量，大大降低完全培養基成本。

組分信息

儲存條件

2~8℃，避光保存，有效期12個月。

使用說明

一、制備完全培養基

CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）+2.0%血清，使用前預熱至37℃。

二、細胞復蘇與傳代

1. 在37℃水浴中快速融化凍存的細胞，待凍存管底部余下米粒大小冰塊便可取出（全程<2min）。用70%乙醇對凍存管外部消毒。
2. 將凍存管中的細胞液全部轉移至15 mL無菌離心管中，加入9mL完全培養基，混勻，800rpm離心5 min，棄上清。
3. 將細胞沉淀重懸在1mL完全培養基中，混勻，取樣計數。剩余細胞懸液全部轉移至預先加入9mL完全培養基的T25培養瓶中，混勻，靜置于培養箱（37℃，5 - 8% CO2）中培養。
4. 待匯合度達到80 - 90% ，即可按如下步驟進行傳代。
5. 從培養瓶中吸棄舊培養基，加入1mL 常溫 PBS潤洗后吸棄。
6. 添加 1 mL的0.25%Trypsin-EDTA，室溫孵育 30-60s至細胞開始滑落。
7. 添加 5 mL完全培養基終止細胞消化反應，輕輕吹打瓶壁收集細胞。將細胞懸液轉移到15 mL 無菌離心管中，800rpm 離心5 min，棄上清。
8. 將細胞沉淀重懸在1 mL完全培養基中，混勻成單細胞懸液，計數后補加新鮮完全培養基制備指定密度的細胞懸液。

三、細胞馴化與凍存

1. 使用常規培養方法（DMEM+10.0%血清）凍存或培養的293貼壁細胞，替換至本產品時，建議按照如下流程進行馴化。
2. 將細胞接種到預熱的完全培養基中，置于37℃，5 - 8% CO₂培養箱培養。推薦接種密度（4 - 8）×10⁴cells/cm²。
3. 當細胞匯合度達到80 - 90%時，繼續傳代細胞。
4. 經過2 - 3次傳代后，293貼壁細胞基本均可適應CelCulSF™ Adherent Cell Culture Medium（Serum-reduced）完全培養基。
5. 選擇處于對數生長期、活率>90%的細胞，以（1 - 5）×10⁶cells/mL凍存于Serum-Free CellStore Freezing 無血清細胞凍存液（40151ES）中。

注意事項

1. 本產品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

3. 細胞應及時傳代。如果細胞密度很高，會導致細胞狀態下降，死亡細胞增多，細胞碎片增多，細胞聚集。

Ver.CN20240922