產(chǎn)品簡介

 

磁珠法96孔樣本前處理試劑盒FN（預封裝）適用于生物制品樣本的前處理，樣本類型包含抗體藥物和基因細胞治療的病毒液等。本試劑盒采用獨特磁珠和精心優(yōu)化的緩沖體系，可最大限度從復雜樣本基質中分離純化生物制品中的微量DNA（如宿主細胞殘留DNA、支原體DNA等），且主要搭配翌圣生物96通道自動化核酸提取儀(Cat#80510ES01)使用，實現(xiàn)核酸的高通量提取。

該前處理試劑盒可與本公司的多種宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒配合使用，包括Vero殘留DNA檢測試劑盒（Cat#41307ES）、E.coli殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41308ES)、HEK293殘留DNA檢測試劑盒(3G) (Cat#41331ES)、CHO殘留DNA檢測試劑盒(3G) (Cat#41332ES)、等。此外，該前處理試劑盒還可配套支原體qPCR檢測試劑盒（探針法）(2G) (Cat#40619ES)使用。

 

組分信息

 

類別*	組分編號	組分名稱	18468ES48	18468ES59
Part I	18468-A	樣本處理板	1塊	1塊
	18468-B	漂洗板	1塊	1塊
	18468-C	洗滌板+磁珠	1塊	1塊
	18468-D	洗脫板	1塊	1塊
	18468-E	96深孔磁棒套	1塊	1塊
	18468-F	裂解液	6 mL	12 mL
Part II	18468-G	糖原	450 μL	900 μL
	18468-H	Poly A鉀鹽	300 μL	600 μL
Part III	18468-I	蛋白酶 K（20 mg/mL）	1 mL/支×1	1 mL/支×2

^*本試劑盒適用機型為翌圣生物96通道自動化核酸提取儀(Cat#80510ES01)及同類型儀器（加熱板位為1、6）。

 

運輸和儲存條件

 

1. Part I組分室溫運輸，室溫保存，有效期1年。

2. Part II組分干冰運輸，-25~-15℃保存1年。

3. Part Ⅲ組分冰袋運輸，4℃可保存1年。

4. 收到貨后，請檢查Part I、Part II和Part Ⅲ共3個組分中的試劑是否齊全，并立即放入對應的保存溫度中儲存。

 

注意事項

 

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

2. 使用前請仔細閱讀使用說明書，嚴格按照說明書操作，樣本處理建議在超凈臺或生物安全柜中進行。

3. 注意觀察室溫保存溶液是否有析出或渾濁（尤其冬季室溫為低溫環(huán)境時），可37℃水浴至溶液澄清，避免影響使用效果。

4. 自動化核酸提取儀使用前與使用后，需使用75%酒精擦拭提取儀內(nèi)部，并進行紫外消毒30 min。

5. 處理樣本及加樣時，勤換槍頭，避免交叉污染。

6. 洗脫時可能存在磁珠殘留，吸取樣本時應盡量避免吸入磁珠。

 

使用說明

 

1. 實驗前準備

1）自備設備：漩渦振蕩器、水浴鍋或金屬浴、翌圣96通道自動化核酸提取儀或其他品牌自動化核酸提取儀。

2）自備耗材：10 μL~1000 μL不等的低吸附帶濾芯槍頭、1.5 mL低吸附離心管。

3）自備試劑：1×PBS緩沖液（pH 7.4，無Mg和Ca離子）、超純水^*。

^*推薦您購買本公司的超純水（Cat#10116ES）。

2. 實驗方法

1）預封裝試劑準備

a. 從試劑盒中取出預裝板，顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸，輕甩孔板，使試劑及磁珠都集中到孔板底部。小心撕去預裝板封膜，避免振動，防止液體濺出。

b. 根據(jù)處理樣本數(shù)量，向預裝板樣品處理孔加入9 μL糖原和6 μL Poly A鉀鹽。

2）樣本處理

a. 待測樣本為疫苗等本身含有較高DNA含量的樣本，可用1×PBS（pH7.4，無Mg和Ca離子）對樣本進行適當比例稀釋后提取（對樣本進行稀釋是為了保證檢測的準確性，使樣本的檢測值在標曲線性范圍內(nèi)，通常可考慮進行100倍稀釋）。

b. 待測樣本為干粉時，可用超純水將樣本稀釋成10 mg/mL或100 mg/mL后使用。

c. 待測樣本為復雜背景基質時，可根據(jù)需要進行加標回收實驗，以確定合適的樣本稀釋倍數(shù)。

d. 取100 μL樣本置于1.5 mL離心管中，再加入100 μL裂解液和10 μL蛋白酶K^*，渦旋混勻10 sec。

^*樣本蛋白濃度為0~100 mg/mL時，蛋白酶K用量為10 μL；樣本蛋白濃度為100~200 mg/mL時，蛋白酶K用量為20 μL。

e. 60℃孵育20 min，即為預處理樣本，待用。

3）自動化提取

a. 將預處理樣本加入樣品處理板。

b. 將96孔磁棒套正確放入核酸提取儀器的磁棒架中，并按如下順序將各96孔板正確安放至核酸提取儀器中。

板位	板位1	板位2	板位3	板位6
試劑	樣本處理板	漂洗板	洗滌板+磁珠	洗脫板

表1 翌圣96通道自動化提取儀中各96孔板安裝位置說明

c. 運行如下程序，程序結束后，將洗脫液轉移至新的離心管中，溶液可置于-25~-15℃短期保存（不超過3 個月），-80℃長期保存。

 

步驟		第1步（移磁珠）	第2步（結合）	第3步（清洗1）	第4步（清洗2）	第5步（洗脫）	第6步（棄磁珠）
板位		3	1	2	3	6	3
等待時間		0 min	0 min	0 min	0 min	4 min	0 min
混合模式	混合速度	200000	200000	300000	300000	200000	100000
	混合時間*	10 s	10 s	10 s	10 s	10 s	10 s
混合時間**		20 s	15 min	1 min	1 min	8 min	10 s
是否暫停		否	否	否	否	否	否
吸磁時間		60 s	90 s	60 s	60 s	90 s	0 s
體積		500μL	600μL	500μL	500μL	100μL	500μL
溫度		/	/	/	/	65℃	/

表2 翌圣96通道自動化提取儀提取程序

^*此處的混合時間是混合模式設置中的混合時間。

^**此處的混合時間是程序編輯頁面中的混合時間。

 

 

Ver.CN20240527