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Human IL-3 ELISA Kit 人白介素3 ELISA檢測試劑盒

品牌：翌圣生物
產地：
供應商報價：面議

翌圣生物科技(上海)股份有限公司更新時間：2024-12-24 09:03:45

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詳細介紹

產品簡介

白細胞介素3(IL-3)是一種多效性因子，主要由活化的T細胞產生，可刺激多能干細胞以及各種譜系祖細胞的增殖和分化。此外，IL-3還影響成熟肥大細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞和巨噬細胞的功能活性。除了活化的T細胞外，其他細胞類型如人胸腺上皮細胞、活化的鼠肥大細胞、鼠角質形成細胞和神經元/星形膠質細胞也可以產生IL-3。在氨基酸序列水平上，成熟的人和鼠IL-3僅共享29%的序列同一性。與這種缺乏同源性一致的是，IL-3活性是高度物種特異性的，而人IL-3對小鼠細胞沒有表現出活性。

翌圣Human IL-3 ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的人白介素3(Human IL-3)。特異性抗人白介素3抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經過孵育，樣本中存在的人白介素3與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入檢測抗體孵育結合，經洗滌，再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人白介素3的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

產品信息

貨號	97032ES48 / 97032ES96
規格	48 T / 96 T
檢測范圍	15.63-1000 pg/mL
檢測方法	雙抗夾心法
檢測物種	人
檢測時長	4.5小時
靈敏度	12.86 pg/mL
稀釋線性	79 - 101%
回收率	80 - 110%
板內差	3.3%
板間差	4.8%

實驗數據

標曲數據

數據擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數據分析。

標準曲線圖

濃度（pg/mL）	顯色值		平均值	校準值
1000	2.260	2.315	2.287	2.288
500	1.290	1.365	1.328	1.323
250	0.726	0.762	0.744	0.765
125	0.515	0.453	0.484	0.452
62.5	0.274	0.269	0.271	0.281
31.25	0.183	0.178	0.180	0.188
15.625	0.139	0.131	0.135	0.138
0	0.080	0.089	0.085	/

靈敏度檢測

IL-3的最低檢測限為12.86 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。

精密度檢測

酶標板內精密度

3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定6次，評估酶標板內的精密度。

酶標板間精密度

3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測22次，評估酶標板間的精密度。

項目	板內精密度			板間精密度
樣本	1	2	3	1	2	3
樣本	6	6	6	22	22	22
平均值	531.26	126.78	31.26	525.29	127.49	31.26
標準差	17.75	2.62	1.37	31.54	5.28	1.37
變異系數（%）	3.3	2.1	4.4	6.0	4.1	4.4

回收率檢測

通過不同水平的IL-3添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:

樣本類型	平均回收率(%)	范圍（%）
血清	85.2	81.2-89.0
血漿	103.1	98.0-108.0
細胞培養上清	93.1	80.0-109.5

稀釋線性檢測

血清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	95.5	94.3-96.1
1:04	95.3	91.9-99.3
1:08	94.7	90.6-100.0
1:16	93.3	79.4-100.7

血漿稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	90.6	89.5-92.8
1:04	93.8	93.3-94.6
1:08	91.0	86.0-94.9
1:16	82.7	80.0-87.0

細胞培養上清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	92.7	89.7-95.5
1:04	92.0	88.6-94.9
1:08	90.1	85.4-94.1
1:16	92.9	82.1-101.0

樣本值

應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。

樣本類型	樣本數目	平均值（pg/mL）	樣本值（pg/mL）
血清	12	n.d.	n.d.
血漿	8	11.2	n.d.-89.2
細胞培養上清	4	n.d.	n.d.

n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得15.63 pg/mL

測定特異性

本試劑盒識別天然和重組人白介素3。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
IL-1α	IL-7	IL-1α	IL-6
IL-1β	IL-8	IL-1β	GM-CSF
IL-2	IL-10	IL-2	IFN-γ
IL-4	GM-CSF	IL-3
IL-5	CSF	IL-4
IL-6	IFN-γ	IL-5

檢測簡圖

疑問解答

問題	造成原因	解決方法
標曲不好	移液量不準確	檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。
標曲不好	稀釋方法不恰當	檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。
顯色值偏低	孵育時間太短	給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。
顯色值偏低	移液量不足或稀釋不當	校準移液器和規范操作
CV偏高	酶標板清洗不當	使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。
CV偏高	受污染的洗液	準備新鮮洗液
靈敏度較低	試劑盒儲存不當	按照產品組分表進行保存。

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