久久精品国产a三级三级三级_依人在线_国产精品18久久久久白浆_男女黄色一级片_久久久精品午夜免费不卡_日本丰满熟妇BBXBBXHD

儀器網(yiqi.com)歡迎您!

| 注冊 登錄
網站首頁-資訊-專題- 微頭條-話題-產品- 品牌庫-搜索-供應商- 展會-招標-采購- 社區-知識-技術-資料庫-方案-產品庫- 視頻

產品中心

當前位置:儀器網>產品中心> 泰克生物科技(天津)有限公司>服務>納米抗體技術發現服務
收藏  

納米抗體技術發現服務

立即掃碼咨詢

聯系方式:400-822-6768

聯系我們時請說明在儀器網(www.ghhbs.com.cn)上看到的!

掃    碼    分   享
為您推薦

詳細介紹


泰克生物著力于為客戶提供高質量,且具性價比的抗體藥物前期發現技術服務。我們在藥物抗體發現方面擁有10年的項目開發經驗和心得,積累了充足的抗體定制和重組蛋白生產經驗。基于噬菌體展示技術(Phage Display Technology)平臺的服務,泰克生物能夠為客戶提供一系列包括但不限于兔源、鼠源、羊源、駝源及牛源等不同物種的單克隆抗體制備服務,及其配套的完整可追溯性文件體系。

噬菌體展示技術(即:納米抗體技術)是將外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置,通常為M13噬菌體的P3蛋白,使外源基因隨外殼蛋白的表達而展示到噬菌體表面的生物技術。噬菌體展示的優勢在于其展示納米抗體文庫中變異抗體基因的多樣性,各個重組噬菌體(常用噬菌體為M13噬菌體)表面展示出不同的抗原結合域,相較于傳統雜交瘤方法,噬菌體展示技術在抗體基因展示與篩選層面則具有非常突出的效率優勢(如雜交瘤融合效率一般<0.4%,即1000次融合細胞中,大概4個融合子;而噬菌體展示輕松可以獲得10^8-10^9個正確抗體序列)。




█ 噬菌體展示抗體文庫構建服務

 

泰克生物可為客戶提供駝源VHH納米抗體庫,scFv抗體庫,Fab抗體文庫構建以及篩選服務。其中VHH納米抗體庫,又稱為駝源重鏈抗體文庫,抗體分子量大小為15kDa,是駝源動物產生的特有的一種抗體。目前被廣泛應用的駝源VHH抗體(又被稱為納米抗體)噬菌體展示發現路徑如圖1所示:

企業微信截圖_16697866974388.png

圖1基于噬菌體技術平臺的駝源VHH抗體發現服務




泰克生物還可以提供一系列的抗體驗證服務,例如:通過GST pull-down或CO-IP策略檢測展示的蛋白質與其他分子之間的相互作用或分離特定目標、抗原抗體BLI親和力測定、細胞功能驗證及細胞系體外驗證等。

泰克生物提供的納米抗體庫具有豐富的多樣性和規模,是篩選所有抗原類型以及選擇具有高親和力的功能性抗體的理想選擇。憑借多年的經驗,我們開發了多種噬菌體平臺,可以為您定制特定的納米抗體文庫。如果您有興趣開展噬菌體展示抗體項目,或者其他相關服務,例如抗體測序、scFv、Fab和Fc 融合蛋白等,請聯系我們!




█ 服務內容和周期

 


步驟

服務內容

QC標準

周期

Step1:蛋白表達

(1) 密碼子優化+基因模板合成+表達載體構建;

(2) 質粒抽提+轉染(哺乳表達系統)目的蛋白檢測(WB,SDS-PAGE);

(3) 蛋白表達放大+蛋白親和純化;

交付:表達載體,克隆甘油菌,重組蛋白3-3.5mg,純度>85%,標準實驗報告

 

4-6周

Step2:動物免疫

(1) 動物免疫4次,加強免疫一針,共計免疫5針;

(2) 免疫前采集陰性血清,第4針采血進行ELISA檢測血清效價;

(3) 若第4針血清抗體效價(蛋白抗原>10^5;多肽抗原>10^4)滿足要求,則采血前7天再次加強免疫1針,如不滿足要求,則繼續常規免疫;

(4) 效價合格,采血分離單核細胞;

動物:背景清晰(年齡,性別,防疫情況);

免疫:蛋白抗原>10^5;多肽抗原>10^4;

采血:數量100ml以上;

PBMC細胞:>10^5/vial

 

8-10周

Step3:模板cDNA制備

(1) PBMC總RNA提?。≧NA提取試劑盒)

(2) 高保真RT-PCR制備cDNA(反轉錄試劑盒)

cDNA:反轉后>1ug/ul,膠圖分布均勻;

cDNA模板總量>150ug;

1 天

Step4:噬菌體展示文庫構建

(1) 以cDNA為模板,兩輪PCR法擴增VHH基因;

(2) 噬粒構建與轉化: VHH基因拼接噬菌粒載體,電擊轉化TG1宿主菌,構建抗體庫,混合建庫電擊次數不低于30次(單靶點建庫,電擊次數不低于15次);

(3) 鑒定:隨機挑選24個克隆,PCR鑒定陽性率+插入率

(4) 輔助噬菌體準備:M13噬菌體擴增+純化;

(5) VHH展示文庫救援

文庫陽性率:>90%;

文庫插入性率:>90%;

庫容:>10^8

1-2周

Step5:文庫篩選(3輪篩選)(固相篩選)

(1) 抗原包被(單個蛋白篩選,常規默認是固相篩選法或磁珠分選;細胞篩選方法需要單獨核算費用);

(2) 默認3輪篩選:壓力篩選,較大限度去除非特異性抗體;

(3) 挑取96個克隆擴增噬菌體+IPTG誘導表達+ELISA檢測陽性克??;

(4) 挑取全部陽性克隆進行基因測序(>20個,多達96個);

ELISA陽性標準:P/N>3;

VHH篩選標準:CDR氨基酸序列不同

2-3周

Step6:抗體驗證(體外驗證)

(1) 將獲得的抗體序列構建合適的表達載體進行表達+親和純化+抗體蛋白定量;

(2) Elisa驗證抗體與抗原結合,進行下游驗證(交付EC50數據);

(3) BLI法驗證抗體親和力;

(4) 細胞功能驗證:流式驗證;

(5) 驗證細胞系(抗原受體過表達細胞系);

交付:表達載體,克隆菌株,表達菌株,重組抗體蛋白1mg,純度90%;

快速親和力測定結果;

4-6周





█ 服務優勢

 


物種適應性廣泛:人,鼠,兔,羊,羊駝,駱駝,魚等物種的單抗開發均兼容(不適用牛源單抗開發)

技術平臺成熟:噬菌體展示技術提供1級免疫文庫的建庫庫容為10^8-10^9,插入率均滿足>95%,篩選獲得的抗體親和力普遍處于nM- pM級別

開發周期短:獲得PBMC后,建庫到篩選獲得抗體序列,3-4周

? 產品交付標準高:針對免疫庫,交付免疫前后血清,抗體展示文庫,篩選洗脫產物,抗體序列

文庫淘篩定制化(噬菌體展示方式):根據客戶需求不同以及靶點性質不同,會設計不同的篩選方法,如固相,固相/液相和細胞篩選

實驗記錄可追溯:QC質控標準(含RNA提取,cDNA制備等),中英文實驗報告,手寫實驗記錄本 


技術文章

廠商推薦產品

在線留言

換一張?
取消
主站蜘蛛池模板: 99好久被狂躁A片视频无码刻晴 | 亚洲熟妇无码AV | 91视频国产区 | 三级一区二区三区 | 殴亚乱色熟一区二区三四区 | 无码一二大地三区 | 熟妇人妻中文a∨无码 | 永久av免费 | 亚洲欧洲无卡二区视頻 | 国产免费的av | 成人影院天天5g天天爽无毒影院 | 国产精品成人va | 亚洲最大在线观看 | 成人福利热舞hd | 免费国产欧美国日产A | 亚洲性射射 | 亚洲国产日韩欧美综合专区 | 中文字幕精品一区 | 久色视频网站 | 黑人高潮颤抖不拔出来 | 丝袜美女被遭强高潮网站 | 日韩中文字幕专区 | 成本人片无码中文字幕免费 | 国产α级毛片 | 国产亚洲精品美女久久久M 亚洲第一在线 | 亚洲国产成人精品无码一区二区 | 国产乱码精品一区二区三区介绍 | 国产无遮挡a片又黄又爽 | 国产欧美一区综合 | 美女裸乳裸体无遮挡的网站 | 91福利视频一区 | 最近免费中文字幕大全高清 | 日韩毛片一级 | 中文字幕一区二区在线播放 | 精品日韩欧美一区二区三区在线播放 | 欧美一区二区免费 | 天堂综合网久久 | 国产精品久久久久久久久久久久人四虎 | 国产最新精品精品你懂的 | 国产精品视频1区2区3区 | 成人国产亚洲精品A区天堂 女人15一17毛片 |