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Human Serum Albumin(HSA) ELISA Kit 人血清白蛋白ELISA試劑盒

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詳細介紹

產品簡介

人血清白蛋白 (Human Serum Albumin),簡稱HSA,由580個氨基酸殘基單鏈組成,約占血液中總蛋白的60%。它主要由肝臟產生,對維持膠體滲透壓極其重要,還保持了血管室和血管外組織之間的流體平衡。同時作為一種運輸蛋白,攜帶脂肪酸、膽紅素以及各種藥物和激素。血清白蛋白升高常見于濃縮脫水、大量出汗。降低則見于多種疾病,比如肝炎、腎病、營養不良等。

翌圣Human Serum Albumin (HSA) ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿中的人血清白蛋白(Human Serum Albumin)。特異性抗人血清白蛋白抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經過孵育,樣本中存在的人血清白蛋白與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入檢測抗體孵育結合,經洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中人血清白蛋白的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

 

產品信息

貨號

97048ES48 / 97048ES96 

規格

48 T / 96 T

檢測范圍

3.13-200 ng/mL

檢測方法

雙抗夾心法

檢測物種

檢測時長

4小時

靈敏度

0.2 ng/mL

稀釋線性

81 - 126%

回收率

85 - 118%

板內差

7.9%

板間差

8.3%

 

實驗數據

  1. 標曲數據

數據擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數據分析。

 

標準曲線圖

濃度(ng/mL)

顯色值

平均值

校準值

200

2.189

2.201

2.195

2.107

100

1.306

1.393

1.350

1.262

50

0.776

0.843

0.810

0.722

25

0.429

0.430

0.430

0.342

12.5

0.273

0.257

0.265

0.177

6.25

0.183

0.192

0.187

0.099

3.13

0.143

0.152

0.147

0.059

0

0.083

0.092

0.088

/

 
  1. 靈敏度檢測

人血清白蛋白的最低檢測限為0.2 ng/mL,通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。

  1. 精密度檢測

酶標板內精密度

3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定20次,評估酶標板內的精密度。

酶標板間精密度

3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測36次,評估酶標板間的精密度。

項目

板內精密度

板間精密度

樣本

1

2

3

1

2

3

20

20

20

36

36

36

平均值

90

21.3

2.22

90.8

22.03

2.3

標準差

4.6

2.3

0.2

6.37

1.8

0.22

變異系數%

5.2

10.9

7.5

7.0

8.2

9.6

  1. 回收率檢測

 通過不同水平的人血清白蛋白添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

樣本類型

平均回收率(%)

范圍(%)

血清

104.5

84.5-117.7

血漿

99.2

88.0-110.0

細胞培養上清

100.5

91.8-111.0

  1. 稀釋線性檢測

血清稀釋比例

平均期望值(%)

范圍(%)

1:02

97.7

87.8-100.4

1:04

96.9

82.8-104.4

1:08

99.2

82.4-109.2

1:16

104.5

83.6-125.7

 

血漿稀釋比例

平均期望值(%)

范圍(%)

1:02

100.2

82.2-115.2

1:04

93.8

83.2-108.6

1:08

90.8

80.8-111.2

1:16

100.1

82.0-116.9

 

細胞培養上清稀釋比例

平均期望值(%)

范圍(%)

1:02

103.8

102.3-105.9

1:04

98.0

93.7-100.5

1:08

99.8

91.8-111.0

1:16

116.0

89.1-124.

 

應用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

樣本類型

樣本數目

平均值(mg/mL)

樣本值(mg/mL)

血清

6

22.6

9.7-58.2

血漿

6

20.7

11.1-36.6

細胞培養上清

3

n.d.

n.d.

n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得3.13 ng/mL

  1. 測定特異性

本試劑盒識別天然和重組人血清白蛋白。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。

Recombinant human:

Natural proteins:

a-Fetoprotein

Human Pre-Albumin

Parvalbumin

Bovine Serum Albumin

 

Mouse Serum Albumin

 

檢測簡圖

 

疑問解答

問題

造成原因

解決方法

標曲不好

移液量不準確

檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

稀釋方法不恰當

顯色值偏低

孵育時間太短

給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。

移液量不足或稀釋不當

校準移液器和規范操作

CV偏高

酶標板清洗不當

使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

準備新鮮洗液

靈敏度較低

試劑盒儲存不當

按照產品組分表進行保存。

 

 

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