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擴增逆轉雙功能酶Tth DNA Polymerase (5 U/μL)
- 品牌:翌圣生物
- 產地:
- 供應商報價:面議
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
更新時間:2024-12-24 09:03:45
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銷售范圍售全國
入駐年限第1年
營業執照已審核
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詳細介紹
Tth DNA Polymerase是一種從嗜熱菌Thermus thermophilus HB8中發現的耐熱DNA聚合酶。在Mg2+存在的條件下,該酶具有5′-3′ DNA聚合酶活性和5′-3′ 核酸外切酶活性,無3′-5′ 核酸外切酶活性,可廣泛用于PCR擴增反應。在Mn2+存在的條件下,該酶在55-70℃條件下表現出較強的逆轉錄活性,可用于一步法RT-PCR反應。
產品組分
組分編號
組分名稱
產品編號/規格
14607ES72
(250 U)
14607ES80
(1250 U)
14607-A
Tth DNA Polymerase (5 U/μL)
50 μL
250 μL
14607-B
5×Tth RT-PCR Buffer
1 mL
4×1.25 mL
14607-C
10×Tth PCR Buffer (with Mg2+)
500 μL
2×1.25 mL
14607-D
50mM Mg(OAc)2
250 μL
1.25 mL
14607-E
dNTP Mixture (10 mM each)
150 μL
750 μL
運輸與保存方法
干冰運輸。-20℃以下儲存,有效期2年。
單位定義
用活性化的大馬哈魚精子 DNA 作為模板/引物,在 74℃,30 分鐘內,攝入 10 nmol 的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為 1 個活性單位(U)。
注意事項
1)Buffer 在融解時,如果出現少量沉淀屬正?,F象,請顛倒混勻后使用。
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3)本產品僅作科研用途!
使用方法
推薦PCR反應操作流程:
1、反應體系配制
組分
體積(μL)
10×Tth PCR Buffer (with Mg2+)
5
Tth DNA Polymerase (5 U/μL)
0.5
dNTP Mixture (10 mM each)
1
上游 Primer 10μM
2
下游 Primer 10μM
2
Template DNA
50 pg- 1μg
ddH2O
to 50
【注】:可根據具體實驗調整Tth DNA Polymerase、上下游引物和的dNTP Mixture用量。
2、PCR反應程序
循環步驟
溫度(ºC)
時間
循環數
預變性
94
30 sec-5 min
1
變性
94
30 sec
退火
50-70
30 sec
35
延伸
72
60 sec/kb
終延伸
72
10 min
1
【注】:可根據具體實驗調整反應條件。
推薦RT-PCR反應操作流程:
1、反應體系配制
組分
體積(μL)
5×Tth RT-PCR Buffer
10
Tth DNA Polymerase (5 U/μL)
1.5
50mM Mg(OAc)2
2.5
dNTP Mixture (10 mM each)
1.5
上游 Primer 10μM
2
下游 Primer 10μM
2
Template RNA
50 pg- 1μg
ddH2O
to 50
【注】:可根據具體實驗調整Tth DNA Polymerase、上下游引物和的dNTP Mixture用量。
2、RT-PCR反應程序
循環步驟
溫度(ºC)
時間
循環數
逆轉錄
55-70
30 min
1
預變性
94
30 sec-5 min
1
變性
94
30 sec
退火
50-70
30 sec
35
延伸
72
60 sec/kb
終延伸
72
10 min
1
【注】:可根據具體實驗調整反應條件。
HB221123
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