類器官培養(yǎng)中最經(jīng)典的細(xì)胞因子培養(yǎng)方案—WNER

來源：翌圣生物科技(上海)股份有限公司      分類： 2024-02-23 00:00:00 24閱讀次數(shù)

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類器官是一種體外培養(yǎng)的三維結(jié)構(gòu)，可以模擬真實器官的組織結(jié)構(gòu)和功能。它們由干細(xì)胞或多能性細(xì)胞發(fā)展而來，通過特定的培養(yǎng)條件和因子誘導(dǎo)，能夠自組裝成具有多種細(xì)胞類型和器官特征的小型器官。類器官可用于研究生物學(xué)、疾病機制、藥物篩選和個性化醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。它們能夠提供更接近真實器官的模型，幫助我們更好地理解組織發(fā)育過程、疾病發(fā)生機制以及藥物在人體內(nèi)的作用。

 

表1. 細(xì)胞因子在類器官中的應(yīng)用

細(xì)胞因子	類器官應(yīng)用
Human Wnt-3a	胃類器官、腸道類器官、肝臟類器官、胰腺類器官、視網(wǎng)膜
Human R-Spodin 1	胃類器官、腸道類器官、肝臟類器官、肺類器官、胰腺類器官、前列腺類器官、乳腺類器官
Human Noggin	胃類器官、腸道類器官、肝臟類器官、肺類器官、胰腺類器官、前列腺類器官、乳腺類器官
Human EGF	胃類器官、腸道類器官、肝臟類器官、胰腺類器官、前列腺類器官、乳腺類器官

不同類器官在培養(yǎng)過程中所需的細(xì)胞因子是不同的。類器官培養(yǎng)中最經(jīng)典的細(xì)胞因子培養(yǎng)方案為 WNER（分別代表：Wnt-3a、Noggin、EGF 和 R-Spondins），這 4 種因子的增減組合可以適用于幾乎所有的類器官培養(yǎng)實驗，包括胃上皮類器官、腸道上皮類器官、肝臟類器官、胰腺類器官、乳腺類器官等。

 

 

 

 

 

 

R-Spodin 1/RSPO1

 

功能：

R-Spodin 1屬于Wnt調(diào)節(jié)物的RSPO家族，該家族包括4個成員，即RSPO1-4。該家族是多個器官中維持成體干細(xì)胞的微環(huán)境因子。RSPO1是一種分泌型激活蛋白。RSPO1表達在發(fā)育中的中樞神經(jīng)系統(tǒng)得某些區(qū)域，在腎上腺、卵巢、睪丸、甲狀腺和氣管中也有發(fā)現(xiàn)。RSPO1作為Wnt信號通路的激活劑，通過增強Wnt信號在多方面發(fā)揮作用。R-spondin-1 是 Lgr5 的配體，而 Lgr5 通常被認(rèn)為是干細(xì)胞的標(biāo)記物，Lgr5 陽性干細(xì)胞被證實具有自我更新和擴增成為類器官的潛能。通過 R-spondin-1 激活 Lgr5信號通路，可以促進胃、小腸等細(xì)胞的增殖。R-spondin-1/Lgr5 信號通路可以正向促進 Wnt 信號通路，以此促進腸道干細(xì)胞增殖和分裂，并有助于維持干細(xì)胞的表征。Wnt 依賴性信號通路通過維持 Lgr5 陽性干細(xì)胞的干性，同時 Wnt 非依賴性信號通路則通過抗凋亡的方式在腸類細(xì)胞的生長中共同發(fā)揮作用。R-spondin-1 作為 Wnt 信號通路的激活劑，通過增強 Wnt 信號在多方面發(fā)揮作用，在乳腺類器官、小腸類器官、肝臟類器官的發(fā)育生長過程中均有支持作用。

Wnt-3a

 

功能：

Wnt 家族共包含 19 個成員，如 Wnt-1、Wnt-3、Wnt-3A、Wnt-5A 等，在胚胎發(fā)育、組織再生、干細(xì)胞分化以及腫瘤發(fā)生過程中起到重要作用。Wnt-3A 作為 Wnt 家族成員之一，被認(rèn)為是 Wnt/β-catenin 通路的激活因子，在細(xì)胞增殖、分化和凋亡過程中起關(guān)鍵作用。Wnt 信號通路通常包括以下 3 種途徑，即經(jīng)典 β-catenin 依賴性通路、β-catenin獨立的 Wnt/ 平面細(xì)胞極性途徑以及非經(jīng)典 Wnt/Ca2+ 途徑，其中經(jīng)典的 β-catenin 依賴性途徑被證實在多種干細(xì)胞的生長、增殖以及分化過程中發(fā)揮作用。通常認(rèn)為，在 Wnt信號通路中，Wnt 可以與 Fz 受體以及 LRP5/6 受體結(jié)合形成復(fù)合物，以此保證 β-catenin 在細(xì)胞內(nèi)得以積累并與細(xì)胞核內(nèi)的 LEF/TCF 轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，從而啟動 Wnt 信號通路下游靶基因 c-myc、cyclingD1 的轉(zhuǎn)錄過程，達到促進干細(xì)胞生長、增殖、分化和抑制凋亡的效果。

EGF

 

功能：

EGF是一種強效生長因子，可刺激多種上皮發(fā)育、血管生成、抑制胃酸分泌、成纖維細(xì)胞增殖和培養(yǎng)中表皮細(xì)胞的集落形成。EGF是EGF家族的創(chuàng)始成員，該家族還包括TGF-α、兩調(diào)節(jié)蛋白（AR）、β細(xì)胞蛋白（BTC）、表胚蛋白（EPR）、肝素結(jié)合EGF-樣生長因子（HB-EGF）、表觀蛋白和神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白（NRG1-6）。生理學(xué)上，EGF存在于各種體液中，包括血液、牛奶、尿液、唾液、精液、胰液、腦脊液和羊水。EGF是EGF受體（ErbB）的高親和力配體，EGF結(jié)合并誘導(dǎo)EGF受體的二聚化，導(dǎo)致蛋白酪氨酸激酶信號通路的激活，從而轉(zhuǎn)導(dǎo)EGF家族信號。在小腸類器官培養(yǎng)中，表皮細(xì)胞生長因子可以促進腸道的生長，表皮細(xì)胞生長因子信號通路在腸類器官生長中發(fā)揮重要作用。此外，表皮細(xì)胞生長因子對膠質(zhì)瘤干細(xì)胞具有促進增殖的作用。

Noggin

 

功能：

Noggin是骨形態(tài)發(fā)生蛋白抑制劑的分泌蛋白，其以不同的親和力與骨形態(tài)發(fā)生蛋白4、骨形態(tài)發(fā)生蛋白7等結(jié)合。骨形態(tài)發(fā)生蛋白作為轉(zhuǎn)化生長因子 β 超家族的一種分泌信號因子，可以抑制 Wnt 信號，以此控制干細(xì)胞的自我更新。骨形態(tài)發(fā)生蛋白可以增強PTEN 活性，從而抑制β-catenin 活性，抑制 Wnt 信號。而 Noggin 與骨形態(tài)發(fā)生蛋白結(jié)合，可以降低 PTEN 對 β-catenin 的抑制活性，從而協(xié)調(diào)Wnt 信號激活干細(xì)胞。也有研究證實，大鼠肝類器官的長期培養(yǎng)需要維持高水平的 Wnt 信號傳導(dǎo)以及對骨形態(tài)發(fā)生蛋白信號的持續(xù)抑制，在 Wnt 或Noggin缺失條件下，干細(xì)胞標(biāo)記物 Lgr5 的表達也有所下降，這表明 Lgr5 的表達可能也依賴于 Wnt 激活和骨形態(tài)發(fā)生蛋白的抑制。因此，Noggin在類器官的長期培養(yǎng)中可能通過對 Lgr5 表達和 Wnt 信號傳導(dǎo)產(chǎn)生影響從而發(fā)揮作用，以此促進干細(xì)胞的擴增。在肝類器官、小腸類器官以及輸卵管類器官的培養(yǎng)中均需使用Noggin 進行長期培養(yǎng)。

 

 

 

 

 

產(chǎn)品特點

 

Yeasen提供一系列高質(zhì)量細(xì)胞因子，包括Wnt-3a, R-Spondin 1、EGF, Noggin, FGF-7和FGF-10等因子，適用于類器官相關(guān)培養(yǎng)。

• 無動物源性：無動物病毒、無致病物質(zhì)、無外源因子污染、安全性高；

• 質(zhì)量穩(wěn)定：可保證連續(xù)穩(wěn)定的批量生產(chǎn)，批間差異小；

• 高純度：純度高于95%；

• 超低內(nèi)毒素：<0.01EU/μg；

• 高活性：經(jīng)類器官培養(yǎng)驗證。

 

 

 

類器官培養(yǎng)驗證

 

翌圣細(xì)胞因子,Human Wnt3a、Human RSPO1、Human noggin、Human EGF已經(jīng)在人腫瘤類器官如肺癌、宮頸癌、卵巢癌、胰腺癌及腸癌等，正常類器官如人和小鼠的小腸類器官等體外模型上進行了驗證。

 

 

 

 

高活性

 

Human Wnt3a

 

Figure 1.Measured by its ability to induce Topflash reporter activity in HEK293T human embryonic kidney cells. The ED50 for this effect is 25 ng/mL.

 

Human R-Spondin /RSPO1

Figure 2. Measured by its ability to induce Topflash reporter activity in HEK293T human embryonic kidney cells. The EC50 for this effect is 1.0 - 10.0 ng/mL in the presence of 5 ng/mL recombinant Wnt3a.

 

 

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱	存貨編碼	規(guī)格	目錄價(元）	促銷價（元）
Human Wnt-3a	92276ES10	10 μg	815	578
	92276ES60	100 μg	6865	3478
	92276ES76	500 μg	19385	9698
Human RSPO1	92278ES10	10 μg	815	578
	92278ES60	100 μg	6325	2535
	92278ES80	1 mg	34425	11985
Human Noggin	92528ES10	10 μg	815	485
	92528ES60	100 μg	3485	1595
	92528ES76	1 mg	18885	9445
Human EGF	92701ES60	100 μg	815	185
	92701ES76	500 μg	1755	485
	92701ES80	1 mg	1855	885

 

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