一文詳解類(lèi)器官培養(yǎng)專(zhuān)用基質(zhì)膠！
2024年10月10日國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心（簡(jiǎn)稱(chēng)CDE）在其官網(wǎng)發(fā)布了《模型引導(dǎo)的罕見(jiàn)病藥物研發(fā)技術(shù)指導(dǎo)原則（征求意見(jiàn)稿）》并予以公示，為制定對(duì)應(yīng)國(guó)家指導(dǎo)性標(biāo)準(zhǔn)來(lái)廣泛聽(tīng)取各界意見(jiàn)和建議。在征求意見(jiàn)稿內(nèi)提到：非臨床研究數(shù)據(jù)包括但不限于基因、分子、細(xì)胞、類(lèi)器官、器官芯片、動(dòng)物研究數(shù)據(jù)等。其中提到基于類(lèi)器官和器官芯片所獲得的數(shù)據(jù)也能作為非臨床研究數(shù)據(jù)的來(lái)源之一。
類(lèi)器官（organoids）是指一種利用干細(xì)胞、祖細(xì)胞等在體外培養(yǎng)出的3D細(xì)胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結(jié)構(gòu)組織類(lèi)似物。2021年，類(lèi)器官技術(shù)被列為“十四五”國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)專(zhuān)項(xiàng)[1]，作為疾病模型，相比于傳統(tǒng)2D疾病模型，類(lèi)器官在闡明疾病的發(fā)展、穩(wěn)態(tài)性和發(fā)病機(jī)理等與體內(nèi)環(huán)境更加接近，在多領(lǐng)域?qū)l(fā)揮重要，諸如細(xì)胞治療、藥物研發(fā)、基因工程、免疫研究、組織再生等領(lǐng)域。基質(zhì)膠作為類(lèi)器官和3D培養(yǎng)的重要載體，在其中發(fā)揮著舉足輕重的作用。
圖.資料源自CDE官網(wǎng)
基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長(zhǎng)因子。在室溫條件下，基質(zhì)膠聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì)，能模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化。翌圣生物開(kāi)發(fā)生產(chǎn)的Ceturegel® Matrix基質(zhì)膠不含LDEV（乳酸脫氫酶增高病毒），超低內(nèi)毒素含量，包括基本濃度、高濃度、低生長(zhǎng)因子和干細(xì)胞和類(lèi)器官專(zhuān)用不同類(lèi)型的基質(zhì)膠。
應(yīng)用方向
-
安全性高：不含LDEV（乳酸脫氫酶增高病毒）；
-
濃度多樣性：濃度范圍在8~20 mg/mL之間；
-
批次穩(wěn)定性好：嚴(yán)格生產(chǎn)質(zhì)檢過(guò)程保證批次間性能穩(wěn)定；
-
低內(nèi)毒素：內(nèi)毒素含量＜8 EU/mL；
-
污染物檢測(cè)： 經(jīng)檢測(cè)無(wú)支原體和細(xì)菌、真菌殘留；
-
產(chǎn)量高：產(chǎn)量在50L/月以上；
-
兼容性好：可與任何類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)基兼容。
樣本培養(yǎng)對(duì)比結(jié)果
|
樣本編號(hào) |
癌種 |
類(lèi)器官數(shù)量（個(gè)） |
類(lèi)器官平均直徑（μm） |
培養(yǎng)結(jié)果 |
是否一致 |
|||
|
實(shí)驗(yàn)組 |
對(duì)照組 |
實(shí)驗(yàn)組 |
對(duì)照組 |
實(shí)驗(yàn)組 |
對(duì)照組 |
|||
|
CRC-Y-002 |
腸癌 |
20400 |
21600 |
124.03 |
127.45 |
成功 |
成功 |
是 |
|
LC-Y-001 |
肺癌 |
34800 |
36000 |
109.26 |
110.39 |
成功 |
成功 |
是 |
樣本病理鑒定對(duì)比結(jié)果
|
序號(hào) |
樣本編號(hào) |
癌種 |
樣本類(lèi)型 |
HE&結(jié)果 |
|
1 |
CRC-Y-002 |
腸癌 |
組織&PDO |
一致 |
|
2 |
LC-Y-001 |
肺癌 |
組織&PDO |
一致 |
樣本免疫組化對(duì)比結(jié)果
樣本基因檢測(cè)結(jié)果
|
編號(hào) |
癌種 |
組織獨(dú)有突變 |
類(lèi)器官獨(dú)有突變 |
共有突變 |
組織突變 |
類(lèi)器官突變 |
組織共有突變占比（%） |
類(lèi)器官共有突變占比（%） |
標(biāo)準(zhǔn)偏差（%） |
|
CRC-Y-002 |
腸癌 |
16 |
23 |
159 |
175 |
182 |
90.86 |
87.36 |
1.75 |
|
LC-Y-001 |
肺癌 |
24 |
14 |
158 |
182 |
172 |
86.81 |
91.86 |
2.52 |
樣本藥敏檢測(cè)結(jié)果
|
序號(hào) |
樣本 |
對(duì)照組 |
實(shí)驗(yàn)組 |
結(jié)果判定 |
||
|
IC50 |
敏感性 |
IC50 |
敏感性 |
|||
|
CRC-Y-002 |
腸癌 |
2.10 |
耐藥 |
3.94 |
耐藥 |
真陰性TN |
|
1.64 |
耐藥 |
3.19 |
耐藥 |
真陰性TN |
||
|
1.76 |
耐藥 |
1.11 |
耐藥 |
真陰性TN |
||
|
LC-Y-001 |
肺癌 |
0.50 |
敏感 |
0.33 |
敏感 |
真陽(yáng)性TP |
|
0.08 |
敏感 |
0.30 |
敏感 |
真陰性TN |
||
|
7.80 |
耐藥 |
5.09 |
耐藥 |
真陰性TN |
||
注：以上數(shù)據(jù)均為翌圣生物委托第三方獨(dú)立合規(guī)機(jī)構(gòu)做的對(duì)比實(shí)驗(yàn)測(cè)定
1、拿到的基質(zhì)有色差的變化（淡黃色到深紅色）是什么原因？
對(duì)于含酚紅的基質(zhì)膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的，但是與5％CO2平衡后色差即會(huì)減少。凍融后，輕輕搖晃試劑瓶使基質(zhì)膠分散均勻。
2、基質(zhì)膠的操作要注意哪些事項(xiàng)？
所有操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，應(yīng)使用預(yù)冷的器材以保證基質(zhì)膠正常操作。
3、基質(zhì)膠的如何分裝凍存使用？
可將凍融后的Ceturegel® Matrix基質(zhì)膠分裝在多個(gè)凍存管，凍存管需預(yù)冷，分裝后迅速冷凍并保存，避免多次凍融。
|
產(chǎn)品名稱(chēng) |
產(chǎn)品編號(hào) |
規(guī)格 |
|
Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 |
40191ES08/10 |
5/10 mL |
|
Cebrary® Intestinal Cancer Organoid Growth Medium (Human) 腸癌類(lèi)器官生長(zhǎng)培養(yǎng)基 |
41427ES50/60/76 |
50/l00/500mL |
|
Cebrary® Lung Cancer Organoid Growth Medium (Human) 肺癌類(lèi)器官生長(zhǎng)培養(yǎng)基 |
41431ES50/60/76 |
50/l00/500mL |
|
Cebrary®Cell recovery solution for Organoid類(lèi)器官回收液 |
41421ES30/60 |
30/100 mL |
|
Cebrary®Cell freezing medium for Organoid 類(lèi)器官凍存液 |
41422ES30/60 |
30/100 mL |
|
ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit ATP Luminescent 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒 |
40210ES10/60 |
10/100 mL |
全部評(píng)論(0條)
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